江苏省扬州市仪征市2022-2023学年高二下学期期中生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1江苏省扬州市仪征市2022-2023学年高二下学期期中试题一、单项选择题：1.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（）A.将牛肉膏连同称量纸一起放在烧杯中加热可将牛肉膏与称量纸分离开B.制备步骤一般是：计算→称量→溶化→倒平板→灭菌C.对培养基灭菌时，一般采用高压蒸汽灭菌法D.在加热熔化琼脂的过程中要不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂〖答案〗B〖祥解〗微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，故实验室培养时需严格无菌操作，对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌，接种环用灼烧灭菌，实验者的双手用酒精擦拭消毒处理。【详析】A、牛肉膏比较黏稠，需要放在称量纸上称量，溶化时也需要连同称量纸一起放入烧杯，A正确；B、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：（1）计算：依据是培养基配方的比例。（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取。（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂。（4）调pH；（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌。（6）倒平板，B错误；C、常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，对培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌法，对培养皿的灭菌常用干热灭菌法，C正确；D、加入琼脂后需要熔化，此过程中要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂，D正确。故选B。2.传统发酵食品风味独特，深受人们喜爱。有关叙述正确的是（）A.腌制泡菜时，发酵温度过低可能会使泡菜“咸而不酸”B.啤酒发酵过程中，需始终保持严格的无菌和厌氧环境C.在果酒基础上进行醋酸发酵时，产生的气泡量明显增加D.为提高果酒品质，新鲜葡萄去除枝梗后用蒸馏水反复冲洗再榨汁〖答案〗A〖祥解〗泡菜制作的原理是乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸，为了防止微生物污染，制作泡菜过程中应进行无菌操作；泡菜盐水的浓度过高会抑制乳酸菌发酵，造成咸而不酸，盐浓度过低不足以抑制微生物生长，造成杂菌污染；为了缩短制作时间可以加入陈泡菜水，以增加乳酸菌数量。【详析】A、泡菜“咸而不酸”可能是食盐浓度过高，发酵温度过低抑制乳酸菌产生乳酸所致，A正确；B、为了缩短发酵时间，啤酒发酵初期应适当提供氧气，有利于酵母菌有氧呼吸快速繁殖，B错误；C、醋酸发酵时，没有气体生成，故醋酸发酵时，产生的气泡量明显减少，C错误；D、应该先冲洗后去除枝梗，且不能反复冲洗，否则会导致菌种流失，D错误。故选A。3.为宣传正确佩戴口罩可降低细菌等微生物引起的呼吸道传染疾病的风险，某生物兴趣小组进行了相关实验。实验中将牛肉膏蛋白胨培养基置于距正确佩戴口罩的实验者口部前方50cm处，然后对着培养基讲话1分钟或咳嗽2次，再进行微生物培养和观察。下列有叙述错误的是（）A.接种前要了解固体培养基是否被污染，需接种无菌水来培养检测B.实验者对培养基进行处理后，应放入37℃恒温培养箱中培养1～2天C.实验中还应设置“不戴口罩直接讲话或咳嗽”进行实验对照D.培养结束后可根据菌落的形状、大小、颜色等特征确定微生物的种类〖答案〗A〖祥解〗菌落是指由一个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群体。菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等，每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征。这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。【详析】A、接种前要了解固体培养基是否被污染，可直接将制备的平板放入恒温培养箱中检测，无需接种无菌水来培养检测，A错误；B、该实验的目的是探究正确佩戴口罩能降低呼吸道传染病的风险，则培养环境应与人体温度大致相同，即实验者对培养基进行处理后，放入37℃恒温培养箱中培养1-2天，B正确；C、该实验中的实验组是正确佩戴口罩的实验者口部前方50cm处，然后对着培养基讲话1min或咳嗽2次，为了确保实验更具有说服力，还应设置不戴口罩直接讲话或咳嗽进行实验对照，C正确；D、由于不同微生物的菌落特征不同，因此培养结束后可根据菌落的形状、大小、颜色等特征确定微生物的种类，D正确。故选A。4.