输血科常见试验问题的探讨

关于输血科常见试验问题的探讨

一.输血科常用的实验1．直接凝集试验：

原理：颗粒抗原（红细胞）+抗体（试剂为IgM，血清为

IgM或IgG）。方法：玻片法，试管法，微柱凝胶法（单个红细胞可通过玻璃微珠之间空隙到达底部，而凝集红细胞则不能通过而滞留于玻璃微珠表面）。特点：红细胞表面抗原数量多：数万-数十万甚至一百多万个。应用：血型鉴定，盐水交叉配血。关键：抗原抗体的比例需适当，否则结果错误。红细胞浓度1%,5%-10%。

第2页,共68页，2024年2月25日，星期天2.间接抗球蛋白试验原理：抗体首先与红细胞结合，洗涤，然后再与抗球蛋白抗体反应。方法：试管法，微柱凝胶法（配血卡，抗筛卡）。特点：可检出IgG抗体或可致敏的补体成分。应用：交叉配血，抗体筛选，抗体鉴定。关键：红细胞浓度（0.8%，2-5%），37℃孵育时

间。试管法：充分洗涤红细胞。微柱法：离

心速度和时间（1000rpm×10min），血清与

红细胞需混合后孵育。第3页,共68页，2024年2月25日，星期天3．直接抗球蛋白试验原理：抗体或补体致敏的红细胞洗涤后直接与抗球蛋白抗体反应。方法：试管法，微柱法。应用：可检出IgG抗体或补体致敏的红细胞（自身免疫病）。关键：红细胞浓度（0.8%，2-5%），试管法：充分洗涤红细胞。第4页,共68页，2024年2月25日，星期天4．抗体筛选原理：间接抗球蛋白试验。血清与试剂红细胞混合，37℃孵育，离心。方法：微柱凝胶法。应用：可检出血清中抗红细胞IgG抗体或可致敏红细胞的补体成分。关键：应用前微柱卡离心，红细胞浓度

0.8%），血清与红细胞需混合后37℃

孵育，离心速度和时间

1000rpm×10min）。第5页,共68页，2024年2月25日，星期天5．聚凝胺交叉配血试验原理：聚凝胺中和红细胞表面的负电荷缩小红细胞之间的距离，LISS增强可以抗体之间的结合力，离心产生凝集现象，加入解聚液消除聚凝胺正电荷，有IgM或IgG抗体产生的凝集不散开，非特异性凝集则散开。应用：可检出血清中IgM或尤其是IgG类抗红细胞抗体第6页,共68页，2024年2月25日，星期天关键：按标准操作程序非常重要，是快速、敏感的交叉配血方法。红细胞浓度为

5%，血清加入量，LISS加入量，离心速度和时间（3400rpm×15sec），30

秒内观察结果等等。肝素抗凝血多加几滴聚凝胺，注意新鲜血标本产生溶血现象。第7页,共68页，2024年2月25日，星期天6．吸收试验原理：红细胞表面抗原与相应抗体孵育产生结合反应。已知抗体可检测红细胞表面未知抗原，已知红细胞表面抗原可检测未知血清中的抗体。应用：血型亚型的鉴定，抗体特异性鉴定，血清自身抗体吸收后用于血型鉴定和交叉配血试验。第8页,共68页，2024年2月25日，星期天7．放散试验原理：与红细胞表面抗原结合的抗体通过热放散或乙醚放散等方法解离下来。应用：血型的鉴定，抗体特异性鉴定，得到自身抗体或无自身抗体的红细胞。第9页,共68页，2024年2月25日，星期天8．凝集抑制试验（中和试验）原理：血清、唾液、胃液、精液、腹水以及卵巢液等体液中的血型抗原与已知相应抗体特异性结合，抑制抗体与红细胞的结合反应。应用：体液或组织中ABHLewis血型物质的鉴定，司法鉴定。第10页,共68页，2024年2月25日，星期天9．新生儿溶血病的血清学试验婴儿和父母ABO血型鉴定新生儿标本检查：DAT,IAT，游离抗体（放散试验）。3.母亲标本检查：IgG抗A(B)效价，ABO以外抗体（试剂红细胞）。第11页,共68页，2024年2月25日，星期天

