几丁糖聚乙烯醇神经导管修复周围神经缺损的实验研究

几丁糖/聚乙烯醇神经导管修复周围神经缺损的实验研究第一部分几丁糖/聚乙烯醇神经导管修复大鼠周围神经缺损的实验研究[研究目的]本课题通过反复冻融技术制备几丁糖/聚乙烯醇神经导管,应用几丁糖/聚乙烯醇神经导管修复大鼠坐骨神经缺损,在不同时间节点,通过组织学方法评价几丁糖/聚乙烯醇修复大鼠周围神经缺损的效果。[研究方法]选取健康SD大鼠84只,随机分成4组,每组21只。造成坐骨神经15mm缺损,然后分别用几丁糖/聚乙烯醇神经导管、聚乳酸己内酮共聚物导管、硅胶管桥接和自体神经逆行原位移植,即几丁糖/聚乙烯醇神经导管组、[P(LLA-CL)]组、硅胶管组和自体神经移植对照组。分别在术后4,8和12周对动物进行大体观察、坐骨神经功能指数检查、电生理检查、肌肉湿重、肌细胞横截面积恢复率、有髓神经纤维计数、电镜观察,和神经逆行示踪检查评价神经再生。[结果]术后所有实验大鼠均成活,未发现切口感染,所有切口均Ⅰ期愈合。术后2周,几丁糖/聚乙烯醇神经导管组3只,聚乳酸己内酮共聚物导管组4只,硅胶管组6只,自体神经移植组有2只大鼠开始出现术侧足趾红肿、溃疡,脱趾现象。术后4周,几丁糖/聚乙烯醇神经导管组再生神经已完全长过神经缺损段,导管没有出现塌陷变扁现象,再生神经直径较细;术后8周,再生神经直径变粗;术后12周,再生神经直径变粗,再生神经粘连较轻,表面血管形成丰富。坐骨神经功能指数比较:术后4周,4组大鼠之间差异无统计学意义(p﹥0.05);术后8周,几丁糖/聚乙烯醇神经导管组优于P(LLA-CL)组和硅胶管组,差异有统计学意义(p<0.05),几丁糖/聚乙烯醇神经导管组和自体神经移植组,差异无统计学意义(p﹥0.05);术后12周,几丁糖/聚乙烯醇神经导管组优于P(LLA-CL)组和硅胶管组,差异有统计学意义(p<0.05);几丁糖/聚乙烯醇神经导管组和自体神经移植组差异无统计学意义(p﹥0.05)。肌电图检查:术后4周时所有组都未检测出肌电图表现;术后8周时自体神经移植组神经传导最快,但是与几丁糖/聚乙烯醇神经导管组和P(LLA-CL)组比较,差异无统计学意义(p>0.05),波幅自体神经移植组和几丁糖/聚乙烯醇组均优于P(LLA-CL)组之间差异有统计学意义(p﹤0.05),几丁糖/聚乙烯醇神经导管组不及自体神经移植组,差异有统计学意义(p﹤0.05);术后12周时几丁糖/聚乙烯醇神经导管神经传导速度和波幅自体移植组优于P(LLA-CL)组和硅胶管组,差异有统计学意义(p﹤0.05);几丁糖/聚乙烯醇神经导管和自体神经移植组之间,差异无统计学意义(p>0.05)。肌肉湿重恢复率:术后4、8和12周几丁糖/聚乙烯醇神经导管组、P(LLA-CL)组和自体神经移植组肌肉湿重恢复率优于硅胶管组,差异有统计学意义(p﹤0.05),几丁糖/聚乙烯醇神经导管组、P(LLA-CL)组与自体移植组之间差异无统计学差异(p﹥0.05)。有髓神经纤维计数:术后12周,几丁糖/聚乙烯醇神经导管组和自体神经移植组比较差异无统计学意义(p>0.05),二组均优于PLLA-CL组和硅管组,差异有统计学意义(p﹤0.05)。再生神经纤维直径:术后12周,几丁糖/聚乙烯醇神经导管组和自体神经移植组比较差异无统计学意义(p>0.05),二组均优于PLLA-CL组和硅管组,差异有统计学意义(p﹤0.05)。髓鞘厚度:几丁糖/聚乙烯醇神经导管组、PLLA-CL组不及自体神经移植组比较差异有统计学意义(p﹤0.05),三组均优于硅胶管组,差异有统计学意义(p﹤0.05)。术后12周各组神经逆行示踪:几丁糖/聚乙烯醇组、PLLA-CL组、硅管组和自体神经移植组中,均可见到Trueblue标记的阳性神经元细胞。各组脊髓前角运动神经元计数:几丁糖/聚乙烯醇神经导管组和自体神经移植组比较差异无统计学意义(p>0.05),二组均优于PLLA-CL组和硅胶管组,差异有统计学意义(p﹤0.05)。[结论]在SD大鼠实验中,几丁糖/聚乙烯醇神经导管具有促进神经轴突再生的作用,有望成为自体神经的替代材料应用于周围神经缺损的修复。第二部分几丁糖/聚乙烯醇神经导管修复猕猴周围神经缺损的实验研究[研究目的]探讨应用制备的几丁糖/聚乙烯醇神经导管,修复猕猴周围神经缺损的效果。[研究方法]选取健康猕猴12只,随机分成3组,每组4只。造成桡神经20mm缺损,然后分别用几丁糖/聚乙烯醇神经导管桥接、神经切除旷置和自体神经逆行原位移植处理,即几丁糖/聚乙烯醇神经导管组、空白组和自体神经移植对照组。在术后8月对动物进行大体观察、电生理检查、有髓神经纤维计数,评价神经再生。[结果]术后8个月,几丁糖/聚乙烯醇组再生神经已通过神经导管长入神经缺损的远侧端,再生神经粘连较轻。肌电图检测:几丁糖/聚乙烯醇神经导管组和自体神经移植组可检测出肌电图表现,但空白对照组未检测出肌电图表现;波幅:自体神经移植组和几丁糖/聚乙烯醇神经导管组之间差异无统计学意义(p>0.05),均不及正常对侧桡神经,差异有统计学意义(p<0.05);自体神经移植组神经传导速度优于几丁糖/聚乙烯醇神经导管组,差异有统计学意义(p<0.05),均不及正常桡神经,差异有统计学意义(p<0.05)。有髓神经纤维计数:几丁糖/聚乙烯醇神经导管组、自体神经移植组不及正常桡神经,差异有统计学意义(p<0.05);几丁糖/聚乙烯醇神经导管组和自体神经移植组比较,差异无统计学