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MOOC分子生物学实验-兰州大学中国大学慕课答案综合实验一单元测验1、问题:有助于去除细胞壁结构中多糖物质的试剂为:选项:A、SDSB、CTABC、Tris-HClD、CHCl3正确答案:【CTAB】2、问题:不能使DNA变性的有:选项:A、酰胺B、尿素C、TE溶液D、高温正确答案:【TE溶液】3、问题:1.在提取基因组DNA过程中,苯酚-氯仿抽提过的上清液中加入2倍体积乙醇的目的是:选项:A、沉淀RNAB、除蛋白质C、沉淀DNAD、降低DNA酶活性正确答案:【沉淀DNA】4、问题:最终沉淀DNA时,加入3mol/LNaAc溶液的作用是:选项:A、溶解断裂的小分子RNAB、溶解断裂的小分子DNAC、NaAc是强碱弱酸盐,水解产生的OH-使DNA易于聚集D、Na+中和DNA链上PO4-的负电荷,使DNA易于聚集正确答案:【Na+中和DNA链上PO4-的负电荷,使DNA易于聚集】5、问题:苯酚/氯仿/异戊醇混合液中,异戊醇的作用是:选项:A、沉淀DNAB、沉淀RNAC、使水相和有机相分层明显D、减少蛋白质变性时产生的气泡正确答案:【减少蛋白质变性时产生的气泡】6、问题:扩增一段目的DNA片段,请在下面的引物中选出合适的一对引物:目的DNA片段:5’-CCGGATGCGATAG—————CAGCTGATCTGGA-3’3’-GGCCTACGCTATC—————GTCGACTAGACCT-5’引物:(1)5’-CCGGATGCGATAG-3’;(4)5’-GTCGACTAGACCT-3’;(2)5’-CTATCGCATCCGG-3’;(5)5’-TCCAGATCAGCTG-3’;(3)5’-CAGCTGATCTGGA-3’;(6)5’-GGCCTACGCTATC-3’选项:A、(4)和(6)B、(2)和(5)C、(3)和(6)D、(1)和(5)正确答案:【(1)和(5)】7、问题:怎样减少PCR反应中的非特异性扩增?选项:A、提高变性温度B、提高退火温度C、降低变性温度D、降低退火温度正确答案:【提高退火温度】8、问题:有关PCR中使用的Taq酶,下列说法正确的是:选项:A、是高保真的酶B、是一种依赖于RNA的DNA聚合酶C、是一种热不稳定的酶D、是一种依赖于DNA的DNA聚合酶正确答案:【是一种依赖于DNA的DNA聚合酶】9、问题:经PCR扩增的DNA大小取决于:选项:A、DNA聚合酶B、循环次数C、模板DNAD、引物正确答案:【引物】10、问题:加PCR体系时,最后加的一种物质是:选项:A、模板DNAB、TaqEC、dNTPsD、引物正确答案:【TaqE】11、问题:关于琼脂糖凝胶的性质说法错误的是:选项:A、琼脂糖凝胶的性质为多糖B、琼脂糖凝胶可以随着温度的变化发生形态的变化C、琼脂糖凝胶可以分离核酸和蛋白质D、浓度大的琼脂糖凝胶可以分离小分子的DNA片段正确答案:【琼脂糖凝胶可以分离核酸和蛋白质】12、问题:质粒DNA的三种构象在琼脂糖凝胶电泳中泳动快慢的顺序是:选项:A、超螺旋线性松弛状B、松弛状线性超螺旋C、超螺旋松弛状线性D、线性松弛状超螺旋正确答案:【超螺旋线性松弛状】13、问题:琼脂糖凝胶电泳分离PCR产物时,在小于200bp处出现的一条带有可能是:选项:A、没有去除干净的RNAB、引物二聚体C、DNA模板D、杂质蛋白正确答案:【引物二聚体】14、问题:DNA样品缓冲液描述正确的是:选项:A、又叫loadingbufferB、无法指示核酸样品泳动的速度C、可以减小样品