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文档简介
血糖的测定实验四生化实验-血糖的测定血糖及血糖水平的概念:血糖:指血液中的单糖:葡萄糖血糖水平:血浆中葡萄糖浓度血糖总维持在恒定水平:
3.9~6.7mmol/L生化实验-血糖的测定调节血糖水平的激素:胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。血糖水平异常:⑴高血糖及糖尿病;⑵低血糖生化实验-血糖的测定临床:血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。科研:在代谢疾病的研究中,常测定血糖。在某些药物的研究中,也涉及血糖的测定。测定血糖的意义生化实验-血糖的测定测定方法无机化学法:Folin-Wu法有机化学法:邻甲苯胺法酶法:葡萄糖氧化酶法血糖测定的常用方法生化实验-血糖的测定葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理(1)葡萄糖+O2+H2O(2)H2O2+4-氨基安替吡啉+苯酚葡萄糖酸+H2O2葡萄糖氧化酶(GOD)H2O+红色醌式物质过氧化物酶(POD)Trinder反应505nm光吸收法测定相对血糖浓度生化实验-血糖的测定分光光度计的工作原理生化实验-血糖的测定朗伯-比尔定律朗伯定律:A=k1L比尔定律:A=k2C朗伯-比尔定律:如同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光度的影响,则吸光度与溶质的浓度和溶液的厚度的乘积成正比。
A=KLC生化实验-血糖的测定朗伯-比尔定律应用A标=KC标LA样=KC样L
标准品法测定未知样品含量C样=A样A标×C标生化实验-血糖的测定1.接通电源,调整波长。2.比色杯中加入空白及待测样品,并放入分光光度计中,注意:加入样品量不超过比色杯体积的2/3。3.调模式为“透射比”,对空白对照进行调“0”(开盖)和调“100”(闭盖)。4.调模式为“吸光度”,将空白对照调“0”,测定待测样品的吸光度值。分光光度计的使用生化实验-血糖的测定生化实验-血糖的测定生化实验-血糖的测定
葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测激素对血糖浓度的影响方法生化实验-血糖的测定(1)取4支试管,按下表加入试剂:试剂标准管(ml)测定管1(ml)测定管2(ml)空白管(ml)血清样品–0.020.02–葡萄糖标准液0.02–––蒸馏水–––0.02酶酚混合试剂3.003.003.003.00实验步骤:充分混匀,37℃水浴中保温20min;冷却至室温后,505nm处比色比色方法:以空白管调零,读取标准管及测定管光密度值。生化实验-血糖的测定(2)计算:依据朗伯-比尔定律:A=KLC
标准管葡萄糖浓度:5mmol/L
测定管葡萄糖含量(mmol/L)=测定管光密度
标准管光密度×5生化实验-血糖的测定正确使用比色器皿:手拿比色皿的毛面;比色液应占比色皿的2/3。血糖测定应在取血后2小时内完成,放置太久,血糖易分解,故使含量降低。酶酚混合液一般现用现配。
注意事项生化实验-血糖的测定小结1、葡萄糖氧
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