农村畜禽养殖污染是我国新农村建设中的棘手问题，畜禽养殖使用的红霉素（一种抗生素，分子式C37H67NO13）在土壤中的残留量较高。某科研团队为解决土壤中红霉素超标问题，欲筛选一种能高效降解红霉素的菌株。有关说法错误的是（）A.配制的培养基通常用湿热灭菌法灭菌B.实验使用的平板和试管最好在使用前做好标记C.需要在以红霉素为唯一氮源的固体培养基上分离培养D.分离得到的红霉素降解菌株可接种在液体培养基中于常温下长期保存〖答案〗D〖祥解〗1、对于频繁使用的菌种，采用临时保藏的方法，首先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长大后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。2、对于需要长期保存的菌种，需要在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌，然后将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20°C的冷冻箱中保存，此方法为甘油管藏法。【详析】A、配制的培养基通常用湿热灭菌法灭菌，其中高压蒸汽灭菌的效果最好，A正确；B、实验使用的平板和试管比较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记，B正确；C、因为本实验的目的是筛选一种能高效降解红霉素（分子式C37H67NO13）的菌株，因此需要在以红霉素为唯一氮源的固体培养基上分离培养，C正确；D、长期保存菌种应该采用甘油管藏法，需要-20°C冷冻保存，D错误。故选D。5.平板划线法是一种常用的微生物接种方法，某研究小组进行了纯化大肠杆菌实验，图1为部分实验器材，图2为平板划线示意图。有关说法正确的是（）A.为获得图2的平板，需要使用图1中器材①②③④B.完成图2操作，接种环需经过5次灼烧灭菌C.图2的第4次划线区域中也可以得到所需菌落D.图2中第5区域的划线应与第1区域的划线相连〖答案〗C〖祥解〗由图1分析可知，图中①是酒精灯，②是接种环（用于平板划线接种），③是平板，④是涂布器（用于稀释涂布平板法接种）。图2为平板划线法。【详析】A、图②为平板划线法，为获得图2的平板，需要使用图1中器材①②③，A错误；B、接种环在每次划线前后均需灼烧，图中显示有5个划线区，所以接种环需要经过6次灼烧灭菌，B错误；C、由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落，C正确；D、划线时要避免最后一区的划线与第一区线连，因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，D错误。故选C。6.发酵工程以其生产条件温和，原料来源丰富且价格低廉，产物专一，废弃物对环境污染小和容易处理等特点，在医药工业、食品工业、环境保护等许多领域得到了广泛的应用。下列关于发酵工程的说法错误的是（）A.发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身B.发酵工程相比传统发酵技术，其获得的产品产量和质量明显提升C.利用发酵工程生产的微生物农药可以作为生物防治的重要手段D.以淀粉、纤维素的水解液等为原料，通过发酵工程可以从菌体中获取单细胞蛋白〖答案〗D〖祥解〗发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。生物防治：生物防治是利用物种间的相互关系，以一种或一类生物抑制另一种或另一类生物的方法。它是降低杂草和害虫等有害生物种群密度的一种方法。它的最大优点是不污染环境。生物防治方法主要包括：1. 利用微生物防治。2. 利用寄生性天敌防治。3. 利用捕食性天敌防治。【详析】A、根据发酵工程的概念可知，其产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，A正确；B、发酵工程相比传统发酵技术，由于菌种单一，规模大，因此其获得的产品产量和质量明显提升，B正确；C、生物防治中利用的手段有微生物、寄生物和天敌防治，据此可推测，利用发酵工程生产的微生物农药也可以作为生物防治的重要手段，C正确；D、单细胞蛋白就是微生物菌体本身，D错误.。故选D。7.下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（）A.切取胡萝卜块时，选择韧皮层容易诱导形成愈伤组织B.利用植物茎尖组织培养培有脱毒苗，可大量获得抗病毒的新品种C.细胞产物的工厂化生产利用的原理是植物细胞的全能性D.植物体细胞杂交技术克服了生物远缘杂交不亲和的障碍〖答案〗D〖祥解〗植物细胞工程技术的应用:植物繁殖的新途径(包括微型繁殖,作物脱毒、人工种子等)，作物新品种的培育(单倍体育种、突变体的利用)、细胞产物的工厂化生产。【详析】A、切取胡萝卜块时，选择的不是韧皮部，而是形成层，因为形成层容易诱导成为愈伤组织，A错误；B、利用茎尖分生组织培育脱毒苗是因为茎尖分生组织细胞中不含病毒，而不是因为其含有抗病毒基因，所以此方法不一定能使植株具备抗病毒的能力，B错误；C、细胞产物的工厂化生产未涉及到植物细胞的全能性，C错误；D、不同物种存在生殖隔离，亲缘关系比较远，常规的有性杂交方式不能进行。