胺类药物分析

关于胺类药物分析分类按化学结构可分为：

*脂肪胺类：*芳胺类:氨基直接与苯环相连.包括酰胺类、对氨基苯甲酸酯类。*芳烃胺类:指氨基在烃基侧链上，包括苯乙胺类.芳氧丙醇胺类季铵盐类磺酰胺类第2页,共60页,2024年2月25日，星期天一、对氨基苯甲酸酯类具有对氨基苯甲酸酯基本结构。具有游离的芳伯氨基。1．结构特点：第一节芳胺类药物的分析第3页,共60页,2024年2月25日，星期天代表药物有：

盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸丁卡因第4页,共60页,2024年2月25日，星期天2．性质：①

具有芳香第一胺结构，发生重氮化或重氮化-偶合反应，或与芳醛缩和；生成希夫碱；易氧化变色的特性（盐酸丁卡因除外）②

碱性具有脂烃胺侧链为叔胺氮原子—弱碱性（非水溶剂滴定），能与生物碱沉淀试剂发生反应。第5页,共60页,2024年2月25日，星期天③

具有酯的结构，容易水解。④

紫外吸收具有苯环结构，有紫外吸收。第6页,共60页,2024年2月25日，星期天1.结构特点：

苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位或对位有取代基。二、酰胺类第7页,共60页,2024年2月25日，星期天代表药物有：

对乙酰氨基酚盐酸利多卡因第8页,共60页,2024年2月25日，星期天2．性质：※利多卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加热才能水解）①

水解后可发生重氮化反应具有酰胺结构—共性。水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应。第9页,共60页,2024年2月25日，星期天③

碱性利多卡因侧链中具有叔氨N原子，显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀试剂或重金属离子反应。②

与FeCl3反应具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用呈色。④

紫外吸收具有苯环结构，有紫外吸收。第10页,共60页,2024年2月25日，星期天三、鉴别反应(一)、重氮化-偶合反应具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等，在酸性溶液中与NaNO2发生重氮化反应，再与碱性

-萘酚偶合产生红色偶氮化合物。具有潜在芳伯氨基，如对乙酰氨基酚，水解后可得芳伯氨基，能发生类似反应。第11页,共60页,2024年2月25日，星期天※盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀。第12页,共60页,2024年2月25日，星期天(二)、三氯化铁反应具有酚羟基（如对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用显蓝紫色。第13页,共60页,2024年2月25日，星期天(三)、与重金属离子反应(1)．与铜离子的反应(2)．与钴盐反应第14页,共60页,2024年2月25日，星期天(3)．羟肟酸铁的反应具有酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。如盐酸普鲁卡因胺。具有酰胺结构的药物羟肟酸羟肟酸铁第15页,共60页,2024年2月25日，星期天(四)、水解产物的反应（对氨基苯甲酸酯类）(1)．苯佐卡因的鉴别试验(4)与汞离子反应:盐酸利多卡因+硝酸汞黄色；对氨基苯甲酸酯显红色或橙黄色，以区别第16页,共60页,2024年2月25日，星期天(2).盐酸普鲁卡因的鉴别试验

第17页,共60页,2024年2月25日，星期天(五)紫外特征吸收光谱(六)红外吸收光谱第18页,共60页,2024年2月25日，星期天四.特殊杂质检查(一)对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查

对乙酰氨基酚中除检查酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣等一般杂质外，还需要检查：乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质（对氯乙酰苯胺）、对氨基酚等特殊杂质。第19页,共60页,2024年2月25日，星期天对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。第20页,共60页,2024年2月25日，星期天(1)．乙醇溶液的澄清度与颜色对乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有颜色，则说明有杂质存在。生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色。第21页,共60页,2024年2月25日，星期天（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）副反应副副反应对硝基氯苯为原料合成对乙酰氨基酚时，如发生这样的副反应就能够引入对氯乙酰苯胺。副反应第22页,共60页,2024年2月25日，星期天TLC法①

