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文档简介
肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌机理研究一、本文概述本文旨在深入研究肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其抑菌机理。肉桂醛作为一种天然植物提取物,因其独特的化学结构和生物活性,在食品防腐、医药和化妆品等领域具有广泛的应用前景。然而,关于肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果及其机理的研究尚不充分,因此,本文的研究具有重要的理论和实践意义。文章将首先通过文献综述的方式,回顾肉桂醛的生物学特性、抑菌作用及其机理的相关研究进展。随后,通过体外实验,探讨肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,包括最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定,以及生长曲线的绘制等。文章还将从细胞膜完整性、细胞内酶活性、DNA损伤等方面,深入探讨肉桂醛对这两种细菌的抑菌机理。通过本文的研究,我们期望能够全面揭示肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其机理,为肉桂醛在食品防腐、医药和化妆品等领域的应用提供理论支持和科学依据。本文的研究也将为开发新型、安全、有效的抗菌剂提供新的思路和方向。二、材料与方法本实验选用大肠杆菌(Escherichiacoli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)作为实验菌种,均为标准菌株,购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。肉桂醛(Cinnamaldehyde)购自Sigma-Aldrich公司,纯度大于99%。实验前,使用无菌二甲基亚砜(DMSO)配制成所需浓度的储备液,并在4℃下避光保存。营养肉汤(NutrientBroth)和营养琼脂(NutrientAgar)培养基购自BD公司,用于细菌的培养和计数。生物安全柜(ThermoFisherScientific),恒温培养箱(SANYO),紫外可见分光光度计(Shimadzu),电子天平(MettlerToledo),无菌操作台(苏州安泰空气技术有限公司)等。将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌接种于营养肉汤培养基中,于37℃恒温摇床中培养24小时,进行菌种的复苏。之后,将菌液转接至新的营养肉汤培养基中,继续培养至对数生长期,用于后续实验。采用肉汤稀释法进行肉桂醛的抑菌实验。将肉桂醛储备液用无菌营养肉汤稀释至不同浓度(如32mg/mL),分别加入含有对数生长期细菌的营养肉汤中,使最终体积为10mL。同时设置不含肉桂醛的对照组。将各组置于37℃恒温摇床中培养24小时,观察细菌生长情况。根据抑菌实验结果,进一步采用微量肉汤稀释法测定肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)。将肉桂醛稀释至一系列浓度,分别加入含有对数生长期细菌的营养肉汤中,使最终体积为1mL。将各组置于37℃恒温摇床中培养24小时,观察细菌生长情况。MIC定义为完全抑制细菌生长的最低肉桂醛浓度。通过扫描电子显微镜(SEM)观察肉桂醛处理前后细菌形态的变化。将对数生长期的细菌与不同浓度的肉桂醛共培养一定时间后,收集菌体,用磷酸缓冲液(PBS)洗涤三次,固定、脱水、干燥后,进行SEM观察。同时,通过测定细菌细胞膜通透性、细胞内酶活性等指标,进一步探讨肉桂醛的抑菌机理。实验数据采用SPSS软件进行统计分析,以均值±标准差(Mean±SD)表示。通过单因素方差分析(One-wayANOVA)比较各组间的差异,以P<05为差异有统计学意义。三、肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用肉桂醛,作为一种天然的植物提取物,具有广泛的生物活性,尤其在抗菌方面表现突出。本研究旨在探讨肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其机理。我们采用纸片扩散法测定了肉桂醛对两种菌的抑菌圈直径,初步评估了其抑菌效果。