二.血型及血型鉴定第12页,共68页，2024年2月25日，星期天（一）ABO，Rh（D）血型抗原的分子生物学

1）H抗原和H基因：

H基因位于19号染色体上，编码岩藻糖基转移酶，催化岩藻糖与前体物质支链末端的半乳糖相连接形成H抗原。群体中99.99％有H基因（Hh或HH），而hh即为孟买型，很少见，虽然有A、B基因，但红细胞上缺乏ABO系统的全部抗原。H基因的遗传与ABO基因无关，但A，B及H抗原全部都是从相同的前身物质形成的。第13页,共68页，2024年2月25日，星期天2）A、B抗原和A、B基因：

A、B基因位于第九号染色体上(9q34.1-q34.2,跨越染色体18kb长度)。A基因编码N－乙酰胺半乳糖转移酶，使N－乙酰半乳糖胺与H抗原相连，形成A血型物质，在A型成人每个红细胞上可多达81－117万个血型A分子。B基因编码D－半乳糖转移酶，使D－半乳糖与H抗原相连，形成B血型物质，在B型成人每个红细胞上可多达61－83万个血型B分子。

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A和B基因都被遗传时（AB型），A分子大约有6万个（正定型A端可能会弱一些），B分子大约有72万个（正定型B端可能会强一些）。O型红细胞上只有高浓度的H抗原。ABH抗原在37周龄开始发育，但新生儿红细胞ABH的反应性没有成人强，位点数只有成人的25－50％，血型鉴定时应注意。第15页,共68页，2024年2月25日，星期天3）ABO血型基因及编码氨基酸示意图A、B、O基因高度同源，A基因和B基因表达产物仅有4个氨基酸差异234567（外显子编号）9a

23a17a16a12a45a225a（编码氨基酸数目）第16页,共68页，2024年2月25日，星期天4）RH(D)抗原和基因基因位于1p34-36区域，由10个外显子组成，编码417aa的多肽，跨细胞膜存在表达其抗原性。

RH血型基因：RHDd,Cc,Ee等位基因。单倍型：8种(2×2×2)；基因型：8×（8＋1）/2＝36种。表型：用五种抗血清鉴定的表型有

2（D,d）×3（C,c,Cc）×3(E,e,Ee)＝18种。第17页,共68页，2024年2月25日，星期天

5）D抗原表型的分类：正常D抗原：每个红细胞9万－33万个，200万个（D－－/D－－基因型）弱D：有正常的D抗原但数量减少

，数百个。单抗检测，直接凝集或抗球蛋白实验

Del型：只能用吸收放散试验检测出来，部分外显子缺乏导致抗原不完整。不完全D抗原：D抗原不完全，血清中有针对缺失D抗原表位的抗体。第18页,共68页，2024年2月25日，星期天（二）ABO血型系统的亚型及变异型

1）A1和A2亚型

两种A抗原：A1和A2亚型构成了全部A型血液的99.99％。两种红细胞均与抗A试剂发生强凝集反应。B型血血清含两种抗体（抗-A，抗-A1）。1－2％A2型人和22－26％A2B型人血清含抗A1。系A基因第三外显子单一碱基突变造成酶活性改变。

区别：

抗A1试剂与A1红细胞凝集，不与A2红细胞凝集，大约80％A型或AB型红细胞与抗A1（双花扁豆植物血凝素）凝集，分类为A1或A1B型；其余20％红细胞为抗A凝集，但不为抗A1凝集，称为A2或A2B型。第19页,共68页，2024年2月25日，星期天意义：

