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文档简介
关于细菌数量的测定细菌数量的测定实验目的:1.学习微生物数量测定中常用的基本原理2.掌握几种测定细菌数量的方法3.学会使用血细胞计数板进行计数。第2页,共12页,2024年2月25日,星期天细菌数量的测定测定方法1
显微镜直接计数(计数板计数、载玻片计数)2平板菌落计数3比浊法材料用具菌种:酵母菌仪器:显微镜、血细胞计数板、计数器、无菌吸管、滤纸、盖玻片第3页,共12页,2024年2月25日,星期天计数室计数室(中间大方格)的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为______mm3,合_________mL。1mm0.11×10-4
血细胞计数板(希里格式25×16、,麦式16×25)载玻片盖玻片计数室正面图B侧面图第4页,共12页,2024年2月25日,星期天计数室计数室分为25中格(双线边)每一中格又分为16小格计数室是由___________个小格组成25×16=400第5页,共12页,2024年2月25日,星期天细菌数量的测定操作步骤1
菌液稀释2加样
将计数板水平放置试验台上,盖上盖玻片于计数室上方,用吸管将菌液吹吸均匀,然后吸取少量菌液,从计数板一侧中间平台与盖玻片接触的边缘处加样,让菌液自行渗入并充满计数室,多余的菌液用滤纸吸去
加样一气呵成,不可有气泡产生,不可使盖玻片悬浮第6页,共12页,2024年2月25日,星期天细菌数量的测定3
定位计数室
现在低倍镜下找到计数板大方格的位置,转换高倍镜后,适当调暗光线至计数室线条清晰为止第7页,共12页,2024年2月25日,星期天4计数A1A2A5A3A4选取如图5个中方格,进行计数。当遇上细胞位于分界线上时,按如下规则计数:
记上不记下,记左不计右第8页,共12页,2024年2月25日,星期天记上不记下,记左不计右第9页,共12页,2024年2月25日,星期天计数室细胞数量太多,则菌液需要稀释再计数,每个中方格细胞数量不超过50个为宜。第10页,共12页,2024年2月25日,星期天细菌数量的测定计算菌液浓度1ml培养液中酵母菌数量(个/ml)=平均每个中格酵母细胞数×25×10480小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数×稀释倍数第11页,共12页
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