版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
关于单基因病致病基因的鉴定2每一片代表一个基因,有规律的组合在一起形成一条染色体第2页,共29页,2024年2月25日,星期天3第3页,共29页,2024年2月25日,星期天4第4页,共29页,2024年2月25日,星期天5第5页,共29页,2024年2月25日,星期天6功能克隆:从蛋白质着手进行基因克隆的策略。定位克隆:在蛋白质产物未知的情况下进行基因克隆的策略。蛋白酶消化、分离氨基酸序列测定设计合成寡核苷酸筛选cDNA文库不同多肽片段家系资料连锁分析获得差异片段染色体异常筛选cDNA文库
克隆全长基因精细定位消减克隆第6页,共29页,2024年2月25日,星期天7第7页,共29页,2024年2月25日,星期天8第一节功能克隆通过基因的功能(编码蛋白)而不依赖定位的信息来分离基因的策略第一个疾病致病基因通过此策略发现范例:镰状细胞贫血的β-珠蛋白基因苯丙酮尿症的苯丙氨酸羟化酶基因第8页,共29页,2024年2月25日,星期天9流程示意图第9页,共29页,2024年2月25日,星期天10甲型血友病遗传方式:XR发病率:1/10,000(男)病因:FⅧ基因遗传性缺陷
(缺失、点突变、插入、重复、倒位)
基因定位:Xq28
基因全长186kb,含26个外显子
临床表现:外伤后出血不止,关节血肿第10页,共29页,2024年2月25日,星期天11☆FⅧ因子基因的功能克隆功能克隆是从蛋白质着手进行基因克隆的策略。Ⅷ因子多肽不同多肽片段蛋白酶消化分离氨基酸序列测定设计合成寡核苷酸筛选cDNA文库第11页,共29页,2024年2月25日,星期天12通过动物模型鉴定疾病基因第12页,共29页,2024年2月25日,星期天13第13页,共29页,2024年2月25日,星期天14第14页,共29页,2024年2月25日,星期天15第二节定位克隆基于染色体异常的基因定位连锁分析确定致病基因第15页,共29页,2024年2月25日,星期天16基于染色体异常的基因定位第16页,共29页,2024年2月25日,星期天17连锁分析第17页,共29页,2024年2月25日,星期天18确定致病基因突变筛查:在家系中该突变与表型共分离是最主要的证据表型拯救:有些导致疾病的突变通常引起基因功能的丧失,而且其表型是可逆的。如果从一个患者的细胞中能够发现基因突变的表型,我们就可以检测转染了候选基因野生型等位基因的表达载体是否能够“拯救”突变并恢复正常的表型建立疾病的小鼠模型:如果能够在某一家系中确定一个致病基因,但又无法利用更多的无关患者来验证,通过构建小鼠模型来验证。对于功能丧失性突变导致的表型可以通过制作基因敲除(knock-out)小鼠。对于功能获得性突变导致的表型或者突变效应不清楚的表型,可以制作突变基因敲入(knock-in)模型第18页,共29页,2024年2月25日,星期天19第19页,共29页,2024年2月25日,星期天20Duchenne型肌营养不良(Duchennemusculardystrophy,DMD)遗传方式:XR发病率:1/3400(男)临床表现:双下肢肌无力、Gower征、腓肠肌假性肥大、进行性肌萎缩(一般≤20岁)。病因:DMD基因突变,→抗肌萎缩蛋白(dystrophin)↓。基因定位:Xp21.23,全长2,400kb,含79个外显子,是已知最大的致病基因。第20页,共29页,2024年2月25日,星期天21Gower综合征第21页,共29页,2024年2月25日,星期天22☆DMD基因的定位克隆定位克隆是在蛋白质产物未知的情况下进行基因克隆的策略。家系资料精细定位消减克隆连锁分析获得差异片段染色体异常筛选cDNA文库克隆全长第22页,共29页,2024年2月25日,星期天23第三节基于高通量测序技术的致病基因的鉴定2005年问世的高通量测序技术是测序技术发展历程的一个里程碑,使得疾病的研究策略发生了重大转变。高通量测序技术的突出优势是测序速度快和测序成本大幅度降低。第23页,共29页,2024年2月25日,星期天24NGS技术策略全基因组测序全外显子组测序目标区域测序疾病相关基因平行测序第24页,共29页,2024年2月25日,星期天25NGS技术在单基因遗传病致病基因鉴定中的策略基于序列捕获技术,研究者可以在全基因组筛选的基础上对特定区域进行更深层次的研究由于目标区域缩小,在获得足量目标区域基因变异信息的前提下,样品的测序成本也会大幅降低第25页,共29页,2024年2月25日,星期天26单基因病家系致病基因鉴定第26页,共29页,2024年2月25日,星期天27单基因病散发
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 二年级下册音乐教案-6 《两只老虎》 ︳人音版 (五线谱)
- 部编版四年级下册道德与法治期末测试卷附参考答案(b卷)
- 人教版六年级下册数学期末测试卷及答案一套
- 人教版六年级下册数学期末测试卷附参考答案【培优b卷】
- 人教版六年级下册数学期末测试卷(达标题)
- 人教版四年级下册数学期末测试卷及参考答案【考试直接用】
- 人教版四年级下册数学期末测试卷完整参考答案
- 人教版四年级下册数学期末测试卷附参考答案【轻巧夺冠】
- 小学六年级下册数学期末测试卷及参考答案(综合卷)
- 小学六年级下册数学期末测试卷及答案【必刷】
- 单片机-外文文献及翻译
- 2023年中国电建集团北京勘测设计研究院有限公司招聘笔试题库含答案解析
- 解剖体表标志
- 填空题(一)(答案)-中考总复习生物提分专题训练北师大版(八年级全册)
- FZ/T 81004-2022连衣裙、裙套
- GB/T 39263-2020道路车辆先进驾驶辅助系统(ADAS)术语及定义
- 建设项目办理用地预审与选址意见书技术方案
- 精神疾病专科临床医疗质量控制与评价标准
- 油茶营造林作业质量验收标准及实施办法
- 人音版小学六年级下册音乐全册教案
- 挫折心理健康教育课公开课课件
评论
0/150
提交评论