高中生物选修一生物技术实践知识点总结

高中生物选修一生物技术实践知识点总结

专题一传统发酵技术的应用

课题一果酒和果醋的制作

1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大

量代谢产物的过程。

2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵•无

氧发酵：酒精发酵乳酸发酵

3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真

菌•酵母菌的生殖方式：出芽生殖（主要）

分裂生殖抱子生殖

4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，

大量繁殖。C6H12O6+6O2-6CO2+6H2O

5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发

酵。C6Hl206T2c2H50H+6c。2

6、20C左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵

时一般将温度控制在18℃-25℃

7、在葡萄酒自然发酵的过程中，起主要作

用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母

菌.在发酵过程中，随着酒精浓度的提高,

红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄

酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液

中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数

其他微生物都因无法适应这一环境而受

到制约。

8、醋酸菌是单细胞细菌（原核生物），代谢

类型是异养需氧型，生殖方式为二分裂

9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄

汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，

醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为

醋酸6

C2H5OH+O2^CH3COOH+H2O

10、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气

的含量特别敏感，当进行深层发酵时，

即使只是短时间中断通入氧气，也会引

起醋酸菌死亡。②醋酸菌最适生长温度

为30〜35℃,控制好发酵温度，使发酵

时间缩短，又减少杂菌污染的机会。③

有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒

精为底物的氧化。

11、实验流程：挑选葡萄-冲洗-榨汁一

酒精发酵一果酒（一醋酸发酵1果醋）

12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产

生，可以用重辂酸钾来检验。在酸性条

件下，重辂酸钾与酒精反应呈现灰绿

色。先在试管中加入发酵液2mL,再滴

入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43

滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的

重辂酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜

色

13、充气口是在醋酸发酵时连

接充气泵进行充气用的；排气

口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；

出料口是用来取样的。排气口要通过一个

长而弯曲的胶管与瓶身相连接，其目的是

防止空气中微生物的污染。开口向下的目

的是有利于二氧化碳的排出。使用该装置

制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该

充气口连接气泵，输入氧气。

疑难解答

(1)你认为应该先冲洗葡萄还是先除去

枝梗？为什么？

应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除

去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染

的机会。

(2)你认为应该从哪些方面防止发酵液

被污染？

如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁

机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精消

毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全

揭开瓶盖等。

(3)制葡萄酒时，为什么要将温度控制

在18〜25℃?制葡萄醋时，为什么要将温

度控制在30〜35℃?

