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中华散尾鬼笔组织分离、ITS序列及抑菌活性研究本文通过中华散尾鬼笔的基础研究,包括分类地位、分布、毒性等的报道,分析了其在微生物源农药中的应用可行性,对野外采集的中华散尾鬼笔进行ITS序列分析及N-J系统发育树的构建,确定了中华散尾鬼笔的分类地位,并且对其进行了组织分离纯化培养;筛选最优培养基并优化培养基的配方,然后采用生长速率法和抑制孢子萌发法进行抑菌活性研究。ITS序列分析及N-J系统发育树的构建结果表明:采集到的真菌属于笼头菌科,亲缘关系接近竹荪属真菌,结合传统形态学描述,确定为散尾鬼笔属真菌中华散尾鬼笔。中华散尾鬼笔的培养试验结果表明:中华散尾鬼笔最佳培养基配方为,马铃薯200g、葡萄糖20g、蛋白胨3g、无机盐溶液(KH2PO41g、K2HPO41g、MgSO40.5g、CaCl20.05g、KCl0.5g、FeSO40.0lg、NaN030.5g溶于1OOOmL蒸馏水)10mL、琼脂15g、pH=5;中华散尾鬼笔的最佳培养温度为20℃;在以上培养条件下,中华散尾鬼笔的净生长量为0.64cm/d。中华散尾鬼笔的抑菌活性研究试验结果表明:培养液和培养液的粗提物对供试的三种林木病原菌均有抑菌活性。培养液对尖孢镰刀菌、灰葡萄孢菌和拟盘多毛孢菌的抑菌率分别为45.35%、37.08%和15.58%;5种有机溶剂作为提取溶剂对中华散尾鬼笔的培养液进行提取,粗提物对病原菌净生长量的影响正丁醇>乙酸乙酯>乙醚>氯仿>石油醚;正丁醇提取效果最好,正丁醇作为提取剂的粗提物对尖孢镰刀菌、灰葡萄孢菌和拟盘多毛孢菌的抑菌率分别为45.35%、37.08%和15.58%。中华散尾鬼笔培养液的抑制孢子萌发试验结果表明:培养液对尖孢镰刀菌抑制孢子萌发率为72.10%;5种有机溶剂作为提取溶剂对中华散尾鬼笔的培养液进行提取,提取物对尖孢镰刀菌孢子萌发的抑制效果由强到弱为乙醚>石油醚>氯仿>正丁醇>乙酸乙酯,抑制孢子萌发率分别为73.43%、30.46%、28.74%、25.20%和16

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