在常规输血实验中，除非A2或A2B型人的血清含有抗A1抗体，患者与献血员间的A1或A2不需加以区别。抗A1抗体在A2型人为1－2％，A2B型人为22－26％。在37℃有反应的抗A1才有临床意义，可造成正反定型不符，交叉配合不相合。第20页,共68页，2024年2月25日，星期天

2）弱A亚型弱A亚型的血清学和转移酶特点：名称细胞反应血清中抗体分泌型唾液中的抗原血清中的A转移酶抗－A抗－AB抗－A抗－A1A3mfmf无有时AH有时Aendmfmf无有时H无Ax-/w＋+/—通常有H很少Am-/w+/—无无AH有Ay——无无AH痕量Ael——一些有H无

注：红细胞均与抗H反应；抗A1可被上述红细胞吸收放散下来；mf：混合外观；w：非常弱的凝集。主要原因是A转移酶分子某个氨基酸的变异使其功能受到不同程度的影响所致。第21页,共68页，2024年2月25日，星期天

3）弱B亚型弱B亚型的血清学和转移酶特点：名称细胞反应血清中抗体分泌型唾液中的抗原血清中的B转移酶

抗－B抗－AB抗H抗－BB3mfmf＋无BH有Bxww＋有BH无Bm－/w－/w＋无BH有Bel－－＋有时H无

注：红细胞均与抗H反应；抗B可被上述红细胞吸收放散下来；mf：混合外观；w：非常弱的凝集。主要原因是B转移酶分子某个氨基酸的变异使其功能受到不同程度的影响所致。第22页,共68页，2024年2月25日，星期天4）Cis-AB型：父亲（母亲）AB型＋母亲（父亲）O型，孩子为AB型及O型原理：染色体基因交换或基因变异

5）嵌合体：双卵双生儿和双精子嵌合体中，存在两个血型的杂合型，也可以有其它如HLA等的杂合体。第23页,共68页，2024年2月25日，星期天

6）孟买型和类孟买型：

红细胞是O型，但是H抗原阴性，血清中都有抗－H。缺乏形成H抗原的糖基转移酶，虽然有A或B基因以及A、B的糖基转移酶，但不能形成A或B抗原。红细胞不能被抗－A、抗－B、抗－AB或抗－H所凝集。由于血清中有抗－H，给临床输血带来了极大困难。一般多输注同型血或采用自身输血。

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7）获得性B抗原：

细菌的脱乙酰基酶使N－乙酰半乳糖胺转变为半乳糖，后者与血型B抗原的决定簇很相似。

8）血清中的AB和H物质：

含量增高见于胃癌、假性粘液性卵巢囊肿患者。可中和输入血液中的少量抗－A和抗－B（O型血液）。第25页,共68页，2024年2月25日，星期天9）HAB分泌型和非分泌型：唾液中有AB物质为分泌型，反之为非分泌型。我国占73－85％。受Se和se等位基因控制。唾液中检测ABO血型物质对血型鉴定有重要意义。

10)白血病引起A、B和H抗原减弱：弱A最多见。血型一经正确鉴定应输注同型血。

11)新生儿血型：用正定鉴定血型。出生时血清中一般无IgM抗体，反定型阴性。其血清中有来自母亲的IgG抗体。

12)B(A)型和A(B)型

B型红细胞上存在A抗原，A型红细胞上存在B抗原。基因中1－2个碱基突变，称为A型和B型糖基转移酶的叠盖功能。

第26页,共68页，2024年2月25日，星期天（三）抗ABH和抗D抗体1）抗－A和抗－B：

抗体可以是IgM、IgG或IgA。大约1/12000成人缺少抗－A或抗－B。新生儿抗体通常是IgG，且大多缺乏。血清中主要是IgM、IgG。唾液、乳汁、泪液、宫颈分泌液和膀胱内容物主要是IgA。IgG抗-A，B，M，N在盐水中直接凝集红细胞。2）抗－A1抗体：