温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。

20C左右最适合酵母菌的繁殖。因此需要

将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸

菌是嗜温菌，最适生长温度为30〜35℃,

因此要将温度控制在30〜35°C。

课题二腐乳的制作

1、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青

霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要

作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌。

代谢类型是异养需氧型。生殖方式是抱

子生殖。营腐生生活。

2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将

豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨

基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂

肪酸。

3、实验流程：让豆腐上长出毛霉一加盐腌

制-加卤汤装瓶—密封腌制

4、酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行

前期发酵和后期发酵。

前期发酵的主要作用：L创造条件让毛

霉生长。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐

乳成型。

后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化

反应的过程。通过各种辅料与酶的缓解作

用，生成腐乳的香气。

5、将豆腐切成3cmx3cmx1cm的若干块。

所用豆腐的含水量为70%左右，水分过

多则腐乳不易成形。*水分测定方法如

下：精确称取经研钵研磨成糊状的样品

5〜10g（精确到0.02mg）,置于已知重量

的蒸发皿中，均匀摊平后，在100〜

105℃电热干燥箱内干燥4h,取出后置于

干燥器内冷却至室温后称重，然后再烘

30min,直至所称重量不变为止。

样品水分含量（%）计算公式如下：

（烘干前容器和样品质量-烘干后容器

和样品质量）/烘干前样品质量

・毛霉的生长：条件：将豆腐块平放在笼

屉内，将笼屉中的控制在15〜18℃,并保

持一定的温度。

来源：1.来自空气中的毛

霉抱子，2.直接接种优良毛霉菌种

时间：5天

・加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整

齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层

数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐

要铺厚一些。加盐腌制的时间约为8天左

右。

・用盐腌制时，注意控制盐的用量：盐的

浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可

能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影

响腐乳的口味

•食盐的作用：L抑制微生物的生长，避

免腐败变质2.析出水分，是豆腐变硬，在

后期制作过程中不易酥烂3.调味作用，给

腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌丝上的蛋

白酶。

・配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳的色、

香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而

成的。卤汤中酒的含量一般控制在12%左

右。

•酒的作用：L防止杂菌污染以防腐2.与

有机酸结合形成酯，赋予腐乳风味3.酒精

含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有

很大关系，酒精含量越高，对蛋白酶的抑

制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精

含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质

的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以

成块。

・香辛料的作用：1.调味作用2.杀菌防腐

作用3.参与并促进发酵过程

•防止杂菌污染：①用来膈制腐乳的玻璃

瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。②装瓶

时，操作要迅速小心。整齐地摆放好豆

腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。

封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，

防止瓶口被污染。

疑难解答

(1)利用所学的生物学知识，解释豆腐

长白毛是怎么一回事？

豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格

地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌

一典一o

(2)为什么要撒许多盐，将长毛的豆腐

腌起来？

盐能防止杂菌污染，避免豆腐腐败。

(3)我们平常吃的豆腐，哪种适合用来

做腐乳？

含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用

含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。

(4)吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一

层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成

的呢？它对人体有害吗？它的作用是什

么？

“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的

菌丝(匍匐菌丝)，对人体无害。它能形

成腐乳的“体”，使腐乳成形。

课题三制作泡菜

•制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代谢

类型是异养厌氧型。在无氧条件下，降糖

分解为乳酸。分裂方式是二分裂。反应式

为：C6Hl206」-2c3H603+能量含抗生

素牛奶不能生产酸奶的原因是抗生素杀死

乳酸菌。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳

酸杆菌。乳酸杆菌常用于生产酸奶。

・亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食

品生产中用作食品添加剂。

•膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健

康，国家规定肉制品中不超过30mg/kg,酱

腌菜中不超过20mg/kg,婴儿奶粉中不超过

2mg/kg。亚硝酸盐被吸收后随尿液排出体

外，但在适宜pH、温度和一定微生物作用

下形成致癌物质亚硝胺。

亚

硝•一般在腌制10天后亚硝

酸

盐

含酸盐含量开始降低，故在

里

>10天之后食用最好

发酵时间（d）

*测定亚硝酸盐含量的原理

是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基

苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-幕基乙

二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已

知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜

中亚硝酸盐含量。

专题二微生物的培养与应用

课题一微生物的实验室培养

•培养基：人们按照微生物对营养物质的

不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基

质，是进行微生物培养的物质基础。

・培养基按照物理性质可分为液体培养基

半固体培养基和固体培养基。在液体培养

基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的

一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）

后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体

培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌

落。根据菌落的特征可以判断是哪一种

菌。液体培养基应用于工业或生活生产，

固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，

半固体培养基则常用于观察微生物的运动

及菌种保藏等。

•按照成分培养基可分为人工合成培养基

和天然培养基。合成培养基是用成分已知

的化学物质配制而成，其中成分的种类比

例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然

培养基是用化学成分不明的天然物质配制

而成，常用于实际工业生产。

•按照培养基的用途，可将培养基分为选

择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指

在培养基中加入某种化学物质，以抑制不

需要的微生物生长，促进所需要的微生物

的生长。鉴别培养基是根据微生物的特

点，在培养基中加入某种指示剂或化学药

品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生

物。

•培养基的化学成分包括水、无机

盐、碳源、氮源、生长因子等。

•碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的

物质。如C02.NaHC()3等无机碳源；糖类、

石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物

只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳

源。

•氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的

物质。如心阻、NO：、NH；(无机氮源)

蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白陈

（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利

用N2O

・培养基还要满足微生物生长对PH、特殊

营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳

酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培

养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养

细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养

厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件

・无菌技术•获得纯净培养物的关键是防

止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方

面：

①对实验操作的空间、操作者的衣着和

手，进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的器皿、接种用具和

培养基等器具进行灭菌。

③为避免周围环境中微生物的污染，实验

操作应在酒精灯火焰附近进行。

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料

用具与周围的物品相接触。

无菌技术除了用来防止实验室的培养

物被其他外来微生物污染外，还有什么目

的？

答：无菌技术还能有效避免操作者自

身被微生物感染。

•消毒与灭菌的区别

消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅

杀死物体表面或内部'一部分对人体有害的

微生物（不包括芽抱和抱子）。消毒方法

常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些

不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒

精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消

毒。

灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体

内外所有的微生物，包括芽抱和抱子。灭

菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽

灭菌。

灭菌方法：

①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭

菌法；

②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌

法，所用器械是干热灭菌箱；

③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭

菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。

④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌

法，所用器械是紫外灯。

比理化因消灭微生芽抱和抱

较素的作物的数量子能否被

项用强度消灭

消较为温部分生活不能

毒和状态的微

生物

灭强烈全部微生能

菌物

制作牛肉膏蛋白陈固体培养基

(1)方法步骤：计算、称量、溶化、灭

菌、倒平板。

(2)倒平板操作的步骤：

①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面

上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔

出棉塞。

②右手拿锥形瓶，圈瓶口迅速通过火焰。

③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条

稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培

养基（约10〜20位）倒入培养皿，左手立

即盖上培养皿的皿盖。

④等待平板冷却凝固，大约需5〜

lOmin。然后，将平板倒过来放置，使培养

皿盖在下、皿底在上。

・倒平板操作的讨论

1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右

时，才能用来倒平板。你用什么办法来估

计培养基的温度？

提示：可以用手触摸盛有培养基的锥

形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫

手时，就可以进行倒平板了。

2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生

物污染培养基。

3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？

答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水

珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较

高，将平板倒置，既可以使培养基表面的

水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水

珠落入培养基，造成污染。

4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养

基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板

还能用来培养微生物吗？为什么？

答：空气中的微生物可能在皿盖与皿

底之间的培养基上滋生，因此最好不要用

这个平板培养微生物。

纯化大肠杆菌

(1)微生物接种的方法最常用的是平板划

线法和稀释涂布平板法。

(2)平板划线法是通过接种环在琼脂固体

培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌

种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次

划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖

而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌

落。

(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列

的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分

别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培

养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两

步。

(4)用平板划线法和稀释涂布平板法接种

的目的是：使聚集在一起的微生物分散成

单个细胞，从而能在培养基表面形成单个

的菌落，以便于纯化菌种。

(5)平板划线法操作步骤：

①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环

烧红。②在火焰旁冷却接种环，并打开棉

塞。

③将试管口通过火焰。④将已冷却的接种

环伸入菌液中蘸取一环菌液。

⑤将试管通过火焰，并塞上棉塞。⑥左手

将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的

接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行

线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。⑦

灼烧接种环，待其冷却后，从第一区

域划线的末端开始往第二区域内划线。重

复以上操作，在三、四、五区域内划线。

注意不要将最后一区的划线与第一区

相连。⑧将平板倒置放入培养箱中培养。

•平板划线操作的讨论

1.为什么在操作的第一步以及每次划

线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束

时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？

答：操作的第一步灼烧接种环是为了

避免接种环上可能存在的微生物污染培养

物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上

次划线结束后，接种环上残留的菌种，使

下一次划线时，接种环上的菌种直接来源

于上次划线的末端，从而通过划线次数的

增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减

少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种

环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避

免细菌污染环境和感染操作者。

2.在灼烧接种环之后，为什么要等其

冷却后再进行划线？

答：以免接种环温度太高，杀死菌

种。

3.在作第二次以及其后的划线操作

时，为什么总是从上一次划线的末端开始

划线？

答：划线后，线条末端细菌的数目比

线条起始处要少，每次从上一次划线的末

端开始，能使细菌的数目随着划线次数的

增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌

繁殖而来的菌落。

(6)涂布平板操作的步骤：

①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。②取

少量菌液，滴加到培养基表面。

③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引

燃，待酒精燃尽后，冷却8〜10s。

④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表

面。

涂布平板操作的讨论

涂布平板的所有操作都应在火焰附近

进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操

作要求，想一想，第2步应如何进行无菌

操作？

提示：应从操作的各个细节保证“无

菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合

适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管

要在酒精灯火焰周围；等等。

菌种的保存

(1)对于频繁使用的菌种，可以采用临时

保藏的方法。

①临时保藏方法

将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，

在合适的温度下培养。当菌落长成后，将

试管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3〜6

个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转

移到新鲜的培养基上。

②缺点：这种方法保存的时间不长，菌种

容易被污染或产生变异。

(2)对于需要长期保存的菌种，可以采用

甘油管藏的方法。

在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭

菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，

与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱

中保存。

疑难解答

(1)生物的营养

营养是指生物摄取、利用营养物质的过

程。营养物质是指维持机体生命活动，保

证发育、生殖所需的外源物质。

人及动物的营养物质：水、无机盐、糖

类、脂质、蛋白质、维生素六类。

植物的营养物质：矿质元素、水、二氧化

碳等三类。

微生物的营养物质：水、无机盐、碳源、

氮源及特殊营养物质五类。

(2)确定培养基制作是否合格的方法

将未接种的培养基在恒温箱中保温1〜2

天，无菌落生长，说明培养基的制备是成

功的，否则需要重新制备。

课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与

计数

尿素是一种重要的农业氮肥，尿素

并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中

的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物

利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，

是因为他们能合成腺酶

尿素最初是从人的尿液中发现的

筛选菌株

(1)实验室中微生物的筛选应用的原理

人为提供有利于目的菌株生长的条件(包

括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止

其他微生物生长。

(2)选择性培养基

在微生物学中，将允许特定种类的微生物

生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生

长的培养基，称作选择培养基。

(3)配制选择培养基的依据

根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入

某种物质以达到选择的目的。例如，培养

基中不加入有机物可以选择培养自养微生

物；培养基中不加入氮元素，可以选择培

养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可

选择培养金黄色葡萄球菌等。

统计菌落数目

(1)测定微生物数量的常用方法有稀释涂

布平板法和显微镜直接计数。

(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数

目的原理

当样品的稀释度足够高时，培养基表面生

长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一

个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能

推测出样品中大约含有多少活细菌。为了

保证结果准确，一般设置3~5个平板，选

择菌落数在30-300的平板进行计数，并

取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实

际数目低，因此，统计结果一般用菌落数

而不是活菌数来表示。

采用此方法的注意事项：1.一般选取菌落

数在30~300之间的平板进行计数2.为了防

止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加

入TTC3.本法仅限于形成菌落的微生物

设置对照

设置对照的主要目的是排除实验组中非测

试因素对实验结果的影响，提高实验结果

的可信度。对照实验是指除了被测试的条

件以外，其他条件都相同的实验，其作用

是比照试验组，排除任何其他可能原因的

干扰，证明确实是所测试的条件引起相应

的结果。

实验设计

实验设计包括实验方案，所需仪器、材

料、用具和药品，具体的实施步骤以及时

间安排等的综合考虑和安排。

(1)土壤取样：同其他生物环境相比，土

壤中的微生物，数量最大，种类最多。在

富含有机质的土壤表层，有更多的微生物

生长。从富含有机物、潮湿、pH-7的土壤

中取样。铲去表层土，在距地表约3-8cm

的土壤层取样。

(2)样品的稀释：样品的稀释程度将直接

影响平板上生长的菌落数目。在实际操作

中，通常选用一定稀释范围的样品液进行

培养，以保证获得菌落数在30~300之间、

适于计数的平板。

测定土壤中细菌的数量，一般选用IO,105

106

测定放线菌的数量，一般选用104105

测定真菌的数量，一般选用103104

(3)微生物的培养与观察

不同种类的微生物，往往需要不同的培养

温度和培养时间。细菌30—37℃1―2天

放线菌25—28℃5―7天霉菌25―28℃3~4

天

每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落

数目稳定时的记录作为结果，这样可以防

止因培养时间不足而导致一楼菌落的数

目。一般来说，在一定的培养条件下(相

同的培养基、唯独及培养时间)，同种微

生物表现出稳定的菌落特征。形状、大

小、隆起程度、颜色

疑难解答

(1)如何从平板上的菌落数推测出每克

样品中的菌落数？

统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好

能统计3个平板，计算出平板菌落数的平

均值

每克样品中的菌落数=(C/V)*M其中，C

代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落

数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积

(ml),M代表稀释倍数

课题三分解纤维素的微生物的分离

纤维素，一种由葡萄糖首尾相连而成的高

分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖

类物质。

纤维素与纤维素酶

(1)棉花是自然界中纤维素含量最高的天

然产物，木材、作物秸秆等也富含纤维

素。

(2)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它

至少包括三种组分，即3酶、Cx酶和葡萄

糖普酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二

糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的

生长提供营养。

纤维素分解菌的筛选

(1)筛选方法：刚果红染色法。能够通过

颜色反应直接对微生物进行筛选。

(2)刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原

理

刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这

样的多糖物质形成红色复合物，但并不和

水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反

应。当我们在含有纤维素的培养基中加入

刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素

形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分

解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形

成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中

心的透明圈。这样，我们就可以通过是否

产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

分离分解纤维素的微生物的实验流程

土壤取样T选择培养(此步是否需要，应

根据样品中目的菌株数量的多少来确定)