的比重D、可以减小DNA泳动时的摩擦阻力正确答案:【又叫loadingbuffer】15、问题:关于普通Taq酶,下列说法正确的是:选项:A、在PCR过程中,在合成的DNA的3’端加入一个非模板依赖的AB、是RNA依赖的DNA聚合酶C、是一种热不稳定的酶D、在PCR过程中,在合成的DNA5’端加入一个非模板依赖的A正确答案:【在PCR过程中,在合成的DNA的3’端加入一个非模板依赖的A】16、问题:基因克隆所需DNA载体的最基本性质是:选项:A、自我表达能力B、自我复制能力C、自我转录能力D、青霉素抗性正确答案:【自我复制能力】17、问题:重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是:选项:A、限制性核酸内切酶B、RNA连接酶C、DNA连接酶D、DNA聚合酶正确答案:【DNA连接酶】18、问题:载体和外源DNA的连接反应中,DNA两端不同粘性末端的连接优于相同粘性末端的连接,因为:选项:A、前者连接效率更高B、前者可以定向克隆C、后者可以定向克隆D、前者、后者均可以防止载体自连正确答案:【前者可以定向克隆】19、问题:关于DNA连接酶的说法,下列错误的是:选项:A、可以连接平末端B、可以连接粘性末端C、反应不需要耗能D、可以连接双链DNA正确答案:【反应不需要耗能】20、问题:质粒DNA导入受体细胞的过程称为:选项:A、转染B、转化C、转导D、感染正确答案:【转化】21、问题:克隆10kb以下的目的DNA,一般用什么载体?选项:A、BACB、CosmidC、质粒D、λ噬菌体载体正确答案:【质粒】22、问题:关于蓝白斑筛选,下面描述错误的是:选项:A、利用了大肠杆菌的乳糖操纵子系统来筛选重组DNAB、白色菌落很可能含有空载体,蓝色菌落很可能含有重组DNAC、IPTG是安慰性诱导物,能够诱导乳糖操纵子开启,但本身并不被β-半乳糖苷酶降解D、α互补是指质粒载体可以编码β-半乳糖苷酶的N端肽段,而宿主菌可以编码β-半乳糖苷酶的C端肽段,两者分开没有活性,但在一起可以形成有活性的β-半乳糖苷酶正确答案:【白色菌落很可能含有空载体,蓝色菌落很可能含有重组DNA】23、问题:转化了重组DNA的菌株能在含氨苄青霉素的培养基上生长是因为选项:A、抗生素失效B、忘记添加抗生素C、细菌本身耐氨苄青霉素D、载体含有氨苄青霉素抗性基因正确答案:【载体含有氨苄青霉素抗性基因】24、问题:能影响DNA在琼脂糖凝胶中泳动的因素为:选项:A、电泳缓冲液B、DNA分子的构象C、琼脂糖凝胶的浓度D、琼脂糖凝胶中所加的核酸染料正确答案:【电泳缓冲液#DNA分子的构象#琼脂糖凝胶的浓度#琼脂糖凝胶中所加的核酸染料】25、问题:PCR产物需要电泳检测,然后切胶回收才能用于后续的实验,是因为:选项:A、切胶回收可以去除非特异性的杂带,获得目标长度的片段B、可以去除PCR引入的各种盐、dNTP和TaqE酶等杂质,达到纯化DNA的目的C、是琼脂糖凝胶电泳分离核酸的必须步骤D、电泳时加大样品的上样量,起到浓缩DNA样品浓度的作用正确答案:【切胶回收可以去除非特异性的杂带,获得目标长度的片段#可以去除PCR引入的各种盐、dNTP和TaqE酶等杂质,达到纯化DNA的目的#电泳时加大样品的上样量,起到浓缩DNA样品浓度的作用】26、问题:除了蓝白斑筛选法,通常还可以用哪些方法来鉴定重组DNA?