在临床上意义不大，多数在25℃以上没有活性。也有抗－A1引起溶血性输血反应的报道。3）ABO自身抗体：

较少，材料统计6/4668人具有ABO自身抗体可导致自身溶血性贫血或致命的溶血和肾衰。第27页,共68页，2024年2月25日，星期天4）抗H：

孟买血清中的抗－H抗体，可造成严重的HDN；O型红细胞输入Oh病人体内，仅2％的红细胞生存24小时；A1红细胞输入Ah病人体内，67％于1小时内破坏。5）母亲血清的ABO抗体：

可引起新生儿溶血病（HDN）。通常发生在O型母亲的A1、B或A1B型的孩子。15％的孕妇是A或B型的孩子，少量红细胞轻微破坏的症状可能较为常见，但临床上涉及HDN的非常少：红细胞上A和B抗原的密度相对较低；血浆中有可溶性的A或B物质可以中和部分母体来源的抗体；胎儿血浆中缺乏补体；因为IgG溶解红细胞需要补体的参与等。

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各血型系中，以A、B抗原性最强，Rh（D）抗原次之，当受者接受了所缺少的A、B抗原后，几乎每个人都会产生特异性同种抗体。大约有2/3的Rh(D)阴性的人，接受Rh(D)阳性血液后可产生抗D抗体。经一次妊娠Rh（+）的胎儿后，大约7%的Rh（-）妇女在6个月内血清学试验可测到抗D。这些抗体是造成溶血性输血反应的主要原因。如对血型定型结果有疑问，必须在输血前妥善解决，否则在输血时很难选到相合的血液。第29页,共68页，2024年2月25日，星期天（三）血型鉴定

1）.患者的病史和标本病史资料和信息

检查前应尽可能了解，核对病人的有关资料，包括病人的姓名，年龄，性别，种族，临床诊断，输血史，药物史，妊娠史。标本的要求标本必须有正确的标签，符合患者血液的体内状态，能代表患者当前的免疫学情况，并且要防止血样的稀释和溶血的产生，溶血的标本一般不能使用。第30页,共68页，2024年2月25日，星期天

因为血清中的游离血红蛋白可以掩盖在输血前试验中抗体反应引起的溶血。如果标本标签上的内容与血液申请单上的内容不一致或对病人身份确认有疑问的话，必须重抽一份新的血液标本，任何人不得对错误的标签进行修改。血清或血浆均可用作检查，但使用血浆标本时，应注意排除纤维蛋白原的干扰。因为血浆中有时有少许纤维蛋白凝块，容易导致凝集结果的判读困难。第31页,共68页，2024年2月25日，星期天

前三个月内病人输过血或已经妊娠，则配血试验使用的标本不得在这次输血的48小时前抽取，避免因回忆反应而产生的抗体漏检。新近的输血或妊娠可以引起意外抗体的迅速出现，如果对病人的输血史或妊娠史不明，使用的样本必须是输血前48小时内抽取的。病人在使用右旋糖酐等药物治疗前抽取病人血液标本备，以防止红细胞缗钱状凝集对试验结果的干扰。输血后所有的标本均应妥善保存于2~8℃冰箱中，至少一周。第32页,共68页，2024年2月25日，星期天2）血型鉴定的方法

直接凝集试验高效价IgM抗－A，抗－B。抗-D。方法：玻片法，试管法，卡式法，室温避免冷抗体一般可得较准确的结果。第33页,共68页，2024年2月25日，星期天3）血型鉴定错误的原因

技术和管理方面的原因：（1）标本或试剂搞错，造成假阳性或假阴性结果。（2）器材不洁产生假阳性结果。（3）试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果。（4）离心过度或不足，产生假阳性或假阴性结果。（5）阳性反应产生溶血现象未能识别，导致假阴性结果。（6）漏加试剂，产生假阴性结果。（7）结果记录或判断错误，产生假阳性或假阴性结果。（8）细胞与血清比例不适当，产生假阳性或假阴性结果。第34页,共68页，2024年2月25日，星期天血清异常华通氏胶或血清蛋白异常引起串钱状形成，影响反定型结果。红细胞致敏在含高蛋白介质的试剂中可发生凝集，产生假阳性结果。异常基因型

