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试验十九、纸色谱试验二十、氨基酸纸 上电泳纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第1页一、目标与要求：1、了解纸色谱基本原理。2、学习用纸色谱法分离氨基酸普通操作。3、了解电泳基本原理，学会纸上电泳操作方法。4、初步掌握用纸上电泳法分离判定氨基酸。

纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第2页二、基本原理（一）纸色谱是一个分配色谱。滤纸作为载体，纸纤维上吸附水为固定相，与水不相混溶有机溶剂作为流动相。当样品点在滤纸一端，使流动相从有样品一端上行，经过毛细管作用，流向另一端时，依靠溶质在两相间分配系数不同而到达分离。极性大组分在固定相中分配得多，随流动相移动速度慢，极性小在流动相中分配得多，随流动相移动速度快一些。

纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第3页三、纸色谱试验步骤（观看录像）1、点样；2、展开；3、显色与结果处理——计算出两个物质Rf值。纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第4页

纸色谱图纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第5页（二）在一定条件下，带电质点在电场作用下，向着与其所带电荷相反电极移动，这种现象称为电泳。不一样氨基酸在同一pH值溶液中，所带电荷不一样。在同一电场中，带不一样电荷各个氨基酸泳动方向和速度不相同，所以将不一样氨基酸在同溶液中进行电泳时，因为各个氨基酸移动方向和距离都不相同，从而到达分离判定目标。纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第6页四、纸上电泳试验步骤（观看录像）1、点样与润湿；2、电泳；3、显色；4、结果处理——标明正、负极和氨基 酸。纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第7页氨基酸纸上电泳图谱纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第8页

试验注意事项：1、整个试验都不应用手直接接触滤纸（手汗中有氨基酸）；2、纸色谱点样点越小越好(点2次即可),纸上电泳点样点越小越好（可重复点4-5次）；3、点完样后，毛细管应放回原试管中，不可放错；4、电泳试验中，当全部滤纸都放入电泳槽后才能够通电；纸色谱和氨基酸的纸上电泳专家讲座第9页5、电泳结束应先关电源再把滤纸取出 （电压较高，注意安全）；

6、纸色谱中显色剂已经加入到展开剂中，不用另外喷，直接吹干即可显色；

7、纸上电

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