选项:A、PCR法B、酶切法C、测序D、SDS正确答案:【PCR法#酶切法#测序】综合实验二单元测验1、问题:关于绿色荧光蛋白的说法,正确的是:选项:A、是在水母中发现的单体蛋白B、在紫外光的激发下发出绿色荧光C、可作为报告基因或应用于蛋白质定位等方面D、全部都对正确答案:【全部都对】2、问题:关于质粒DNA,说法错误的是选项:A、游离于染色体之外的闭合、双链环状超螺旋结构DNAB、可分为松弛型和严紧型C、质粒并不是细菌生长发育必需的D、不可以自主复制正确答案:【不可以自主复制】3、问题:关于配制的苯酚溶液上层的水相的作用的说法错误的是:选项:A、增加比重B、隔绝空气C、防止苯酚氧化D、对苯酚起保护作用正确答案:【增加比重】4、问题:关于碱裂解法提取质粒DNA,说法错误的是:选项:A、溶液I中的EDTA可以螯合溶液中的钙镁二价金属离子,抑制依赖于钙镁离子的DNA酶的活性,保护DNA不受降解B、溶液II中的NaOH和SDS可以裂解细胞,SDS使蛋白质变性,NaOH使基因组DNA和质粒DNA变性为单链C、溶液Ⅲ的乙酸钾溶液可以起中和作用D、苯酚/氯仿/异戊醇抽提蛋白质后,变性的蛋白质留在水相中正确答案:【苯酚/氯仿/异戊醇抽提蛋白质后,变性的蛋白质留在水相中】5、问题:下面说法错误的是:选项:A、OD260/OD280=1.8,是较纯的DNAB、OD260/OD2302.0,说明核酸纯度不高C、OD260/OD2801.6表明有蛋白质、酚污染D、OD260/OD2801.9,表明有RNA污染正确答案:【OD260/OD2302.0,说明核酸纯度不高】6、问题:以下说法正确的是:选项:A、DNA连接酶通过把DNA链拉在一起,形成磷酸二酯键而将DNA连接起来B、因为粘性末端的连接比平末端连接效率高,所以实际实验过程中DNA总是通过粘性末端连接的C、DNA连接酶连接DNA过程中不需要耗能D、DNA连接酶能连接双链DNA,或者双链DNA分子的一部分正确答案:【DNA连接酶能连接双链DNA,或者双链DNA分子的一部分】7、问题:琼脂糖凝胶电泳加样缓冲液的作用是:选项:A、减小样品密度B、使样品呈现颜色,便于加样C、加大样品的泳动距离D、溶解样品DNA正确答案:【使样品呈现颜色,便于加样】8、问题:影响连接效率的因素不包括:选项:A、外源DNA和载体的摩尔比B、连接温度与时间C、连接酶浓度及缓冲液D、连接酶体系的体积正确答案:【连接酶体系的体积】9、问题:表达载体与克隆载体的主要区别在于:选项:A、都有复制起点B、都有筛选标记基因C、都有多克隆位点D、表达载体有启动子序列正确答案:【表达载体有启动子序列】10、问题:关于T7启动子,下列说法正确的是:选项:A、能与细菌的RNA聚合酶结合B、能与T7噬菌体RNA聚合酶结合C、能与真核生物RNA聚合酶III结合D、能与真核生物RNA聚合酶II结合正确答案:【能与T7噬菌体RNA聚合酶结合】11、问题:pET表达系统的特点包括:选项:A、低本底B、可诱导C、高效率D、全部都对正确答案:【全部都对】12、问题:经过理化方法处理细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态,处理过的细胞被称为:选项:A、感受态细胞B、感染细胞C、活化细胞D、多能细胞正确答案:【感受态细胞】13、问题:关于E.coliBL21(DE3)说法错误的是:选项:A、是大肠杆菌表达用的受体细胞B、能被E.coliDH5a取代C、能表达T7RNA聚合酶D、与含有T7启动子的pET载体配套使用正确答案:【能被E.coliDH5a取代】14、问题:SDS分离蛋白质是根据蛋白质的:选项:A、分子量B、电荷C、构象D、等电点正确答案:【分子量】15、问题:在制备蛋白质样品过程中,加巯基乙醇的目的是:选项:A、打开