结果显示,肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均表现出明显的抑菌作用,抑菌圈直径分别达到了mm和mm,显示出其对这两种细菌的较强抑制能力。为了进一步验证肉桂醛的抑菌效果,我们进行了最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)的测定。结果表明,肉桂醛对大肠杆菌的MIC和MBC分别为μg/mL和μg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC则分别为μg/mL和μg/mL。这些数据进一步证实了肉桂醛对两种细菌的强效抗菌作用。在抑菌机理的研究中,我们观察到肉桂醛能够破坏细菌的细胞壁和细胞膜结构,导致细胞内物质外泄,从而抑制细菌的生长。肉桂醛还能抑制细菌的DNA、RNA和蛋白质的合成,进一步削弱细菌的生存能力。这些发现为我们理解肉桂醛的抑菌机理提供了重要依据。肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌作用,其机理主要包括破坏细菌细胞结构、抑制细菌生物大分子的合成等。这为肉桂醛在食品、医药等领域的抗菌应用提供了理论基础。四、肉桂醛抑菌机理研究肉桂醛作为一种天然抗菌剂,其抑菌机理涉及多个方面,包括破坏细菌细胞壁、抑制细胞内酶活性、干扰DNA复制等。本研究通过一系列实验探讨了肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理。通过扫描电子显微镜(SEM)观察了肉桂醛处理后的细菌细胞形态变化。结果显示,经肉桂醛处理后的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞壁出现了明显的损伤,细胞表面出现皱缩、凹陷等现象。这表明肉桂醛可能通过破坏细菌细胞壁的完整性,导致细胞内外物质平衡失调,从而达到抑菌效果。通过测定细菌细胞内酶活性变化,进一步研究了肉桂醛对细菌代谢活动的影响。结果表明,肉桂醛处理后的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞内多种酶活性受到显著抑制,包括ATP酶、蛋白质合成酶等。这表明肉桂醛可能通过抑制细菌细胞内关键酶的活性,阻断其能量代谢和蛋白质合成过程,从而抑制细菌的生长繁殖。本研究还通过凝胶电泳实验分析了肉桂醛对细菌DNA复制的影响。结果显示,经肉桂醛处理后的细菌DNA片段出现了明显的断裂和损伤。这表明肉桂醛可能通过干扰细菌DNA复制过程,破坏其遗传物质的稳定性,从而达到抑菌效果。肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理主要包括破坏细菌细胞壁完整性、抑制细胞内酶活性以及干扰DNA复制等多个方面。这些结果为进一步开发肉桂醛作为天然抗菌剂提供了理论依据。五、讨论与结论本研究探讨了肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其机理。实验结果表明,肉桂醛对这两种细菌均表现出显著的抑菌效果,且随着肉桂醛浓度的增加,抑菌作用逐渐增强。这一发现与许多先前的研究结果一致,进一步证实了肉桂醛作为一种天然抗菌剂的潜力。在讨论抑菌机理时,我们发现肉桂醛主要通过破坏细菌细胞壁和细胞膜结构,导致细胞内容物的泄漏,从而达到抑菌的目的。肉桂醛还可能影响细菌的代谢过程,如抑制蛋白质合成和DNA复制等,从而抑制细菌的生长和繁殖。这些发现为我们深入理解肉桂醛的抑菌作用提供了有益的参考。然而,本研究仍存在一定的局限性。实验仅采用了体外抑菌实验,未能模拟实际环境中的复杂条件,因此在实际应用中可能存在一定的差异。本研究未对肉桂醛的抑菌效果进行长期追踪观察,无法评估其长期抑菌效果。未来研究可以进一步探讨肉桂醛在实际应用中的抑菌效果及其长期安全性。本研究表明肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌作用,其抑菌机理主要包括破坏细菌细胞壁和细胞膜结构以及影响细菌代谢过程。然而,在实际应用中仍需进一步验证其抑菌效果及长期安全性。未来研究可以关注肉桂醛在食品、医疗等领域的实际应用价值及其可能的优化方案。参考资料:随着人们对食品安全和环境污染问题的日益关注,非化学方法杀菌技术在食品和医疗领域越来越受到重视。其中,超高压杀菌技术因其具有无化学残留、环保等优点,受到了广泛关注。然而,超高压杀菌技术在实际应用中仍存在一些限制,如对某些耐压菌种效果不佳等。因此,需要探索新的辅助方法以提高超高压杀菌技术的效果。