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文档简介

7海洋微生物的分离主要内容任务一、海洋微生物的分离任务二、微生物的培养技术任务三、海洋微生物培养的新方法

任务一、海洋微生物的分离

微生物分离一般流程为

采样

富集培养分离筛选毒性试验微生物处于混杂的生长状态，必须分离、纯化。分离的方法有:划线分离法、稀释分离法、单孢子或单细胞分离法等。1.平板划线分离法用接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，划线适宜的话，微生物能分散，培养后，可在平板表面得到单菌落。平板上的菌落形态2.稀释倒平板法

将待分离材料用无菌水作梯度稀释（如1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000…），分别与已溶并冷至45℃的琼脂培养基混匀，倾入培养皿，凝固后保温培养一定时间即可出菌落。

若稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，挑取可得到纯培养。

3.单孢子或单细胞分离法

采取显微分离法直接分离单个细胞或个体获得纯培养。或用特制的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来，移到合适的培养基进行培养。4.选择性培养基分离法

各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用这些特性可配制合适某种微生物而限制其它微生物生长的选择培养基，用它来培养微生物以获得纯培养。（1）控制营养成分如要分离淀粉酶产生菌，可用淀粉作唯一碳源，分离蛋白酶产生菌，可用酪素作氮源。（纤维素培养基——分离产纤维素酶的菌）（2）控制培养基的酸碱度细菌要求中性、放线菌要求偏碱、酵母和霉菌要求偏酸性生长。（3）添加抑制剂如分离放线菌，可在培养基中加入几滴酚，可抑制霉菌和细菌的生长：分离真菌时，培养基中加入青霉素等抑制细菌生长的抗生素，可抑制细菌的生长。（加抗生素——分离真菌、加1%酚——分离放线菌）类型：（4）热处理如分离芽孢杆菌或耐热菌，可以把分离样品与60-70℃，甚至更高的温度处理，杀死其它营养细胞。（5）控制培养温度如分离嗜热微生物时，可把培养温度提高到50­60

℃，甚至更高。（6）控制通气条件分

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