一梯度稀释一将样品涂布到鉴别纤维素分

解菌的培养基上一挑选产生透明圈的菌落

(1)土壤采集选择富含纤维素的环境。

(2)刚果红染色法分离纤维素分解菌的步

骤倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板

(3)刚果红染色法种类

一种是先培养微生物，再加入刚果红进行

颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚

果红。

课题延伸

对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选

后，只是分离纯化的第一步，为确定得到

的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤

维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液

体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定

方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维

素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

疑难解答

(1)为什么要在富含纤维素的环境中寻找

纤维素分解菌？

由于生物与环境的相互依存关系，在富含

纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相

对提高，因此从这种土样中获得目的微生

物的几率要高于普通环境。

(2)将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认

为滤纸应该埋进土壤多深？

将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对

聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生

存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm

左右腐殖土壤中。

(3)两种刚果红染色法的比较

方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，

加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；

其优点是这样显示出的颜色反应基本上是

纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操

作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由

于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类

物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出

现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微

生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基

中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素

酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺

点是：有些微生物具有降解色素的能力，

它们在长时间培养过程中会降解刚果红形

成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区

分。

(4)为什么选择培养能够“浓缩”所需的

微生物？

在选择培养的条件下，可以使那些能够适

应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，

而那些不适应这种营养条件的微生物的繁

殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作

用。

专题三植物的组织培养技术

课题一菊花的组织培养

植物组织培养的基本过程

细胞分化：在生物个体发育过程中，细胞

在形态、结构和生理功能上出现稳定性差

异的过程。

离体的植物组织或细胞，在培养了一段时

间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组

织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，

是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁

细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生

愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分

化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤

组织继续进行培养，又可以重新分化成根

或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分

化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育

成完整的植物体。

植物细胞工程

具有某种生物全套遗传信息的任何一个活

细胞，都具有发育成完整个体的能力,即

每个生物细胞都具有全能性。但在生物体

的生长发育过程中并不表现出来，这是因

为在特定的时间和空间条件下,通过基因

的选择性表达,构成不同组织和器官。

植物组织培养技术的应用有：实现优良品

种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工

种子；培育作物新品种以及细胞产物的工

厂化生产等。

•细胞分化是一种持久性的变化，它有什

么生理意义？

使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专

门化，有利于提高各种生理功能的效率。

比较根尖分生组织和愈伤组织的异同

组织类型细胞来源细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向

根尖分化成多种

受精卵正方形无液泡紧密

分生组织细胞组织

愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化疏松再分化成新个体

相同点都通过有丝分裂进行细胞增殖

影响植物组织培养的条件

材料：不同的植物组织，培养的难易程度

差别很大。植物材料的选择直接关系到试

验的成败。植物的种类、材料的年龄和保

存时间的长短等都会影响实验结果。菊花

组织培养一般选择未开花植物的茎上部新

萌生的侧枝作材料。一般来说，容易进行

无性繁殖的植物容易进行组织培养。选取

生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态

好，容易诱导脱分化和再分化。

营养：离体的植物组织和细胞，对营养、

环境等条件的要求相对特殊，需要配制适

宜的培养基。常用的培养基是MS培养基，

其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、

Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、

I、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维

生素、蔗糖等。

激素：植物激素中生长素和细胞分裂素是

启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性

激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂

素的作用呈现加强趋势。在培养基中需要

添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其

浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都

影响结果。

使用顺实验结生长素/细胞

序果分裂素比值与结

先生长果

有利于

素，促根分

分裂但比值

后细胞化，

不分化高时

分裂素抑芽形成

先细胞促芽分

比值

分裂细胞既化，

低时

素，分裂也环抑根形成

后生长分化境比值促进愈伤

素条适中组织生长

同时使分化频件

用率提高：PH、温度、光等环境

条件。

不同的植物对各种条件的要求往往不同。

进行菊花的组织培养，一般将pH控制在

5.8左右，温度控制在18—22℃,并且每日

用日光灯照射12h.

4、操作流程

配制MS固体培养基：配制各种母液：将各

种成分按配方比例配制成的浓缩液（培养

基母液）。

・使用时根据母液的浓缩倍数，计算用

量，并加蒸储水稀释。

,配制培养基：应加入的物质有琼脂、蔗

糖、大量元素、微量元素、有机物和植物

激素的母液，并用蒸储水定容到1000毫

升。

,在菊花组织培养中，可以不添加植物激

素

原因是菊花茎段组织培养比较容易。•灭

菌：采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。

•MS培养基中各种营养物质的作用是什

么？与肉汤培养基相比，MS培养基有哪些

特点？

大量元素和微量元素提供植物细胞所必需

的无机盐；蔗糖提供碳源，维持细胞渗透

压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满

足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定

影响后所产生的特殊营养需求。

微生物培养基以有机营养为主，MS培养基

则需提供大量无机营养。

外植体的消毒外植体：用于离体培养的植

物器官或组织片段。选取菊花茎段时，要

取生长旺盛的嫩枝。菊花茎段用流水冲洗

后可加少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷

洗后在流水下冲洗20min左右。用无菌吸

水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分

数为70%的酒精中摇动2~3次，持续

6一7s,立即将外植体取出，在无菌水中清

洗。取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表

面水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶

液中2min。取出后，在无菌水中至少清

洗3次，漂洗消毒液。

注意：对外植体进行表面消毒时，就要考

虑药剂的消毒效果，又要考虑植物的耐受

能力。

接种：接种过程中插入外植体时形态学上

端朝上，每个锥形瓶接种7〜8个外植体。

外植体接种与细菌接种相似，操作步骤相

同，而且都要求无菌操作。

培养：应该放在无菌箱中进行，并定期进

行消毒，保持适宜的温度(18-22℃)和光

照(12h)