植物体细胞杂交可以2个不同物种的细胞杂合之一起，克服了这个障碍，D正确。故选D。8.中国科学院团队对雌性猕猴进行克隆，成功获得“中中”和“华华”两姐妹。如图为“中中”和“华华”培育的流程。有关说法正确的是（）A.图中的卵子实际上是初级卵母细胞B.该过程属于无性繁殖，“中中”和“华华”的遗传物质全部来自纤维细胞C.纤维细胞应选取培养10代以内的细胞，以保证其正常的遗传基础D.③过程需要使用免疫抑制剂，以降低受体对外来胚胎的排斥反应〖答案〗C〖祥解〗动物细胞核移植技术是将动物的细胞核移入一个去核卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。分析图示可知，①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②为对重组细胞进行体外培养，发育成新胚胎，再进行③胚胎移植过程，最终获得克隆猴。【详析】A、图中的卵子实际上是处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞，A错误；B、中中、华华是由重组细胞发育而来，其细胞核内的遗传物质来自纤维细胞，但细胞质的遗传物质来自于卵细胞，B错误；C、培养10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，因此纤维细胞应选取传代培养10代以内的细胞，以保证其正常的遗传基础，C正确；D、由于受体子宫对移植来的胚胎不发生免疫排斥反应，因此③过程不需要使用免疫抑制剂，D错误。故选C。9.如图为胚胎发育过程中某时期示意图。有关说法错误的是（）A.该图显示透明带破裂，出现孵化现象B.图中的内细胞团将来发育成胎盘和胎膜C.此时期的细胞开始出现分化D.此时期表示胚胎发育的囊胚期〖答案〗B〖祥解〗1、根据胚胎形态的变化，可将早期发育的胚胎分为桑椹胚、囊胚、原肠胚等。其中桑椹胚卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团；囊胚时，胚胎进一步发育，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而沿透明带内壁扩展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘。随着胚胎的进一步发育，囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化。2、分析题图可知，该时期为囊胚时期，胚胎已经完成孵化。【详析】A、由图可知，透明带已经破裂，胚胎从其中伸展出来，此过程为孵化，A正确；B、图中的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，B错误；C、此时期为囊胚时期，细胞开始出现分化，C正确；D、此时期表示胚胎发育的囊胚期，D正确；故选B。10.某同学列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（）比较内容植物体细胞杂交动物细胞融合A特殊处理酶解法去除细胞壁用胰蛋白酶处理分离出单个细胞B融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法C典型应用种间杂种植物培养克隆动物D培养基区别固体培养基，含蔗糖和植物激素液体培养基，含葡萄糖，一般含有动物血清A.A B.B C.C D.D〖答案〗C〖祥解〗植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，二者融合的原理都是细胞膜的流动性、植物体细胞杂交的原理还包括了植物细胞的全能性；诱导原生质体融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，而诱导动物细胞融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导。植物体细胞杂交的主要目的是培育新品种，而动物细胞融合的主要目的是用于获得单克隆抗体。【详析】A、在植物细胞杂交时首先运用纤维素酶或果胶酶去除植物细胞的细胞壁获得原生质体，而在动物细胞培养过程中要运用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞，A正确；B、植物体细胞杂交过程中运用物理法和化学法将原生质体进行融合，没有生物方法，而动物细胞融合可以利用物理、化学、生物三种方法，B正确；C、可以利用植物组织培养技术获得无病毒植物和人工种子，利用植物体细胞杂交进行种间植物杂交，动物细胞工程中利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体，无法培养克隆动物，C错误；D、植物组织培养的培养基属于固体培养基，利用蔗糖作为营养物质，其中还含有植物激素；动物细胞培养的培养基属于液体培养基，其中含有葡萄糖和动物血清等，利用动物血清作为促进细胞生长的物质，D正确。故选C。11如图表示利用二倍体小鼠所做的实验，相关分析合理的是（）A.过程①需要运用胚胎分割技术B.嵌合体幼鼠是二倍体C.代孕母鼠需进行超数排卵处理D.可用分割针取样内细胞团细胞，做DNA分析鉴别嵌合鼠的性别〖答案〗B〖祥解〗分析题图：图示是利用二倍体小鼠所做的实验，首先将白鼠和黑鼠的受精卵分别培养形成8细胞胚，再合并为16细胞胚，进一步发育为囊胚，最后移植到代孕母体分娩形成嵌合体幼鼠。