实验1骨骼肌的单收缩与强直收缩

实验1骨骼肌的单收缩与强直收缩实验一骨骼肌的单收缩与强直收缩一、 目的要求1、 熟练掌握神经肌肉标本的制备；2、 观察骨骼肌收缩反应的形式，分析肌肉收缩的特征；3、 观察刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响，强直收缩形成的条件。二、 实验内容1、 制备神经肌肉标本2、 骨骼肌的单收缩与强直收缩的描记三、 基本原理一次短促的有效刺激产生一次单收缩，给予标本相继两个最适刺激，若刺激间隔大于单收缩的时程，则肌肉出现两个分离的单收缩；使两次刺激的间隔小于该肌肉收缩的总时程时，则会出现一连续的收缩，叫复合收缩。将神经-肌肉标本用一连串的电刺激，若刺激间隔大于单收缩的时程，则肌肉出现几个分离的单收缩；若刺激间隔小于单收缩的时程而大于不应期，则前一次收缩和舒张尚未结束，新的收缩在此基础上出现，称为强直收缩。新刺激落在前一次收缩的舒张期所出现的强而持久的收缩过程称不完全强直收缩；新刺激落在前一次收缩的收缩期，所出现的强而持久的收缩过程称完全强直收缩。四、 动物与器材蛙，手术器械，玻璃解剖针，锌铜弓，计算机采集系统（Pclab），张力传感器，肌槽（神经屏蔽盒），培养皿，任氏液，滴管，棉线五、 方法与步骤（一）制备坐骨神经-腓肠肌标本毁髓左手握蛙背部向上，用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部使头向前俯，右手持毁髓针由两眼之间沿中线向后方触划，触及两耳中间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。将毁髓针向凹陷处垂直刺入，刺破皮肤即入枕骨大孔。然后将针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以捣毁脑组织。如毁髓针确在颅腔内，实验者可感到针触颅骨，此时的动物称为单毁髓动物。脑组织捣毁后，将毁髓针退出至枕骨大孔处，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。彻底捣毁脊髓时可看到蛙后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物称为双毁髓动物。脑与脊髓完全破坏后，动物四肢肌肉的紧张性完全消失。如仍能表现四肢肌肉紧张或活动自如，必须重新毁髓。剥皮在蛙前肢下方处，左手用镊子夹起背部皮肤，右手用剪刀将皮肤作一环形切口。之后左手捏住蛙体上部，右手捏住已切开的皮肤，向下剥掉全部后肢皮肤。剪除躯干上部及内脏—手持手术镊轻轻提起耻骨联合上方的腹壁，另一手用手术剪横向剪开体壁肌肉，再沿腹中线向前剪开体壁，用手术镊轻轻提起内脏，自耻骨部剪断（勿损伤脊神经），轻轻托起后肢，使头部及内脏向下，用粗剪刀在剥去皮肤的躯干部剪断脊柱，将蛙头、前肢和内脏一并弃去，仅保留一段脊柱，后肢及两侧坐骨神经，将标本放入盛有任氏液的培养皿中，洗净双手及用过的器械。分离两后肢用左手托起标本，右手持粗剪刀沿中线剪开脊柱，从耻骨联合中央分离开两后肢。将分开的后肢一只继续剥制标本，另一只放入任氏液中备用。分离坐骨神经取一标本腹面向上放在蜡盘上，将趾端向夕卜侧翻转，使其足底朝上，再将其固定（用大头针），用玻璃分针沿脊柱向下分离坐骨神经（白色粗大），再在下肢股部背侧股二头肌和半膜肌之间找出坐骨神经的大腿部分，小心分离，使之完全暴露。坐骨神经基部有一梨状肌盖住神经，用玻璃分针轻轻挑起此肌肉便可看清下面穿行的坐骨神经。剪断梨状肌，完全暴露坐骨神经，挑起该神经，逐一剪去分支，分离至膝关节处，用剪刀剪去沿途的肌肉及组织、脊柱，只保留一小段与神经相连的部分（约1~3个脊椎骨）。游离腓肠肌用玻璃分针或镊子将腓肠肌、跟腱分离，并穿线结扎。在结扎处下端用粗剪刀剪断跟腱，左手执线提起腓肠肌，右手用剪刀剪去与周围联系的组织，只保留腓肠肌的起始端与骨的联系。游离坐骨神经腓肠肌标本将该后肢股部所有肌肉从膝关节起沿股骨剥离并剪去，用粗剪刀剪去股骨的上1/3；再在膝关节下将小腿剪去，留下的即为坐骨神经腓肠肌标本。检查标本机能并稳定其兴奋性用浸有任氏液的铜锌弓轻轻接触坐骨神经以刺激之，如腓肠肌有收缩反应，表明标本制作良好。右手提起腓肠肌上的结扎线，轻轻将标本放入任氏液中（切勿使神经受牵拉），稳定15min左右，即可进行实验。注意事项：剥制标本时，避免过度牵拉神经，不能用金属器械触碰神经干;分离神经时，一定要把周围的其它组织剥离干净；标本制备过程中，要随时用任氏液湿润神经和肌肉，防止干燥;标本制备过程中，不能使动物的皮肤分泌物和血液等沾污神经和肌肉，也不能用水冲洗，以免影响组织的机能；实验要迅速，以免时间过长影响标本活性（兴奋性）；所制备的标本在结构上必须是完整的。（二） 实验仪器用品的准备打开计算机采集系统（Pclab），连接张力传感器、刺激输出。将标本的股骨头插入肌槽电极旁的小孔内，并旋紧固定螺丝将标本固定，腓肠肌肌腱扎线与张力传感器的应变梁相连。调节好扎线，不可过紧或过松，以使肌肉自然拉平为宜。将坐骨神经搭在肌槽的电极上。（三） 计算机采集系统的准备1、在〃实验项目”菜单下〃神经肌肉实验”对话框中找到〃刺激频率与反应的关系〃，点击，即可开始实验。2.实验观察采样：先点击〃开始〃按钮，再点击喇激〃按钮，系统开始工作文件存盘：点击“暂停”按钮，停止采样，选中图形，粘贴到已打开的wo