氢键B、打开二硫键C、打开离子键D、破坏疏水作用力正确答案:【打开二硫键】16、问题:聚丙烯酰胺凝胶的说法正确的是:选项:A、凝胶的聚合反应是物理反应B、只能分离蛋白质,不可以分离核酸C、凝胶孔径的大小与分离的物质有关D、分离分子量小的蛋白质分子往往选择浓度高的凝胶正确答案:【分离分子量小的蛋白质分子往往选择浓度高的凝胶】17、问题:关于SDS中加入SDS和巯基乙醇的目的,说法错误的是:选项:A、增加比重B、破坏蛋白质二、三级结构C、使蛋白质带上负电荷,屏蔽电荷差异D、使蛋白质变性正确答案:【增加比重】18、问题:配制聚丙烯酰胺凝胶时,凝胶一直不发生交联聚合,最不可能因为漏加了:选项:A、10%SDSB、30%凝胶储液C、过硫酸铵(AP)D、四甲基乙二胺(TEMED)正确答案:【10%SDS】19、问题:用Westernblotting检测某种蛋白质的存在,结果发现NC膜上背景很高,最可能原因是:选项:A、抗体浓度过低B、封闭不好C、显色时间过短D、转膜电极插反正确答案:【封闭不好】20、问题:有关限制性内切酶,下列说法正确的是:选项:A、都能识别特定的核苷酸序列,并在确定的位点切割B、分为I、II、III型,实验室常用的是II型酶C、I和III型都有限制和修饰的作用,II型只有限制作用D、是可以识别单链DNA分子中某段特定的核苷酸序列,并切割磷酸二酯键的核酸内切酶正确答案:【分为I、II、III型,实验室常用的是II型酶#I和III型都有限制和修饰的作用,II型只有限制作用】21、问题:载体的特点包括:选项:A、有复制起点B、有一个或几个筛选标记基因C、有多克隆位点D、一般载体本身较小正确答案:【有复制起点#有一个或几个筛选标记基因#有多克隆位点#一般载体本身较小】22、问题:标签蛋白的作用是:选项:A、破坏目标蛋白B、增加蛋白长度C、可用于检测是否有目的蛋白的表达D、可用于分离纯化表达的目的蛋白正确答案:【可用于检测是否有目的蛋白的表达#可用于分离纯化表达的目的蛋白】23、问题:灌制分离胶后加入一层水相的原因是:选项:A、隔绝空气,使分离胶交联聚合的更完全B、防止分离胶与浓缩胶混合C、使分离胶的界面更齐整D、清洗凝胶室正确答案:【隔绝空气,使分离胶交联聚合的更完全#使分离胶的界面更齐整】24、问题:加入抗体检测时,采用间接检测法比直接检测法更优越是因为:选项:A、不用逐一标记一抗B、有交叉反应产生的非特异性条带C、增加了额外孵育的步骤D、有信号放大作用,灵敏度高正确答案:【不用逐一标记一抗#有信号放大作用,灵敏度高】25、问题:如果Westernblotting免疫印迹检测没有出现条带,可能的原因是:选项:A、没有目标蛋白表达B、转膜的时候电极插反了C、抗体失效D、转膜时间太短正确答案:【没有目标蛋白表达#转膜的时候电极插反了#抗体失效#转膜时间太短】26、问题:做一次同厂家同批号蛋白Marker的蛋白质标准曲线,可以用于该Marker所有SDS的蛋白质分子量的计算。选项:A、正确B、错误正确答案:【错误】综合实验三单元测验1、问题:人类性别鉴定实验的本质是:选项:A、基因检测B、蛋白质检测C、细胞检测D、器官检测正确答案:【基因检测】2、问题:性别鉴定与新冠病毒(RNA病毒)核酸检测相似的步骤可能是:选项:A、基因组DNA的提取B、PCR扩增目的片段C、琼脂糖凝胶电泳D、PCR中的引物经荧光标记正确答案:【PCR扩增目的片段】期末考试1、问题:对于PCR中使用的Taq酶,下列说法正确的是:选项:A、是一种高保真酶B、会在PCR产物DNA的5'末端非特异性地添加碱基AC、是热稳