ABO亚型的弱抗原难以检出，产生假阴性结果。近期输血曾异型输血，使病人血液标本成为不同型别的红细胞混合物，定型时显示“混合外观凝集”现象。第35页,共68页，2024年2月25日，星期天

嵌合体血型体内有两群红细胞，定型时显示“混合外观

凝集”现象。疾病因素导致抗原减弱某些白血病病人ABO血型抗原可受到

抑制，检出困难。红细胞多凝集现象红细胞因遗传或获得性的表面抗原异常，

发生多凝集现象。获得性类B

由于革兰氏阴性杆菌的作用，红细胞可获得“类B”的活性。近期内进行大量的血浆置换治疗影响抗体效价，造成反定

型困难。第36页,共68页，2024年2月25日，星期天

不规则抗体的存在受检者血浆中，含有ABO血型抗体以外

的不规则抗体，与试剂A、B细胞上的相应抗原起反应。低丙种球蛋白血症低丙种球蛋白血症病例，可能会因免疫

球蛋白水平全面下降使血清定型时不见凝集或仅见弱凝

集反应。药物等因素药物、右旋糖酐及静脉注射某些造影剂可引起

红细胞聚集而类似凝集。年龄因素在未产生自己抗体的婴儿、由母亲被动获得抗体

的婴儿，或抗体水平下降的老人，试验时可出现异常结果。第37页,共68页，2024年2月25日，星期天

A亚型B亚型的鉴定：除试剂抗血清外，可用多份人源血清鉴定被检红细胞,吸收放散试验,分子生物学，唾液A或B或H物质检测(凝集抑制试验)。

弱凝集：用凝聚胺法增加敏感性

过量血型特异性物质：血球洗涤2－3次。

自身免疫性疾病：正定用EDTA抗凝血，反定用洗涤EDTA抗凝血球吸收的自身血清。

低丙种球蛋白：用增强敏感性的方法如凝聚胺法，酶

法。

年龄：新生儿，＜1岁，＞60岁第38页,共68页，2024年2月25日，星期天

正反定型不一致应考虑如下因素：生理盐水洗涤红血球了吗？红细胞新鲜否？是用较敏感的试管法，卡式法吗？年龄：＜1岁，＞60岁低丙球？高蛋白血症？其他疾病？自身免疫病？孕妇（孕期血清有抗A或抗B反应）？输过血（混合外观）？第39页,共68页，2024年2月25日，星期天

Rh定型和定型试验中应注意的问题

Rh定型主要鉴定D抗原，定型时应按抗D血清试剂的使用说明进行，并注意设立对照试验系统。对献血者需检查和确定弱反应性的D抗原。受血者无需鉴定弱D。只有病人有抗D以外的抗体时才有必要确定献血者Rh（D）以外的抗原，选择抗体对应的阴性抗原血液和病人配血，可避免溶血性输血反应的发生。第40页,共68页，2024年2月25日，星期天导致Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因：（1）受检细胞已被免疫球蛋白致敏，或标本血清中含有引起红细胞凝集的因子。（2）受检细胞与抗血清孵育时间过长，含高蛋白的定型试剂会引起细胞串钱状形成。（3）定型血清中含有事先未被检测的其它特异性抗体，造成假阳性定型结果。（多见于人源抗D）（4）多凝集细胞造成定型的假阳性。（多见于人源抗D）（5）检定用器材或抗血清被污染，造成假阳性

洗涤红细胞，自身对照第41页,共68页，2024年2月25日，星期天导致Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因：（1）受检细胞悬液浓度太高，与抗血清比例失调。（2）漏加或错加定型血清。（3）离心后重悬细胞扣时，摇动用力时度，摇散微弱的凝（4）抗血清保存不当，导致失效。第42页,共68页，2024年2月25日，星期天