【详析】A、过程①为动物早期胚胎培养，将16个细胞的胚培养成囊胚，A错误；B、嵌合体幼鼠体内的每一个细胞都含有2个染色体组，所以是二倍体，B正确；C、代孕母鼠需进行同期发情处理，但是不需要进行超数排卵处理，C错误；D、内细胞团将会发育为胎儿的各种组织，若可用分割针分割内细胞团会影响到胚胎发育，应用分割针割取滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别，D错误。故选B。12.在生物工程操作过程中，经常用到“筛选”这一技术手段。有关说法正确的是（）A.成功转入抗虫基因的棉花植株即具有抗虫特性，不需要经过鉴定筛选过程B.胚胎移植后需检查受体是否妊娠，移植前收集到的胚胎无需检查筛选C.利用基因工程构建膀胱生物反应器时，需要筛选出雌性胚胎进行移植D.试管婴儿技术，胚胎移植前需筛选出正常胚胎植入子宫〖答案〗D〖祥解〗1、基因工程目的基因的检测，可以用分子杂交技术、RNA分子杂交技术、抗原-抗体杂交等分子水平和个体水平进行检测。2、胚胎移植的基本程序主要包括:①对供、受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体;用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理);②配种或人工授精:③对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段);④对胚胎进行移植;⑤移植后的检查。【详析】A、成功转入抗虫基因的棉花植株不一定能表达抗虫相关蛋白，还需要经过鉴定筛选具有抗虫性状的棉花植株，A错误；B、胚胎移植前收集到的胚胎需要检查筛选出健康胚胎，胚胎移植后需检查受体母畜是否妊娠，B错误；C、利用基因工程构建膀胱生物反应器时，对胚胎的性别没有要求，因此不需要筛选出雌性胚胎进行移植，C错误；D、试管婴儿技术，胚胎移植前需要做遗传学诊断，筛选出健康正常胚胎植入子宫，以提高移植成功率，D正确。故选D。13.如图为基因表达载体的模式图，下列叙述错误的是（）A.构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶B.启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，其化学本质是DNAC.终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来D.抗生素抗性基因可检测受体细胞中是否导入了目的基因〖答案〗C〖祥解〗基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因等。1、启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；2、终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；3、标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。【详析】A、构建基因表达载体时首先要求用限制酶切割运载体和外源DNA，其次要求用DNA连接酶将运载体和目的基因连接形成重组质粒，A正确；B、启动子是一段有特殊结构DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质，B正确；C、终止子位于基因的下游，使转录在所需要的地方停止下来，C错误；D、抗生素抗性基因作为标记基因，可检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。故选C。14.基因工程中要使目的基因在受体细胞中稳定存在并能够表达和发挥作用，需要构建基因表达载体，构建过程如图。有关说法正确的是（）A.重组质粒a形成过程中，需要BamHI酶和DNA连接酶B.重组质粒a与感受态的大肠杆菌混合，是基因工程的核心步骤C.能在含有氨苄青霉素的培养基生存的一定是含有重组质粒的大肠杆菌D.图中大肠杆菌感受态细胞可通过Na+处理法获得〖答案〗A〖祥解〗基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。【详析】A、由图可知，重组质粒a形成过程中，首先需要BamHⅠ酶切割运载体和目的基因，其次要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA，A正确；B、基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，B错误；C、由图可知，标记基因是抗氨苄青霉素基因，因此能在含有氨苄青霉素的培养基生存的含有重组质粒的大肠杆菌或导入普通质粒的大肠杆菌，C错误；D、图中大肠杆菌感受态细胞可通过Ca2+处理获得，D错误。故选A。二、多选题15.“一菜一筷、公筷行动”成为聚餐新时尚。某校兴趣小组为验证公筷使用的必要性，将每道菜品分为两份，一份用公筷进食，一份不用公筷进食。通过规范的采样、接种、培养等环节后，统计菌落总数，结果如下表（CFU/g表示每克样品在培养基上形成的菌落总数）。