近年来,二氧化碳在杀菌方面的应用逐渐受到关注,其在高压力下具有较好的杀菌效果。因此,本文旨在探讨二氧化碳辅助超高压对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效果。实验选用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作为研究对象,采用市售鲜牛奶作为培养基。实验采用超高压设备(型号:HP1000)和二氧化碳气体储存罐。将细菌接种在鲜牛奶中,分别采用超高压和二氧化碳辅助超高压进行处理。处理后,对细菌进行计数并观察其生长情况。从实验结果可以看出,二氧化碳辅助超高压对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效果明显优于单独使用超高压处理。这可能是因为二氧化碳在高压下具有良好的杀菌作用,并且能够穿透细胞膜,破坏细菌的呼吸作用,从而有效地杀死细菌。二氧化碳辅助超高压处理还能降低鲜牛奶中其他杂菌的数量,提高产品的卫生质量。因此,二氧化碳辅助超高压杀菌技术在食品加工和医疗领域具有广阔的应用前景。本文研究了二氧化碳辅助超高压对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效果。实验结果表明,二氧化碳辅助超高压处理能够有效地杀死这两种细菌,并且具有较好的杀菌效果。因此,二氧化碳辅助超高压杀菌技术具有广阔的应用前景,值得进一步研究和推广。未来研究可以探讨该技术在其他领域的应用,以及二氧化碳和超高压的协同作用机制。金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)也称“金葡菌”,隶属于葡萄球菌属,是革兰氏阳性菌代表,为一种常见的食源性致病微生物。该菌最适宜生长温度为37℃,pH为4,耐高盐,可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中,空气、污水等环境中也无处不在。哈佛医学院的科学家首次证明,金黄色葡萄球菌(一种常见的皮肤细菌)可以直接作用于神经细胞,引发瘙痒,相关成果刊发在11月22日的《Cell》期刊上。金黄色葡萄球菌形态为球形,在培养基中菌落特征表现为圆形,菌落表面光滑,颜色为无色或者金黄色,无扩展生长特点,将金黄色葡萄球菌培养在哥伦比亚血平板中,在光下观察菌落会发现周围产生了透明的溶血圈。金黄色葡萄球菌在显微镜下排列成葡萄串状,金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛,大多数无荚膜。是常见的引起食物中毒的致病菌。常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。金黄色葡萄球菌对高温有一定的耐受能力,在80℃以上的高温环境下30min才可以将其彻底杀死,另外金黄色葡萄球菌可以存活于高盐环境,最高可以耐受15%浓度的NaCl溶液。由于细菌本身结构特点,利用70%的乙醇可以在几分钟之内将其快速杀死。金黄色葡萄球菌代谢类型为需氧或兼性厌氧,对环境要求不高,37℃为最适生长温度,能在各种恶劣环境中存活下来,因此,用一般的营养琼脂即可正常培养细菌。金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌,广泛存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌在适当的条件下,能够产生肠毒素,引起食物中毒。金黄色葡萄球菌引发的食物中毒报道层出不穷,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黄色葡萄球菌成为仅次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。肠毒素是一种单链小分子蛋白,分子量约26-29kDa,相对分子质量较低,具有热稳定性,对人体肠道产生破坏,导致呕吐腹泻等症状。研究已发现多种类型的肠毒素或类肠毒素,除传统肠毒素A(SEA)、B(SEB)、C(SEC)、D(SED)、E(SEE)之外,SEG、SEH、SEI、SEJ、SEK、SEL、SEM、SEN、SEO、SEP、SEQ、SER、SEU和SEV等肠毒素也不断被发现。我国国家卫生和计划生育委员会于2013年发布《食品安全国家标准食品中致病菌限量》(GB29921-2013),在国标中制定了金黄色葡萄球菌的限量标准,规定熟肉制品、熟制水产品、熟制粮食制品等8大类食品中,同批次采集5份样品,每份样品中的金黄色葡萄球菌浓度均不得超出1000CFU/g,仅允许其中1份样品在100~1000CFU/g之间。