样品液②

对照液对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50

g/ml）③

分离系统硅胶GF254氯仿-丙酮-甲苯（13∶5∶2）第23页,共60页,2024年2月25日，星期天⑥

限量:④点样量样品液：200

l点于硅胶GF254薄层板上对照液：40

l⑤

判断在254nm波长紫外灯下观察，供试品与对照品主斑点Rf值相同的斑点比较,不得超过其大小与颜色。第24页,共60页,2024年2月25日，星期天(3)．对氨基酚制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水解都能引入对氨基酚☆检查原理：对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。第25页,共60页,2024年2月25日，星期天检查方法：限量：0.005%(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查第26页,共60页,2024年2月25日，星期天(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查方法：TLC

色谱条件：固定相：硅胶H展开剂：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1:1:4）显色剂：对二甲氨基苯甲醛第27页,共60页,2024年2月25日，星期天五、含量测定1．亚硝酸钠滴定法①

原理具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或还原，得芳伯氨基后，再进行测定。第28页,共60页,2024年2月25日，星期天第29页,共60页,2024年2月25日，星期天②

操作中的主要条件＊重氮化反应属于分子反应＊滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定＊反应速度受多种因素影响第30页,共60页,2024年2月25日，星期天第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。ⅰ．反应速度与药物结构的关系重氮化反应机制：第31页,共60页,2024年2月25日，星期天a.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如吸电基通过诱导效应使氨基上电子云密度降低，从而碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，所以反应速度就快。等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速度加快。第32页,共60页,2024年2月25日，星期天b.

当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如等。供电基能使氨基碱性增强，这样氨基成盐的机会就增大，游离芳伯胺的浓度就减小，所以反应速度就慢。第33页,共60页,2024年2月25日，星期天ⅱ．反应速度与酸及酸度的关系a.

酸的种类重氮化反应在HBr、HCl、H2SO4中反应速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍

第34页,共60页,2024年2月25日，星期天用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。但HBr价格贵，用盐酸代替，为加快反应速度，需加入KBr（催化剂）。产生HBr与HNO2反应，可生成大量NOBr，加快反应速度。第35页,共60页,2024年2月25日，星期天b.

盐酸的用量理论上:芳胺∶盐酸＝1∶2mol

实际上:芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6mol原因：＊强酸性可加速反应＊重氮盐在酸性下稳定＊酸性下避免副反应发生。

第36页,共60页,2024年2月25日，星期天如盐酸量增加，则反应向左进行。如盐酸浓度太大，反到会使游离芳伯氨的量减小（成盐），而影响重氮化反应速度，使反应速度减慢。如酸度不足则没反应的芳胺与生成的重氮盐产生偶氮氨基化合物，而影响测定结果。第37页,共60页,2024年2月25日，星期天ⅲ．反应速度与滴定时温度的关系一般，温度升高反应速度加快。但重氮化反应所生成的重氮盐不稳定，温度升高重氮盐分解速度也加快。另外，温度高时，滴定液亚硝酸钠也容易分解逸失，而影响测定结果。所以，重氮化反应应在低温条件下进行。第38页,共60页,2024年2月25日，星期天中国药典规定：在30

C以下，把滴定管尖端插入液面下处进行滴定。在滴定时一边搅拌一边加入大部分标准溶液。到近终点时把滴定管提出液面，用水冲洗后再继续滴定至终点。标准溶液在液面下加入，可避免NaNO2挥发。第39页,共60页,2024年2月25日，星期天ⅳ．反应速度与滴定速度的关系重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定速度不能过快。尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时，游离芳伯胺浓度非常低，反应速度就更慢了。所以，每加一滴标准液后，要搅拌1~5分钟后再判断终点。第40页,共60页,2024年2月25日，星期天③