移栽：栽前应先打开培养瓶的封口膜，让

其在培养间生长几日，然后用流水清洗根

部培养基。然后将幼苗移植到消过毒的蛭

石或珍珠岩等环境中生活一段时间，进行

壮苗。最后进行露天栽培。

栽培

外植体在培养过程中可能会被污染，原因

有外植体消毒不彻底；培养基灭菌不彻

底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差

等。

专题二月季的花药培养

被子植物的花粉发育被子植物的雄蕊通常

包含花丝、花药两部分。花药为囊状结

构，内部含有许多花粉。花粉是由花粉母

细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉

是单倍体的生殖细胞。被子植物花粉的发

育要经历小抱子四分体时期、单核期和双

核期等阶段。在小抱子四分体时期，4个单

倍体细胞连在一起，进入单核期时，四分

体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个

具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含浓

厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居

中期）。随着细胞不断长大，细胞核由中

央移向细胞一侧（单核靠边期），并分裂

成1个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，

进而形成两个细胞，一个是生殖细胞，一

个是营养细胞。生殖细胞将在分裂一次，

形成两个精子。

注意：①成熟的花粉粒有两类，一类是二

核花粉粒，其花粉粒中只含花粉管细胞核

和生殖细胞核，二核花粉粒的精子是在花

粉管中形成的；另一类是三核花粉粒，花

粉在成熟前，生殖细胞就进行一次有丝分

裂，形成两个精子，此花粉粒中含有两个

精子核和一个花粉管核（营养核）②花粉

发育过程中的四分体和动物细胞减数分裂

的四分体不同。花粉发育过程中的四分体

是花粉母细胞经减数分裂形成的4个连在

一起的单倍体细胞；而动物细胞减数分裂

过程中的四分体是联会配对后的一对同源

染色体，由于含有四条染色单体而称为四

分体。③同一生殖细胞形成的两个精子，

其基因组成完全相同。

产生花粉植株的两种途径通过花药培养产

生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种

途径，一种是花粉通过胚状体阶段发育为

植物，另一种是花粉在诱导培养基上先形

成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。这

两种途径之间并没有绝对的界限，主要取

决于培养基中激素的种类及其浓度配比。

注意：①无论哪种产生方式，都要先诱导

生芽，再诱导生根②胚状体：植物体细胞

组织培养过程中，诱导产生的形态与受精

卵发育成的胚非常类似的结构，其发育也

与受精卵发育成的胚类似，有胚芽、胚

根、胚轴等完整结构，就像一粒种子，又

称为细胞胚。

影响花药培养的因素诱导花粉能否成功及

诱导成功率的高低，受多种因素影响，其

中材料的选择与培养基的组成是主要的影

响因素

•亲本的生理状况：花粉早期是的花药比

后期的更容易产生花粉植株，选择月季的

初花期。

・合适的花粉发育时期：一般来说，在单

核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时

期，花药培养成功率最高

,花蕾：选择完全未开放的花蕾

•亲本植株的生长条件、材料的低温预处

理以及接种密度等对诱导成功率都有一定

影响

•材料的选取：选择花药时，一般要通过

镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发

育期。确定花粉发育时期的最常用的方法

是醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细

胞核不易着色，需采用焙花青-辂矶法，这

种方法能嚼花粉细胞核染成蓝黑色

,材料的消毒

,接种和培养：灭菌后的花蕾，要在无菌

条件下除去萼片和花瓣，并立即嚼花药接

种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不

损伤花药（否则接种后容易从受伤部位长

生愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，

因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或

胚状体的形成，通常每瓶接种花药7~10

个，培养温度控制在25℃左右,不需要光照.

幼小植株形成后才需要光照.一般经过20〜

30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组

织或形成胚状体。将愈伤组织及时转移到

分化培养基上，以便进一步分化出再生植

株。如果花药开裂释放出胚状体，则一个

花药内就会产生大量幼小植株，必须在花

药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植

到新的培养基上，否则这些植株将很难分

开。还需要对培养出来的植株做进一步的

鉴定和筛选。

植物组织培养技术与花药培养技术的相同

之处是：培养基配制方法、无菌技术及接

种操作等基本相同。两者的不同之处在

于：花药培养的选材非常重要，需事先摸

索时期适宜的花蕾；花药裂开后释放出的

愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；

花药培养对培养基配方的要求更为严格。

这些都使花药培养的难度大为增加。

专题五DNA和蛋白质技术

课题一DNA的粗提取与鉴定

•提取DNA的溶解性原理包括哪些方面？

DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不

同；DNA不溶于酒精。

•DNA在不同浓度NaCl溶液中溶

解度有何特点？要使DNA溶解，

0.14

•NaCl浓度(mol/L)