有关说法正确的是（）菜名结果（CFU/g）餐前餐后公筷非公筷凉拌黄瓜140001600045000蒜蓉龙虾60150560A.本实验应设置未食用菜作为空白对照，排除无关变量的干扰B.使用公筷可明显降低菜品细菌污染，不使用公筷会导致菜品间的交叉污染C.稀释涂布平板法统计活菌数目与实际值有偏差，实验时宜使用平板划线法计数D.凉拌食品含有细菌较多，可能与其未经过加热环节有关〖答案〗ABD〖祥解〗由题干信息和表格数据分析可知，该实验的目的是验证使用公筷的必要性，实验的自变量为是否使用公筷，因变量是餐后的菌落数；通过对比，使用公筷后菌落数明显低于非公筷，这说明使用公筷可以降低菜品细菌污染。【详析】A、为排除无关变量的干扰，本实验应设置未食用菜作为空白对照，A正确；B、据表格数据可知，使用公筷后菌落数明显低于非公筷，说明使用公筷可明显降低菜品细菌污染，不使用公筷会导致菜品间的交叉污染，B正确；C、平板划线法不能用于细菌计数，C错误；D、据表格数据可知，凉拌黄瓜菌落数大大高于蒜蓉龙虾，说明凉拌食品含有细菌较多，可能与其未经过加热环节有关，D正确。故选ABD。16.我国南部边疆的守卫者，饱受蚊虫叮咬。科学家将天竺葵和香茅草的原生质体诱导融合，利用如图技术培育出含有香茅醛的驱蚊草。有关说法正确的是（）A.过程Ⅱ常用的诱导方法有电融合法、灭活病毒诱导法等B.图中两细胞融合完成的标志是两个原生质体核的融合C.植物体细胞杂交技术克服了不同物种间杂交不亲和的障碍D.若诱导组织生芽，则f培养基中生长素含量应低于细胞分裂素〖答案〗CD〖祥解〗据图分析，I表示去除细胞壁过程，II是诱导原生质体融合，III是植物再生出细胞壁，IV是脱分化，V是再分化过程。【详析】A、II是诱导原生质体融合，对于植物体细胞杂交过程中，不能用灭活的病毒进行，A错误；B、图中两细胞融合完成的标志是再生出细胞壁，B错误；C、植物体细胞杂交的意义在于克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍，C正确；D、若诱导组织生芽，则f培养基中生长素含量应低于细胞分裂素，若诱导组织生根，则f培养基中生长素含量应高于细胞分裂素，D正确。故选CD。17.丙草胺（）是一种广泛应用的除草剂。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数，如下图所示，以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述正确的是（）A.实验过程中应避免已灭菌处理的土壤与周围物品接触B.以丙草胺为唯一氮源配置的培养基属于选择培养基C.依据实验结果计算出每克土壤中的菌株数约为1.5×1010个D.利用稀释涂布平板法得到的结果往往比实际活菌数要低〖答案〗BCD〖祥解〗1、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。2、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。3、检测土壤中细菌总数，可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数。用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。【详析】A、土壤不需要灭菌，A错误；B、乙草胺可提供碳源、氮源，配制以乙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可提高降解菌的浓度，属于选择培养基，B正确；C、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，据图可知，该实验结果只有两个30～300之间的平板，按30～300之间的两个计算则约为1．5×1010个，C正确；D、图示采用的计数方法是稀释涂布平板法，由于两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到一个菌落，因此用该方法计数结果往往比实际活菌数要低，D正确。故选BCD。18.单克隆抗体在多种疾病的诊新和治疗中发挥重要的作用，下图为利用小鼠制备单克隆抗体的过程，下列有关叙述错误的是（）A.提取的脾B淋巴细胞有多种，是因为一种抗原可诱导产生多种B细胞B.诱导动物细胞融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法不完全相同C.在具有杂交瘤细胞的培养板上滴加相应抗体，出现阳性反应的即为目标细胞D.筛选出的目标杂交瘤细胞可在体外条件或注射到小鼠腹腔内进一步增殖培养〖答案〗AC〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详析】A、提取脾B淋巴细胞有多种，是因为小鼠曾经接触过其他多种抗原，A错误；B、诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法也相似，常用的诱导因素有聚乙二醇、电激等，但动物细胞融合还可以使用灭活病毒，植物原生质体融合则不能使用，B正确；C、单抗检测时可用抗原抗体实验鉴定要取培养液滴加相应抗原，出现阳性反应为目标细胞，C错误；D、筛选出的目标杂交瘤细胞可在体外条件或注射到小鼠腹腔内进一步增殖培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体，D正确。