定的酶,所以可在常温下保存D、催化速度快,多个循环后仍保持活性正确答案:【催化速度快,多个循环后仍保持活性】2、问题:关于琼脂糖凝胶分离PCR产物说法错误的是:选项:A、电泳最快且最接近正极的条带可能是引物二聚体B、分辨率高,可分辨几个bp差别的PCR产物C、非特异条带的产生可能是因为引物设计不合理D、条带太暗的原因可能是退火温度不合适正确答案:【分辨率高,可分辨几个bp差别的PCR产物】3、问题:碱裂解法提取质粒DNA时使用的溶液Ⅰ的成分为:选项:A、25mmol/LTris·HCl(pH8.0)、10mmol/LEDTAB、0.2mol/LNaOH、1%SDSC、5mol/LKAC、冰醋酸D、50mmol/L葡萄糖、25mmol/LTris·HCl(pH8.0)、10mmol/LEDTA正确答案:【50mmol/L葡萄糖、25mmol/LTris·HCl(pH8.0)、10mmol/LEDTA】4、问题:Westernblotting中封闭反应起什么作用:选项:A、替换固相载体表面上的靶蛋白B、与固相载体表面的空白位置结合C、与靶蛋白结合D、与抗体或检测试剂发生反应正确答案:【与固相载体表面的空白位置结合】5、问题:提取的质粒内混杂有基因组DNA的污染,可能的原因有:选项:A、菌液非单菌落菌液B、在裂解时基因组DNA被机械外力打断C、提取质粒时未换枪头D、质粒被核酸酶降解正确答案:【在裂解时基因组DNA被机械外力打断】6、问题:蛋白值经SDS电泳分离后,下列描述正确的是:选项:A、经过SDS电泳分离后,蛋白质仍具有活性B、经过SDS电泳分离后,蛋白质是单个亚基C、经过SDS电泳分离后,蛋白质能保持其天然构象D、经过SDS电泳分离后,蛋白质是复合体正确答案:【经过SDS电泳分离后,蛋白质是单个亚基】7、问题:制备感受态细胞应选择哪个时期的细胞:选项:A、迟缓期B、对数期C、稳定期D、衰亡期正确答案:【对数期】8、问题:在Westernblotting实验中,某同学操作时将一抗和二抗的顺序加反了,显色后会出现什么情况:选项:A、有清晰的条带,背景干净B、有条带但背景很杂C、没有任何条带,背景干净D、没有条带,背景很杂正确答案:【没有任何条带,背景干净】9、问题:关于表达受体E.coliBL21(DE3)说法错误的是:选项:A、是大肠杆菌表达用的受体细胞B、能被E.coliDH5a取代C、能表达T7RNA聚合酶D、与含有T7启动子的pET载体配套使用正确答案:【能被E.coliDH5a取代】10、问题:关于离心机的说法正确的是:选项:A、样品必须配平B、转速的单位为r/minC、液体应不能超过离心管的三分之二D、离心机运转时,可以移动离心机正确答案:【样品必须配平#转速的单位为r/min】11、问题:在提取基因组DNA实验中会使用苯酚-氯仿-异戊醇混合液,其中氯仿和异戊醇的作用是:选项:A、沉淀DNAB、减少蛋白质变性时产生的气泡C、去除脂类杂质D、使水相和有机相分层明显正确答案:【减少蛋白质变性时产生的气泡#使水相和有机相分层明显】12、问题:PCR产物量过少的可能原因是:选项:A、退火温度不合适B、DNA模板量太少C、引物量不足D、延伸时间太短正确答案:【退火温度不合适#DNA模板量太少#引物量不足#延伸时间太短】13、问题:电泳后产生DNA条带弥散的原因可能是:选项:A、DNA被部分降解B、DNA纯度差C、DNAMarker失效D、电泳缓冲液重复使用了很多次正确答案:【

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