C

需要使用什么浓度？要使DNA析出，又需

要使用什么浓度？

在0.14mol/L时溶解度最小；较高浓度

可使DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出。

•在溶解细胞中的DNA时，人们通常选用

2moi/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法

是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馅

水，以稀释NaCl溶液。酒精是一种常用有

机溶剂，但DNA却不能溶于酒精（特别是

95%冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于

酒精。

从理论上分析，预冷的乙醇溶液具有以下

优点。一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA

降解；二是降低分子运动，易于形成沉淀

析出；三是低温有利于增加DNA分子柔韧

性，减少断裂。

・采用DNA不溶于酒精的原理，可以达到

什么目的？

将DNA和蛋白质进一步分离。

•提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和

洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应

选用怎样的酶和怎样的温度值？

蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只

水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度

值为60〜80℃,因为该温度值蛋白质变性

沉淀，而DNA不会变性。

补充：DNA的变性是指DNA分子在高温

下解螺旋，其温度在80℃以上，如在PCR

技术中DNA变性温度在95℃O

・洗涤剂在提取DNA中有何作用？

洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从而瓦解

细胞膜。

•当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需

要使用什么指示剂进行鉴定？

在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝

色。

原理总结：通过利用不同浓度NaCl溶

液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提

纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质

分离开来，达到提纯的目的；最后利用二

苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNAO

实验材料的选取

不同生物的组织中DNA含量不同。在选

取材料时，应本着DNA含量高、材料易

得、便于提取的原则。

本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原

因。一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰

富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀

破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需

要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁

琐，历时较长。

鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易

被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了

减少DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和

试管盛放鸡血细胞液。

破碎细胞，获取含DNA的滤液

•若选用鸡血和洋葱作实验材料，则怎样

获取含DNA的滤液？

在鸡血细胞液中加入一定量蒸储水并用

玻棒搅拌，过滤后收集滤液；切碎洋葱，

加入一定量洗涤剂和食盐，搅拌研磨，过

滤后收集滤液。

•为什么加入蒸馅水能使鸡血细胞破裂？

答：蒸馅水对于鸡血细胞来说是一种低渗

液体，水分可以大量进入血细胞内，使血

细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加

速了鸡血细胞的破裂（细胞膜和核膜的破

裂），从而释放出DNA。

•在以上实验中，加入蒸储水、洗涤剂和

食盐的作用分别是什么？过滤时应当选用

（滤纸、尼龙布）。血细胞在蒸馅水中大

量吸水而张裂；洗涤剂瓦解细胞膜；食盐

溶解DNA物质；选用尼龙布进行过滤。

•在处理植物组织时需要进行研磨，其目

的是什么？研磨不充分产生什么结果？

破碎细胞壁，使核物质容易溶解在NaCl溶

液中；研磨不充分会使DNA的提取量减

少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀

物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。

。具体做法。10mL鸡血+20mL蒸储水

一同方向搅拌13层尼龙布过滤一滤液

去除滤液中的杂质

为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂

质？

用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在

高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA

析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。

因此，通过反复溶解与析出DNA,就能够除

去与DNA溶解度不同的多种杂质。

最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等

杂质，需要进一步提纯DNA。

方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl

溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白

