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文档简介
HCG的定量检测一、实验原理采用ELISA双抗体夹心法原理。常用抗hCGß链(ß-hCG)单克隆抗体包被微孔板制成固相抗体,以HRP标记另一株抗-hCG单克隆抗体制成酶标记抗体;实验时于包被抗体的微孔中分别加人标准品、阴性对照、阳性对照、待测标本及酶标抗体,形成抗体-hCG-酶标抗体复合物,再加人底物显色后用酶标仪测定。颜色的深浅与待测标本hCG含量成正比。抗核抗体(antinuclearantibody,ANA)是自身免疫性疾病患者血清中最常出现的一类自身抗体,ANA检测对于自身免疫性疾病的诊断具有重要意义。ANA传统上是指抗细胞核抗原成分(包括DNARNA、蛋白或这些物质的分子复合物)的自身抗体的总称。近年来ANA的概念有所扩大,是指抗真核细胞所有抗原成分(包括核酸、核蛋白、细胞骨架及胞质成分等)的自身抗体,抗体主要为gG,也包IgAIgMIgDIgE,它们可与不同种属来源细胞的相应抗原成分发生反应。ANA主要存在于血液中,也可存在于胸水和关节滑膜液等体液中。ANA检测是许多自身免疫病诊断的首选筛查项目。(一}检测方法1.间接免疫荧光法[原理】
[试剂】试剂组成:细胞片、荧光素标记的抗人gG、阳性和阴性对照、PBS吐温缓冲液和封片介质等配套试剂。{操作】按试剂盒使用说明书或实验室制定的SOP进行操作,主要操作过程如下:标本稀释→加载标本→温育反应→洗涤→加荧光二抗→温育反应→洗涤→封片→观察结果。[参考区间}正常人血清ANA为阴性。2.ELISA【原理】取HEp-【试剂】包被有抗ß-hCG单克隆抗体的微孔板、一系列浓度的标准品、酶标记的抗ß-hCG单克隆抗体、酶显色底物溶液以及阴性对照、阳性对照、浓缩洗涤液、终止液。【操作】按试剂盒使用说明书进行操作。【结果判定】采用单波长(450nm)或双破长(450nm/620nm/630nm)比色测定,通常选用双波长比色。每次试验均需根据每个标准液的浓度与其相对应的OD值绘制标准曲线,待测标本hCG浓度即可从标准曲线上读出。所有稀释的标本需乘以相应的稀释倍数来进一步推算其浓度。【参考区间】1.男性与未绝经女性<5.0mlU/ml,绝经女性<1
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