故选AC。19.下图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图（其中ampr为氨苄青霉素抗性基因）。下列叙述错误的是（）A.质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞和促进目的基因的表达B.过程②可用农杆菌转化法将含目的基因的表达载体导入受体细胞C.选用限制酶PstI、AluI对含目的基因的DNA和质粒进行剪切D.④过程中可利用含氨苄青霉素的培养基对植株进行筛选〖答案〗ACD〖祥解〗根据题意和图示分析可知：①表示基因表达载体的构建过程，需要限制酶和DNA连接酶；②表示将目的基因导入受体细胞的过程，常用农杆菌转化法；③④表示植物组织培养过程，其中③是脱分化和再分化过程、④是移栽过程。【详析】A、质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞，但不能促进目的基因的表达，A错误；B、将目的基因导入植物细胞时，常用农杆菌转化法，B正确；C、目的基因两侧是限制酶PstⅠ和SmaⅠ的识别序列，且质粒上也含有这两种限制酶的切割位点，所以可同时选用限制酶PstⅠ、SmaⅠ对含目的基因的DNA进行切割，C错误；D、图中过程④是进行移栽，不能再利用含氨苄青霉素的培养基来筛选含有目的基因的幼苗，应该在个体水平上进行抗冻性状检测，D错误。故选ACD。三、主观题20.春季是校园传染病的高发期，积极预防显得尤为重要。某生物兴趣小组对购买的一次性口罩进行检测，分析微生物的种类和数量。回答下列问题。（1）称取10g（近似10mL）样品，剪碎后加入到90mL无菌水中充分混匀，适时选取样液进行菌落计数。计数前需先配制_________培养基（按物理性质分类），培养基一般都含有水、_________________、无机盐等营养成分，使用_____________锅对其进行灭菌时，压力达到设定要求，锅内并没有达到相应温度，最可能的原因______________________。（2）计数时，采用___________________法，在4个平板上分别接种0.1mL样液并放入恒温培养箱中培养，此方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目______（“多”或“少”），原因是____________________________。若4个平板上的菌落数分别为36个、15个、45个和42个，那么1g口罩样品中活菌数量约为__________个。（3）一次性口罩含有聚乙烯（PE），分子式（C2H4）n，丢弃后容易形成医疗垃圾。如图为科研人员筛选聚乙烯降解菌的流程。土壤取样后_____（“是”或“否”）需要灭菌。根据用途划分，“以PE为唯一碳源培养液”属于_____（填选择或鉴别）培养基。若要用上述培养液来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养液的营养成分应该怎样更改？_______________。〖答案〗（1）①.固体②.碳源、氮源③.高压蒸汽灭菌④.灭菌锅内冷空气未排尽（2）①.稀释涂布平板②.少③.当两个或多个细胞连在一起时，平板上只观察到一个菌落④.4.1×103（3）①.否②.选择③.以尿素为唯一氮源〖祥解〗培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。

【小问1详析】培养基按其物理状态可分为固体培养基和液体培养基，固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面，因此计数前需先配制固体培养基。各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，在使用灭菌锅时，应先将锅内的冷空气排尽，再关上排气阀，否则，会出现压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度的情况，导致灭菌不彻底。【小问2详析】稀释涂布平板法可以用于微生物的计数。稀释涂布平板法统计菌落数目的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。采用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。计数时只计数30~300的平板，因此每克样品中的菌落数=（37+45+44）÷0.1×10=4.2×103个。【小问3详析】本实验中要从土壤中筛选聚乙烯降解菌，因此土壤取样后不需要灭菌，否则会导致目的菌被杀死。根据用途划分，培养基分为选择培养基和鉴别培养基，“以PE为唯一碳源培养液”属于选择培养基。筛选微生物的原理是：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长，因此若要用上述培养液来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养液以尿素为唯一氮源。21.猕猴桃因貌似猕猴而得名，是一种品质鲜嫩、营养丰富的美味水果。