酶分解蛋白质，不分解DNA;方案三的原理

是蛋白质和DNA的变性温度不同。

方案二与方案三的原理有什么不同？

答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，

从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三

利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不

同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。

析出与鉴定

,在滤液中仍然含有一些杂质，怎样除去

这些杂质呢？得到的DNA呈何颜色？

滤液与等体积的冷却酒精混

合均匀，静置2~3分钟，析出

的白色丝状物就是DNA。DNA呈

白色。

•怎样鉴定析出的白色丝状物就是DNA

呢？

具体做法。试管2支，编号甲乙T各加

等量5mLNaCl溶液一甲中放入少量白色丝

状物，使之溶解-各加4mL二苯胺，混合

均匀1沸水浴5min—观察颜色变化

实验操作

制备鸡血细胞液.......加柠檬酸钠，

静置或离心

破碎细胞，释放DNA…加蒸馅水，同

一方向快速通方向搅拌

I一过滤，除去细胞壁、细胞膜等。

溶解核内DNA..............加入NaCl至

2mol/L,同一方向缓慢搅拌

DNA析出...........加蒸馅水至

0.14mol/L,过滤,在溶解到2moi/L溶液

中

I-除去细胞质中的大部分物质。

DNA初步纯化.......与等体积95%

冷却酒精混合，析出白色丝状物

1一除去核蛋白、RNA、多糖等。

DNA鉴定...........二苯胺，沸水

浴，呈现蓝色

注意事项：在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝

固；鸡血静置或离心以提高细胞悬液浓

度；使用塑料烧杯；使用尼龙布过滤；玻

棒沿同一方向搅拌；玻棒搅拌要缓慢（细

胞破裂快速搅拌）；玻棒不要碰到烧杯

壁；二苯胺试剂要现用现配等。

专题六植物有效成分的提取

课题一植物芳香油的提取

天然香料的来源：植物、动物

不同植物的根、茎、叶、花、果实、种子

都可以提取芳香油。

芳香油的提取方法：蒸馅、压榨、萃取

等。

芳香油的性质：挥发性强，成分复杂，以

茶类化合物及其衍生物为主。

水蒸气蒸馅法：

原理：水蒸汽可将挥发性较强的芳香油携

带出来形成油水混合物，冷却后水油分

层。

方法：水中蒸储：原料放在沸水中加热蒸

储。

水上蒸锯：原料隔放在沸水上加热蒸

馆。

水汽蒸馅：利用外来高温水蒸气加热

蒸馅。

不足：有些原料不适宜于水中蒸馅，

如柑橘、柠檬等易焦糊，有效成分容易水

解。通常用压榨法（通过机械压缩力将液

相物从液固两相混合物中分离出来的一种

简单操作）

萃取法：

原理：芳香油易溶于有机溶剂，溶剂挥

发后得到芳香油。如石油醵、酒精、乙醵

等。

方法：原料浸泡在溶剂中一得到浸泡液

一有机溶剂挥发一芳香油。

不足：有机溶剂中的杂质影响芳香油的

品质

蒸馅装置包括：铁架台两个、酒精灯、石

棉网、蒸馅

瓶、橡胶塞、

蒸馅头、温度

计、直型冷凝

管、接液管、水蒸气蒸墉装置

锥形瓶，以及连接进水口和出水口的橡皮

管。所有仪器必须事先干燥，保证无水。

整套蒸储装置可分为左、中、右三部分，

其中左边的部分通过加热进行蒸馅，中部

将蒸锚物冷凝，右边的部分用来接收。安

装仪器一般都按照自下而上、从左到右的

顺序。拆卸仪器的顺序与安装时相反。具

体安装顺序和方法如下。(1)固定热源一

一酒精灯。

(2)固定蒸馅瓶，使其离热源的距离如教

科书中图6-2所示，并且保持蒸储瓶轴心

与铁架台的水平面垂直。

(3)安装蒸馅头，使蒸馅头的横截面与铁

架台平行。

(4)连接冷凝管。保证上端出水口向上，

通过橡皮管与水池相连；下端进水口向

下，通过橡皮管与水龙头相连。

(5)连接接液管(或称尾接管)。

(6)将接收瓶瓶口对准

尾接管的出口。常压蒸

馆一般用锥形瓶而不用

烧杯作接受器，接收瓶

应在实验前称重，并做好记录。

(7)将温度计固定在蒸僭头上，使温度计

水银球的上限与蒸储头侧管的下限处在同

一水平线上。

蒸馅装置安装完毕后，可以在蒸馅瓶中加

几粒沸石，防止液体过度沸腾。打开水龙

头，缓缓通入冷水，然后开始加热。加热

时可以观察到，蒸馅瓶中的液体逐渐沸

腾，蒸气逐渐上升，温度计读数也略有上

升。当蒸气的顶端达到温度计水银球部位

时，温度计读数急剧上升。在整个蒸储过

程中，应保证温度计的水银球上常有因冷

凝作用而形成的液滴。控制蒸储的时间和

速度，通常以每秒1〜2滴为宜。

分液漏斗的使用方法如下。

(1)首先把活塞擦干，为活塞均匀涂上一

层润滑脂，注意切勿将润滑脂涂得太厚或

使润滑脂进入活塞孔中，以免污染萃取

液。

(2)塞好活塞后，把活塞旋转几圈，使润

滑脂分布均匀。并用水检查分液漏斗的顶

塞与活塞处是否渗漏，确认不漏水后再使

用。

(3)将分液漏斗放置在大小合适的、并已

固定在铁架台上的铁圈中，关好活塞。将

待分离的液体从上部开口处倒入漏斗中，

塞紧顶塞，注意顶塞不能涂润滑脂。

(4)取下分液漏斗，用右手手掌顶住漏斗

顶塞并握住漏斗颈，左手握住漏斗活塞

处，大拇指压紧活塞，将分液漏斗略倾

斜，前后振荡(开始振荡时要慢)。

(5)振荡后，使漏斗口仍保持原倾斜状

态，左手仍握在漏斗活塞处，下部管口指

向无人处，用拇指和食指旋开活塞，使其

释放出漏斗内的蒸气或产生的气体，以使

内外压力平衡，这一步操作也称做“放

气”。

(6)重复上述操作，直至分液漏斗中只放

出很少的气体时为止。再将分液漏斗剧烈

振荡2〜3min,然后将漏斗放回铁圈中，

待液体静置分层。

蒸馅完毕，应先撤出热源，然后停止通

水，最后拆卸蒸储装置，拆卸的顺序与安

装时相反。

玫瑰精油的提取

•0.Ig/mL氯化钠溶液：促使油水混合物

（乳浊液）中油和水的分离。无水硫酸

钠：吸收油层中的水分。

实验步骤：①采集玫瑰花：采集盛花期（5

月中上旬）的玫瑰花，清水清洗沥干。

②装入蒸馅原料：称取50g玫

瑰花放入蒸储瓶，添加200mL蒸储水。

③安装蒸馅装置：按照从左向

右、自下到上次序安装水蒸气蒸馅装置。

④加热蒸僭：控制蒸储时间和

速度（1〜2滴/秒），获得乳白色乳浊液；

拆卸装置。

⑤分离油层：向乳浊液加入

NaCl溶液后，利用分液漏斗分离出上面的

油层。

⑥除去水分：向油层中加入无

水硫酸钠，24h后过滤，得到玫瑰油。

*注意事项：蒸储时间不能过短，温度不

能过