4）

不规则抗体筛选所谓不规则抗体是指抗A、抗B以外的血型抗体。大约有0.3%~2%的群体血清中含有同种抗体。对外来红细胞抗原的免疫可能由妊娠、输血或故意注射免疫物质而引起。抗体筛选试验的原则是用受检的血清与特殊的试剂红细在不同的介质中起反应，以发现在37℃中有反应活性的抗体。目的是发现有临床意义的不规则抗体。第43页,共68页，2024年2月25日，星期天

方法常使的试验方法有盐水介质试验法、低离子强度介质法（LISS）、酶技术、抗球蛋白试验、Polybrene及其改良法、微柱凝胶技术等等，可按抗体的血清学行为和试验的具体条件选择，但必须做抗球蛋白试验确证。第44页,共68页，2024年2月25日，星期天

筛选细胞的组成

通常是以2~3个单人份的O型红细胞组成一套筛选细胞试剂，包括以下常见的抗原：

D,C,E,c,e,M,N,S,s,P,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb

抗体鉴定

抗体筛选试验阳性，应作抗体鉴定试验，以确定其特异性。筛选细胞浓度（4％？0.8％？）和质量第45页,共68页，2024年2月25日，星期天三、交叉配血交叉配血试验也称配合性试验，实际上是检查不配合性，使病人和献血者血液之间没有可测到的不相配合的抗原、抗体成份。

第46页,共68页，2024年2月25日，星期天1.交叉配血的主要作用

（1）大多数情况下能证实献血者的红细胞与病人的ABO血型是配合的。（2）能检查出存在于病人血清中的针对献血者红细胞的大多数抗体。（3）有无工作上的差错事故（如认错病人，拿错血袋等）。第47页,共68页，2024年2月25日，星期天

2.交叉配血不能解决的问题：（1）保证输入的红细胞有正常存活率。（2）防止病人的免疫作用。（3）从病人的血清中检出所有红细胞抗体。（4）防止由于针对献血者抗原而发生的记忆性抗体应答引起的迟延性溶血性反应。病人以前就有此种抗体但未能查出这种免疫作用。(5）检查出献血者或病人中所有的ABO血型错误。(6）检查出献血者或病人中所有的Rh血型错误。(7)检出对红细胞以外的抗体（如血小板、白细胞、血清蛋白抗体等）。第48页,共68页，2024年2月25日，星期天3.配血试验的内容包括（1）病人血清对供者红细胞检测对供者红细胞起反应的抗体，一般称为“主侧”配血。（2）病人红细胞对供者血清检测对受者红细胞起反应的抗体，一般称为“次侧”配血。

（3）病人血清对病人红细胞称为“自身对照”试验。目的是显示或排除自身抗体，直接抗球蛋白试验阳性及红细胞串钱状假阳性的存在第49页,共68页，2024年2月25日，星期天

4.常用的配血方法酶技术配血方法凝聚胺（Polybrene）交叉配血法抗球蛋白配血法微柱凝胶法第50页,共68页，2024年2月25日，星期天5.配血试验中可能出现的一些特殊问题

1）缗钱状（串钱状）的形成常见于多发性骨髓瘤，巨球蛋白血，以及其它表现为血沉加速的一些病例中。缗钱状凝集现象，也称串钱状凝集。这是在盐水介质的凝集试验中，常见到的一种假凝集，特点是：①在显微镜下红细胞膜完整，细胞间界限清晰地成缗钱串聚集。②缗钱状假凝集反应不受温度影响，室温与37℃结果一样。③抗人球蛋白试验阴性第51页,共68页，2024年2月25日，星期天