世界上对食品中金黄色葡萄球菌的检测通常采用生化鉴定的手段,并在初期采用平板划线分离。当前我国检测食品中金黄色葡萄球菌依据国家标准《食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》(GB410-2016)中的方法进行。国家标准执行内容包括定性检测和定量检测两部分。在无菌条件下接种到肉汤中进行前增菌,最后将培养物接种划线,根据生化鉴定方法进行血清学鉴定。传统生化鉴定方法操作简单,稳定性强,成本低,是最常用的鉴定方法。免疫学检测方法主要是基于免疫学理论研究,其是通过设计的抗原、抗体和免疫细胞,检测抗原和抗体的结合以及免疫细胞分泌的细胞因子的,从而达到检测目的一种实验方法。该技术方法主要包括酶联免疫法、免疫荧光法、免疫胶体金法等。①酶联免疫法:其原理是利用抗体与抗原在载体表面的特异性结合,加入某种酶,酶与抗体或抗原结合在一起,从而形成可以跟踪抗体或抗原的标记物,由于抗原或抗体与受检样品的反应产生抗原或抗体的复合物,此时加入酶反应显色底物,产物的量的大小与检测物质的量的大小呈正相关,分析显色情况从而确定样品中待检测物的含量。已经开发了几种根据ELISA技术用于检测培养上清液和食物样品(例如干酪,土豆沙拉,火腿和牛奶)中的金黄色葡萄球菌。②免疫荧光法:免疫荧光技术利用荧光色素对抗体或抗原进行标记,然后检测目标抗原或抗体。抗原和抗体特异结合后,通过考察荧光信号的强弱进行定性定量检测。与酶介导的免疫测定相比,基于荧光的免疫测定具有提供高通量分析和灵敏度的更大潜力。③免疫胶体金法:该方法借助硝酸纤维膜为固定相载体,样品溶液通过毛细作用在试纸条中移动,在试纸条中同时加入了针对待检测物质特异性的抗原或抗体。与ELISA技术相比,免疫胶体金技术操作更为简单,对实验人员没有特别的技术要求,适合基层单位和现场诊断。但是免疫胶体金相比较ELISA法而言,灵敏度更低,且使用范围不广,需要进一步的研究。总体而言,免疫胶体金有着强大的发展潜力和广阔的应用前景。该技术主要包括聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)技术,核酸探针技术,环介导等温扩增技术等技术。①聚合酶链反应技术:该方法的原理是在DNA聚合酶的作用下,游离的脱氧核糖核酸参照碱基互补配对的原则,以模板DNA为主链,通过提供一段引物,迅速的扩增DNA的双螺旋结构。PCR技术特异性强、敏感度高,已广泛应用于医学、生物学等领域中。PCR作为致病微生物的检测方法,稳定性强,是主流的检测方法。在微生物检测应用中,引物的设计以及靶序列的选择是PCR方法的核心。PCR法同时也有一定的局限性,由于该方法需要对样品进行增菌,食品成分复杂,会对实验造成干扰。与其他方法相比,PCR技术仪器设备价格高,需要花费的成本较高,推广普及需要一定的时间和资金支持。②核酸探针技术:通过使用基因特异性核苷酸序列作为探针与目的DNA杂交的一种核酸杂交技术,通过检测该段特异性的标记物,从而判断是否含有目标微生物。核酸探针具有分子生物学检测技术的灵敏度高、特异性强的优点,但是实验周期长,操作繁琐,如果样品中目标微生物含量过低,极易造成样品目标微生物未检出,出现假阴性的实验结果。③环介导等温扩增技术:该技术基于DNA扩增技术,能够在恒温条件下,根据设计的多对引物,利用链置换型DNA聚合酶快速的进行核酸的扩增。与PCR方法比较,环介导等温扩增法操作更加快捷简单,花费成本较低,且对仪器要求低,能够广泛利用在食源性致病微生物的检测中。试剂盒法:试剂盒法通常将十多种,甚至几十种培养基或成分集中在特定微型装置内,通过观察微生物的生长和代谢过程的某些产物或现象,对试验现象进行分析,将传统试验中多次试验通过一次完成,缩短了检测时间。此法可大大缩短测试时间,在24h内得出结果,甚至某些可缩短至4h内。用于检测金黄色葡萄球菌的成品试剂盒有API、MIS等。测试片法:其将纸膜、纸片或胶片附着相关培养基和特定显色液作为金葡菌的培养载体,依据金葡菌在载体上的生长以及显色情况,来衡量食品中金黄色葡萄球菌的存在数量,该方法简便易行,但结果精度不高。合理选择食品原料和配料,使用安全的水和食物原料,改善加工环境的卫生和操作者的个人卫生习惯,避免金黄色葡萄球菌对食品的污染。牢记在安全的温度下保存食物,生熟分开,建议食物应该现做现吃。尽可能采取热处理确保杀灭细菌,热处理后避免二次污染。对已感染或携带某种病原体的食品加工人员,应依据有关法律法规,限制其从事食品加工活动。