指示终点的方法重氮化滴定法指示终点的方法有:永停法电位法外指示剂法内指示剂法我国药典主要采用永停滴定法指示终点第41页,共60页,2024年2月25日，星期天ⅰ．永停法原理：在被测溶液中插入两个相同铂电极，在两个电极间加10~200mV电压，并且在回路中串联一个灵敏的检流计（10A－9/格）。当用NaNO2滴定时，在终点前回路中没有电流，电流计指针指零。当到达滴定终点时，由于溶液中有微过量的NaNO2，使得在两个电极上发生氧化还原反应第42页,共60页,2024年2月25日，星期天阳极:导致在两电极间有电子流动，从而回路中有电流产生，使得电流计指针发生偏转并且不再返回零点。阴极：第43页,共60页,2024年2月25日，星期天ⅱ．电位法在被测溶液中插入甘汞-铂电极，到达滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2使电位产生突跃，从而指示终点。USP采用这个方法指示终点。第44页,共60页,2024年2月25日，星期天ⅲ．外指示剂法淀粉-KI糊剂或试纸原理：当达到滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2在酸性条件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉显蓝色。第45页,共60页,2024年2月25日，星期天使用方法：滴定时，把淀粉-KI试液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上划，如果立即出现蓝色即已到滴定终点。第46页,共60页,2024年2月25日，星期天外指示剂法的缺点：

由于滴定的溶液是强酸性，KI遇光能被空气氧化析出碘，所以，在没有达到终点时，就有可能呈现蓝色，而造成误判。

由于经常蘸取溶液进行试验，可造成滴定液的损失而带来误差。

方法难掌握。第47页,共60页,2024年2月25日，星期天ⅳ．内指示剂法内指示剂法指示终点，操作简便，但生成重氮盐一般都带有颜色，干扰指示剂颜色变化的观察，尤其是颜色很深时，更是这样。在重氮化滴定法中，内指示剂法应用不是很广泛。第48页,共60页,2024年2月25日，星期天(二)非水溶液滴定法（盐酸丁卡因、盐酸利多卡因的含量测定(三)分光光度法（对乙酰氨基酚的测定，吸收系数法）(四)高效液相色谱法（盐酸普鲁卡因注射液主成分及其降解产物的测定）第49页,共60页,2024年2月25日，星期天第二节苯乙胺类药物分析一．结构特点具有烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多数在苯环上有1~2个羟基取代基。如在苯环3、4位上有羟基取代，则为儿茶酚胺类药物。第50页,共60页,2024年2月25日，星期天代表药物

肾上腺素去甲肾上腺素第51页,共60页,2024年2月25日，星期天二．性质：1.

易被氧化邻苯二酚或苯酚结构，易被氧化呈色。3.

具有旋光性具有手性碳原子，具有光学活性。2.

显碱性具有烃胺侧链，显弱碱性。能与酸成盐。第52页,共60页,2024年2月25日，星期天三．鉴别试验1.氧化反应区别肾上腺素和去甲肾上腺素。第53页,共60页,2024年2月25日，星期天2、

三氯化铁反应：酚羟基+Fe3+显色（绿色）+Fe3+碱性紫色或紫红色

例：肾上腺素在0.1mol/L盐酸中与Fe3+显翠绿色，加氨试液后，显紫色或紫红色3、与甲醛-硫酸反应:

生成醌式结构显色（红色）4、紫外与红外吸收光谱:5、与亚硝基铁氰化钠反应重酒石酸间羟胺（伯氨基）+亚硝基铁氰化钠试液+丙酮+碳酸氢钠加热显红紫色第54页,共60页,2024年2月25日，星期天四、特殊杂质检查（一）酮体检查杂质引入：酮体氢化不完全检查方法：紫外分光光度法原理：利用肾上腺素等药物在310nm处无紫外吸收，而酮体在310nm处有吸收的特点，通过控制药物在310nm处的吸收度来控制药物中酮体的含量。第55页,共60页,2024年2月25日，星期天（二）有关物质检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