多种原因可以引起红细胞缗钱状凝集，常见原因：

►某些疾病致血浆球蛋白异常时，如高球蛋白血症、巨球蛋白血症时会出现缗钱状凝集；►病人在使用大分子右旋糖酐和羟乙基淀粉溶液作血容量扩张剂时，也可以产生缗钱状凝集；►用玻片法试验时，如温度过高、时间过长，也容易发生这种假凝集，因为玻片接触面大，液体的蒸发面也大，致使血清容易浓缩。第52页,共68页，2024年2月25日，星期天缗钱状凝集的处理

►实验中遇到缗钱状凝集时，可将血清适当稀释后进行实验。

►在显微镜下观察到缗钱状凝集时，加1滴生理盐水到反应物并混匀，通常可以消除这种假凝集。

►做试管法实验时如发现缗钱状凝集，可将试管离心，倾去上清液，沥干，再加2滴生理盐水重悬，假凝集会消失，真凝集不会消失，严重的可重复一次。缗钱状形成不影响间接抗球蛋白试验。第53页,共68页，2024年2月25日，星期天

2）交叉配血试验结果不相容，显示有未检明的同种抗体存在。

2）在抗球蛋白试验中显示有自身抗体存在。

3）存在抗体筛选试验阴性但交叉配血结果阳性现象，提示可能有未检明的稀有抗体存在。4）配血试验中,离心力不当，选成了假阴性或假阳性。

5）水浴箱温度不正确，造成错误结果。

6）红细胞不正确洗涤和悬浮，使抗球蛋白试验出现假阴性。

7）血清中如含有溶血性抗体，则相应红细胞被溶解而不是凝集，交叉配血结果应视为阳性反应（先灭火补体）。

第54页,共68页，2024年2月25日，星期天

红细胞：

EDTA或枸橼酸抗凝，NS洗涤三次，配制成2－5％NS悬液；红细胞浓度太高产生假阴性；凝集胺配血主管无凝集，但病人出现高热，发生溶血。血清：干燥管凝血，离心分离血清(或血浆)第55页,共68页，2024年2月25日，星期天如凝集不散，则作如下处理：

►

37℃温育排除冷凝聚

►凝聚红细胞用NS洗涤一次排除蛋白质等促凝因素►

►病人血清＋试剂红细胞排除血型不规则抗体（抗体筛选）►病人、献血者血型重新正反定型►献血者红细胞有无自身凝聚►排除献血者红细胞直抗阳性第56页,共68页，2024年2月25日，星期天交叉配血主侧不合主侧不合+抗筛阴性+自身对照阴性：

ABO血型不正确（复查血型），患者血清可能含有一种ABO抗体（亚型鉴定），筛选细胞上无相应抗原（寻找相合血液），供者DAT阳性（更换供者）。

主侧不合+抗筛阳性+自身对照阴性：抗原抗体反应（抗体鉴定，寻找相合血液）主侧不合+抗筛阳性+自身对照阳性：患者存在自身抗体（自身吸收做平行试验），或者异体抗体（抗体鉴定，寻找相合血液），血清异常（缗钱状凝集，A/G比例，应用药物）

第57页,共68页，2024年2月25日，星期天A2B亚型：正定AB型，反定B型，血清中含抗-A1，洗涤O型红细胞；AxB型：正定为B型，反定为AB型，间抗为阴性，输入AB型或O型洗涤红细胞，无反应；AB3亚型：有不规则抗-B，输入O型红细胞；血型正反定型不符：以正定为主输入同型血液或输入O型红细胞。2008年汶川地震：2-6单位急救手术输入O型红细胞。第58页,共68页，2024年2月25日，星期天MDS血型抗原减弱：B型变为O型，输入洗涤

O型红细胞；MDS正定A型，反定O型：输入洗涤O型红细胞

2U，无不良反应；白血病患者：

A或B抗原减弱。吸收放散试验鉴定次侧凝集：报道输入洗涤同型或O型红细胞均无反应。第59页,共68页，2024年2月25日，星期天自身抗C