我国研究人员利用“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”两个不同种培育出了更加优良的品种，其过程如下图所示。请分析并回答下列问题：（1）因“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”之间存在__________________，所以用有性杂交方法很难得到可育后代。（2）用酶解法制备原生质体时，需先用较______（填“高”、“低”）渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处于微弱的质壁分离状态，然后用___________________酶消化去除细胞壁，获得原生质体。（3）过程③依据的生物学原理是______________。若融合仅考虑两两融合，则培养液中的融合细胞类型有_____种，获得的杂种细胞中________（填“含”或“不含”）同源染色体。过程④主要与___________（填细胞器名称）有关。（4）在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，依据的原理是_______________，⑤⑥过程分别称为______________________。（5）若两种猕猴桃都是二倍体，则杂种植株为________倍体。从理论上讲，该杂种植株的育性为______（填“可育”或“不育”）。〖答案〗（1）生殖隔离（2）①.高②.纤维素酶和果胶（3）①.细胞膜的流动性②.3③.含④.高尔基体（4）①.植物细胞的全能性②.脱分化、再分化（5）①.（异源）四倍体②.可育〖祥解〗分析题图可知，图示表示植物体细胞杂交的具体过程，其中E为融合的原生质体，F表示杂种细胞，G是培养得到的愈伤组织，H表示杂种植株。【小问1详析】因“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”是两个物种，它们之间存在生殖隔离，所以用有性杂交方法很难得到可育后代。【小问2详析】用酶解法制备原生质体时，需先用较高渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处于微弱的质壁分离状态，然后用纤维素酶和果胶酶消化去除细胞壁，获得原生质体。【小问3详析】过程③是原生质体的融合，依据的生物学原理是细胞膜的流动性。若仅仅考虑两两融合，存在同种细胞融合和不同种细胞融合一共三种融合细胞。因为杂种细胞融合的是体细胞，所以杂种细胞中含有同源染色体。过程④是再生细胞壁，主要和高尔基体有关。【小问4详析】利用杂种细胞培育杂种植株的过程是植物组织培养，依据的原理是植物细胞的全能性，⑤⑥过程分别称为脱分化、再分化。【小问5详析】若两种猕猴桃都是二倍体，则杂种植株为两两融合的（异源）四倍体，因为具有同源染色体，可以进行减数分裂产生配子，所以该杂种植株的育性为可育。22.随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。（1）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用_________（填数字）。（2）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射__________，使用_____________技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为_________。（3）应用2过程中若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行__________处理；得到的卵母细胞需要发育至_____________时期才能受精。_______________________标志着受精过程的完结。（4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过_____________技术获得二分胚①和②，操作时需要注意_____________________，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。（5）应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中所用的培养液为合成培养液，因此通常需要加入____________等天然的成分；动物细胞培养所需气体主要为O2和CO2，其中CO2的主要作用是__________________________。〖答案〗（1）1、3（2）①.促性腺激素②.核移植③.雌性（3）①.获能②.减数第二次分裂中期##MⅡ期③.雌原核和雄原核相互融合（4）①.胚胎分割②.将内细胞团均等分割（5）①.（动物）血清②.维持培养液的pH〖祥解〗分析题图：应用1中：供体I提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚，再将胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆牛；应用2中：优良公牛和供体1配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，再将胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；应用3中：采用了胚胎分割移植技术；应用4中：从早期胚胎和原始性腺中获取胚胎干细胞，并进行体外干细胞培养。