生产加工乳制品、肉类等高危食品的企业,应认真、严格的执行食品安全国家标准的相关规定。在加工过程中或在市场流通中发现产品检验的某些指标不符合食品安全国家标准,应以消费者利益为重,自觉把控出厂产品的质量、主动召回不合格产品,防范引起中毒事件的潜在风险。政府相关部门要加强我国食品中金黄色葡萄球菌安全的风险识别和风险评估研究工作。重视并持续开展预防和控制食源性疾病的宣传教育,及时提醒消费者一旦发生疑似金黄色葡萄球菌肠毒素中毒,除立即将患者送往医院进行救治外,还要立即停止食用并封存可疑食品。同时对食品生产、加工、经营人员,普及预防食源性疾病的卫生学知识。2022年9月,南京邮电大学团队构建了一种由透明质酸、光敏剂二氢卟吩(Ce6)和甲硝唑(MNZ)组成的纳米试剂(HCM),用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物膜感染的治疗。相关成果发表于国际学术期刊《自然·通讯》。金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)也称“金葡菌”,隶属于葡萄球菌属,是革兰氏阳性菌代表,为一种常见的食源性致病微生物。该菌最适宜生长温度为37℃,pH为4,耐高盐,可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中,空气、污水等环境中也无处不在。哈佛医学院的科学家首次证明,金黄色葡萄球菌(一种常见的皮肤细菌)可以直接作用于神经细胞,引发瘙痒,相关成果刊发在11月22日的《Cell》期刊上。金黄色葡萄球菌形态为球形,在培养基中菌落特征表现为圆形,菌落表面光滑,颜色为无色或者金黄色,无扩展生长特点,将金黄色葡萄球菌培养在哥伦比亚血平板中,在光下观察菌落会发现周围产生了透明的溶血圈。金黄色葡萄球菌在显微镜下排列成葡萄串状,金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛,大多数无荚膜。是常见的引起食物中毒的致病菌。常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。金黄色葡萄球菌对高温有一定的耐受能力,在80℃以上的高温环境下30min才可以将其彻底杀死,另外金黄色葡萄球菌可以存活于高盐环境,最高可以耐受15%浓度的NaCl溶液。由于细菌本身结构特点,利用70%的乙醇可以在几分钟之内将其快速杀死。金黄色葡萄球菌代谢类型为需氧或兼性厌氧,对环境要求不高,37℃为最适生长温度,能在各种恶劣环境中存活下来,因此,用一般的营养琼脂即可正常培养细菌。金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌,广泛存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌在适当的条件下,能够产生肠毒素,引起食物中毒。金黄色葡萄球菌引发的食物中毒报道层出不穷,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黄色葡萄球菌成为仅次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。肠毒素是一种单链小分子蛋白,分子量约26-29kDa,相对分子质量较低,具有热稳定性,对人体肠道产生破坏,导致呕吐腹泻等症状。研究已发现多种类型的肠毒素或类肠毒素,除传统肠毒素A(SEA)、B(SEB)、C(SEC)、D(SED)、E(SEE)之外,SEG、SEH、SEI、SEJ、SEK、SEL、SEM、SEN、SEO、SEP、SEQ、SER、SEU和SEV等肠毒素也不断被发现。我国国家卫生和计划生育委员会于2013年发布《食品安全国家标准食品中致病菌限量》(GB29921-2013),在国标中制定了金黄色葡萄球菌的限量标准,规定熟肉制品、熟制水产品、熟制粮食制品等8大类食品中,同批次采集5份样品,每份样品中的金黄色葡萄球菌浓度均不得超出1000CFU/g,仅允许其中1份样品在100~1000CFU/g之间。世界上对食品中金黄色葡萄球菌的检测通常采用生化鉴定的手段,并在初期采用平板划线分离。当前我国检测食品中金黄色葡萄球菌依据国家标准《食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》(GB410-2016)中的方法进行。国家标准执行内容包括定性检测和定量检测两部分。在无菌条件下接种到肉汤中进行前增菌,最后将培养物接种划线,根据生化鉴定方法进行血清学鉴定。传统生化鉴定方法操作简单,稳定性强,成本低,是最常用的鉴定方法。