人工抗体的制备

关于人工抗体的制备第一节多克隆抗体一、概念：采用传统免疫方法，将抗原物质经不同途径注入动物体内，数次免疫后采血，分离血清，由此获得抗血清即为多克隆抗体。简称多抗。第2页,共17页，2024年2月25日，星期天二、多克隆抗体用途1.用于抗原物质的鉴别、定位、分析和提纯。2.作为疾病的诊断、检疫试剂。3.作为人和动物的某些疾病的治疗制剂。第3页,共17页，2024年2月25日，星期天三、多克隆抗体制备过程第4页,共17页，2024年2月25日，星期天第二节单克隆抗体一、概念：

是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞（浆细胞）产生的针对单一抗原决定簇的抗体，简称单抗。

特点：高特异性、高均一性第5页,共17页，2024年2月25日，星期天二、单抗与多抗的比较

特性多抗

单抗

对免疫原的要求免疫原纯度高，不纯的抗原即可抗体纯度才高产生高纯度抗体

抗体产生细胞多克隆性单克隆性

同质性高度异质高度同质

特异性较高，与抗原上高，与特定多种决定簇结合决定簇结合

稳定性较好较差

标准化较难简单

交叉反应很常见不常见

沉淀反应有大多数没有第6页,共17页，2024年2月25日，星期天二、单抗与多抗的比较

特性多抗

单抗

适用的血清学实验适用大多数需适当选择抗体纯度才高产生高纯度抗体

供应量有限无限

有效抗体含量

0.1~1.0悬浮培养：0.01~0.05

（mg/mL）中空纤维：1.0~5.0

小鼠腹水：1.0~5.0

无关Ig含量

10~15体外培养液：无

（mg/mL）小鼠腹水：0.5~1.0

其他血清蛋白有体外培养：少量牛血清白蛋白小鼠腹水：少量杂蛋白第7页,共17页，2024年2月25日，星期天三、建立B细胞杂交瘤与单克隆抗体生产基本过程第8页,共17页，2024年2月25日，星期天四、单克隆抗体的优势

高度均一性：纯度很高的均一性抗体

高度专一性：只对抗原分子上某一抗原决定簇起反应。

大量产生及稳定性：杂交瘤细胞能在体内外无限繁殖之传代。

第9页,共17页，2024年2月25日，星期天五、单克隆抗体的应用（一）在血清学技术方面。（二）在免疫学基础研究方面。（三）在肿瘤治疗方面。如生物导弹。（四）在抗原纯化方面。（五）用于制备抗独特型抗体疫苗。第10页,共17页，2024年2月25日，星期天第三节基因工程抗体一、概念：利用基因工程技术制备的抗体分子，称为基因工程抗体。这是分子水平的抗体。优势：去除或减少无关结构，保留或增加天然抗体特异性和生物学活性。

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基本制备过程：第12页,共17页，2024年2月25日，星期天

是指在同一抗体分子中含有不同种属来源抗体分子片段的抗体。

嵌合抗体多为“鼠-人”类型。一、嵌合抗体：

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将鼠抗体超变区基因嵌入人抗体Fab骨架区编码基因中，再将此DNA片段与人Ig恒定区基因相连，转染杂交瘤细胞，并表达嵌合的V区抗体。

二、重构抗体：

三、单链抗体：

是将Ig的H链和L链的V区基因相连，转染大肠杆菌表达的抗体分子，又称单链FV分子。

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如:Ig相关分子：将抗体分子部分片段连接到与抗体无关的序列上得到。

噬菌体抗体：将已知特异性的抗体分子的所有V区基因在噬菌体中构建基因库，用噬菌体感染细菌，模拟免疫选择过程，使具有相应特异性的重链和轻链可变区在噬菌体表面呈现出来。四、其他基因工程抗体：

五、全套抗体基因库

第15页,共17页，2024年2月25日，星期天第四节催化抗体一、概念：