【小问1详析】应用1采用了核移植技术，形成克隆动物，属于无性生殖；应用2采用体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，形成的是试管动物，属于有性生殖；应用4表示从早期胚胎或原始性腺中提取胚胎干细胞；应用3采用了胚胎分割技术，属于无性生殖，故图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用1和3。【小问2详析】应用1中，细胞B的获取需对供体2注射促性腺激素，进行超数排卵；使用细胞核移植技术获得重组细胞。应用1中获得的小牛为克隆牛，其细胞核遗传物质来源于供体1，细胞质遗传物质来源于供体2，因此其性别与提供细胞核的供体1相同，为雌性。【小问3详析】精子受精前需要进行获能处理；卵母细胞要发育到减数第二次分裂中期才成熟，才能参与受精。第二极体进入次级卵母细胞标志着受精过程的开始，当雄原核和雌原核相互融合时，标志着受精过程的完结。【小问4详析】可通过胚胎分割技术获得二分胚胎，对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。【小问5详析】动物细胞培养液中，通常需要加入血清等天然的成分。动物细胞培养所需气体主要为O2和CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。23.《伤寒论》中记载的芍药甘草汤是由芍药和甘草两味药物制成，具有调和肝脾，缓急止痛的作用，芍药和甘草的主要活性成分分别为芍药苷和甘草酸。科研团队通过制备抗芍药苷的单克隆抗体，将其纯化后结合在固相载体上，让芍药甘草汤流过，去除汤中芍药苷，用于探究芍药苷与芍药甘草汤对小鼠镇痛作用的相关性。回答下列问题。（1）制备单克隆抗体依赖的生物技术有______________、_________________等。将芍药苷与蛋白质结合作为抗原，定期间隔免疫小鼠，取免疫后的小鼠脾脏，剪碎并用_______酶处理得到小鼠脾脏细胞。（2）图中诱导其与骨髓瘤细胞融合的试剂X是____________，经选择培养筛选出的细胞Y具有________________________特点。用多孔培养板培养细胞Y并收集上清液，利用___________________技术对上清液进行抗体阳性检测。（3）研究人员将生理状态相同的小鼠随机分为对照组、造模组进行如下处理，造模组前期已完成冰醋酸致痛处理（冰醋酸能引起深部的、大面积且较持久的疼痛刺激，此时小鼠会出现扭体反应）。请完善实验方案。组别前期处理后期处理对照组腹腔注射生理盐水I造模组腹腔注射冰醋酸模型组：口服生理盐水阳性药组：口服芍药甘草汤实验组：Ⅱ①表中I的处理是_____________、Ⅱ的处理_______________。②结果与分析：若前期处理后，造模组小鼠扭体次数显著__________对照组，表明致痛处理成功。后期处理结束后测定各组小鼠扭体次数，若结果为______________________，则表明芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一。〖答案〗（1）①动物细胞培养②.动物细胞融合③.胰蛋白（胶原蛋白）（2）①.聚乙二醇（PEG）②.既能大量增殖，又能产生抗体③.抗原—抗体杂交（3）①.腹腔注射生理盐水②.口服去除芍药苷的芍药甘草汤③.高于④.实验组小鼠扭体次数高于阳性药组低于模型组〖祥解〗1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。【小问1详析】单克隆抗体制备的基本步骤：对小鼠进行免疫→提取B淋巴细胞→将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合→通过筛选、克隆化培养和扩大化培养→最终注入小鼠体内→从腹腔腹水中提取单克隆抗体，此过程依赖的生物技术有动物细胞培养和动物细胞融合等。剪碎后的组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成单个细胞。【小问2详析】诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的试剂是聚乙二醇（PEG），因此试剂X是聚乙二醇（PEG）。用特定的选择培养基进行筛选，只有杂交瘤细胞才能成活，因此经选择培养筛选出的细胞Y具有既能迅速大量增殖，又能产生抗体的特点。上清液中含有杂交瘤细胞，由于杂交瘤细胞能分泌抗体，故利用抗原-抗体杂交技术对上清液进行抗体阳性检测，以便筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞，选择阳性孔中的细胞（即能产生芍药苷抗体的细胞）继续植入小鼠腹腔内进行体内培养，从小鼠腹水中可提取到抗芍药苷的单克隆抗体，也可以将阳性孔中的细胞在体外进行扩大培养。【小问3详析】①正常对照组：前期处理为腹腔注射生理盐水(空白对照)，后期处理为a腹