免疫学检测方法主要是基于免疫学理论研究,其是通过设计的抗原、抗体和免疫细胞,检测抗原和抗体的结合以及免疫细胞分泌的细胞因子的,从而达到检测目的一种实验方法。该技术方法主要包括酶联免疫法、免疫荧光法、免疫胶体金法等。①酶联免疫法:其原理是利用抗体与抗原在载体表面的特异性结合,加入某种酶,酶与抗体或抗原结合在一起,从而形成可以跟踪抗体或抗原的标记物,由于抗原或抗体与受检样品的反应产生抗原或抗体的复合物,此时加入酶反应显色底物,产物的量的大小与检测物质的量的大小呈正相关,分析显色情况从而确定样品中待检测物的含量。已经开发了几种根据ELISA技术用于检测培养上清液和食物样品(例如干酪,土豆沙拉,火腿和牛奶)中的金黄色葡萄球菌。②免疫荧光法:免疫荧光技术利用荧光色素对抗体或抗原进行标记,然后检测目标抗原或抗体。抗原和抗体特异结合后,通过考察荧光信号的强弱进行定性定量检测。与酶介导的免疫测定相比,基于荧光的免疫测定具有提供高通量分析和灵敏度的更大潜力。③免疫胶体金法:该方法借助硝酸纤维膜为固定相载体,样品溶液通过毛细作用在试纸条中移动,在试纸条中同时加入了针对待检测物质特异性的抗原或抗体。与ELISA技术相比,免疫胶体金技术操作更为简单,对实验人员没有特别的技术要求,适合基层单位和现场诊断。但是免疫胶体金相比较ELISA法而言,灵敏度更低,且使用范围不广,需要进一步的研究。总体而言,免疫胶体金有着强大的发展潜力和广阔的应用前景。该技术主要包括聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)技术,核酸探针技术,环介导等温扩增技术等技术。①聚合酶链反应技术:该方法的原理是在DNA聚合酶的作用下,游离的脱氧核糖核酸参照碱基互补配对的原则,以模板DNA为主链,通过提供一段引物,迅速的扩增DNA的双螺旋结构。PCR技术特异性强、敏感度高,已广泛应用于医学、生物学等领域中。PCR作为致病微生物的检测方法,稳定性强,是主流的检测方法。在微生物检测应用中,引物的设计以及靶序列的选择是PCR方法的核心。PCR法同时也有一定的局限性,由于该方法需要对样品进行增菌,食品成分复杂,会对实验造成干扰。与其他方法相比,PCR技术仪器设备价格高,需要花费的成本较高,推广普及需要一定的时间和资金支持。②核酸探针技术:通过使用基因特异性核苷酸序列作为探针与目的DNA杂交的一种核酸杂交技术,通过检测该段特异性的标记物,从而判断是否含有目标微生物。核酸探针具有分子生物学检测技术的灵敏度高、特异性强的优点,但是实验周期长,操作繁琐,如果样品中目标微生物含量过低,极易造成样品目标微生物未检出,出现假阴性的实验结果。③环介导等温扩增技术:该技术基于DNA扩增技术,能够在恒温条件下,根据设计的多对引物,利用链置换型DNA聚合酶快速的进行核酸的扩增。与PCR方法比较,环介导等温扩增法操作更加快捷简单,花费成本较低,且对仪器要求低,能够广泛利用在食源性致病微生物的检测中。试剂盒法:试剂盒法通常将十多种,甚至几十种培养基或成分集中在特定微型装置内,通过观察微生物的生长和代谢过程的某些产物或现象,对试验现象进行分析,将传统试验中多次试验通过一次完成,缩短了检测时间。此法可大大缩短测试时间,在24h内得出结果,甚至某些可缩短至4h内。用于检测金黄色葡萄球菌的成品试剂盒有API、MIS等。测试片法:其将纸膜、纸片或胶片附着相关培养基和特定显色液作为金葡菌的培养载体,依据金葡菌在载体上的生长以及显色情况,来衡量食品中金黄色葡萄球菌的存在数量,该方法简便易行,但结果精度不高。合理选择食品原料和配料,使用安全的水和食物原料,改善加工环境的卫生和操作者的个人卫生习惯,避免金黄色葡萄球菌对食品的污染。牢记在安全的温度下保存食物,生熟分开,建议食物应该现做现吃。尽可能采取热处理确保杀灭细菌,热处理后避免二次污染。对已感染或携带某种病原体的食品加工人员,应依据有关法律法规,限制其从事食品加工活动。生产加工乳制品、肉类等高危食品的企业,应认真、严格的执行食品安全国家标准的相关规定。在加工过程中或在市场流通中发现产品检验的某些指标不符合食品安全国家标准,应以消费者利益为重,自觉把控出厂产品的质量、主动召回不合格产品,防范引起中毒事件的潜在风险。政府相关部门要加强我国食品中金黄色葡萄球菌安全的风险识别和风险评估研究工作。重视并持续开展预防和控制食源性疾病的宣传教育,及时提醒消费者一旦发生疑似金黄色葡萄球菌肠毒素中毒,除立即将患者送往医院进行救治外,还要立即停止食用并封存可疑食品。同时
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