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文档简介
化学分析一、水质的分析检验
物理指标、化学指标、微生物指标二、碳水化合物的分析检验三、含氮化合物的分析检验四、酸的分析检验五、其他成分的分析检验水质的分析检验水质分析检验在国民经济各个领域肩负着重要的使命,在日趋繁重的水环境污染治理监测工作中起着“眼睛”和“哨兵”的作用,包括水环境评价及废水综合利用等都必须以水质分析结果为依据,才能做出科学准确的判断和评价。指标:物理指标、化学指标、微生物指标一、物理指标检测主要检测指标:色度、臭和味、悬浮物和浑浊度(一)色度
色度—是指含在水中的溶解性的物质或胶状物质所呈现的类黄色乃至黄褐色的程度。分为“真色”和“假色”。
真色---溶液状态的物质所呈现的颜色
假色---由悬浮物产生的颜色色度的标准单位:度
主要检测方法:铂钴标准比色法通常用于检测清洁的天然水,操作简单,色度稳定,标准色列如保存适宜可长期使用。但其中氯铂酸钾太贵,大量使用不经济铬钴标准比色法试剂便宜易得,精密度和准确度与铂钴标准比色法相同,只是标准色列保存的时间段1、铂钴标准比色法测定范围:5—50度,即使轻微的浑浊度也干扰测定。原理:用氯铂酸钾和氯化钴配成与天然水黄色色调相同的标准比色列,用于水样目视测定。规定每升水1mg铂和0.5mg钴所具有的颜色作为一个色度单位,称为1度。试剂铂钴标准溶液:称取1.246g氯铂酸钾和1.000g氯化钴,溶于100ml纯水中,加入100ml盐酸,用纯水定容至1000ml,此标准溶液的色度为500度。仪器和设备
150ml成套高型具塞比色管、离心机分析步骤:(1)取50ml透明水样于比色管中。如水样浑浊应先进行离心,取上清液测定。如水样色度过高,可少取水样,加纯水稀释后比色,将结果乘以稀释倍数。(2)另取比色管11支,分别加入铂钴标准溶液0、0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml…4.50ml和5.00ml,加纯水至刻度,摇匀。配制成0-50度的间隔5度的标准色列,此标准色列可长期使用,但应防止此溶液蒸发及被玷污。(3)在光线充足处,将水样与标准色列并列,以白纸为衬底,使光线从底部向上透过比色管,自管口向下垂直观察比色。(4)记录相当标准管色度的度数。计算:C=(m/v)*500C-水样的色度;m-铂钴标准溶液的用量,ml;v–水样的体积,ml2、铬钴标准比色法测定范围:5-50度方法:用重铬酸钾与硫酸钴配成与天然水黄色色调相近的标准色列,用于水样目视比色定量,色度单位与铂钴法相同。试剂:铬钴标准溶液(色度为500度)。称取0.0437g重铬酸钾和1.00g干燥的硫酸钴,溶于少量的纯水中,加入0.50ml硫酸,搅匀,用纯水定容至500ml。仪器、设备:50ml成套高型具塞比色管、离心机分析步骤:处理水样→标准溶液制备→样品比对计算同铂钴比色法值得注意的问题:
①若水样经稀释后与标准色列目视比色,则所测色度需乘上其稀释倍数方为原水样的色度。
②以上两种方法因所配制的标准色列为黄色,因此只适用于较清洁且具有黄色色调的饮用水和天然水的测定。
若水样为其它颜色,无法与标准色列进行比较,则可用适当的文字描述其颜色和色度,如淡蓝色、深褐色等等。
(二)臭和味
1、原水样的臭和味测定范围:适用于原水样的臭和味的测定分析步骤:气味:取100ml水样,置于250ml锥形瓶中,振摇后从瓶口嗅水的气味,用适当的词句描述,并按六级记录其强度。
味道:与此同时,取少量水放入口中,不要咽下去,尝尝水的味道,加以描述,并按六级记录强度。2、原水煮沸后的臭和味测定范围:适用于原水煮沸后的臭和味测定分析步骤:将上述锥形瓶内水样加热至开始煮沸,立即取下锥形瓶,稍冷后按上述嗅味和尝味,用适当的词句加以描述,并按六级记录其强度等级强度说明0无
无任何臭味1微弱一般饮用者甚难察觉,但嗅觉、味觉敏感者可以发觉2弱一般饮用者刚能察觉3明显已能明显察觉4强已有很显著的臭味5很强有强烈的恶臭和异味(三)悬浮物水质中的悬浮物是指水样通过孔径为0.45μm的滤膜,截留在滤膜上并于103-105℃烘干至恒重的物质。(1)试剂蒸馏水或同等纯度的水(2)仪器
全玻璃微孔滤膜过滤器GN-CA滤膜,孔径0.45μm、直径60mm吸滤瓶、真空泵无齿扁嘴镊子分析步骤(1)采样所用聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶要用洗涤剂洗净,再依次用自来水和蒸馏水冲洗干净,在采样之前,再用即将采集的水样清洗三次,然后采集具有代表性的水样500-1000ml,盖严瓶塞。(2)滤膜准备用扁嘴无齿镊子夹取微孔滤膜放于事先恒重的称量瓶中,移入烘箱中于103-105℃烘干0.5h后取出置干燥器内冷却至室温,称其质量。反复操作直至恒重。将恒重的滤膜正确放在滤膜过滤器的滤膜托盘上,加盖配套的漏斗,并用夹子固定好。用蒸馏水湿润滤膜,并不断吸滤。(3)测定量取充分混合均匀的试样100ml,抽吸过滤,使水分全部通过滤膜,再以每次10ml蒸馏水连续洗涤三次,继续吸滤以除去痕量水分。停止吸滤后,仔细取出载有悬浮物的滤膜放在恒重的称量瓶中,烘干,冷去至室温,称量至恒重。注意滤膜上截留过多的悬浮物可能夹带过多的水分,除延长干燥时间外,还可能造成过滤困难,遇此情况可酌情少取试样。滤膜上悬浮物过少,则会增大称量误差,影响测定精度,必要时,可以增大试样体积。一般以5-100mg悬浮物量作为量取试样体积的实用范围。结果计算悬浮物含量ρ(mg/L)如下:ρ=(A-B)×106/V式中A-悬浮物+滤膜+称量瓶的质量,gB-滤膜+称量瓶的质量,gV-试样的体积,mL(四)浑浊度浑浊度是反应天然水物理性状的一项指标,用以表示水的清澈或浑浊情况,是衡量水良好程度的重要指标之一。(1)原理在适当温度下,硫酸肼与六亚甲基四胺聚合形成白色高分子聚合物,以此作为浊度标准液,在一定条件下与水样浊度相比较。(2)试剂无浊度水将蒸馏水通过0.2nm滤膜过滤,收集于用滤过水荡洗两次的烧瓶中浊度水按书上方法配制(3)仪器具塞比色管、分光光度计(4)操作步骤绘制标准曲线测定(5)结果计算浊度=A×(B+C)/C式中A-稀释后水样的浊度B-稀释水的体积C-原水样体积二、化学指标检测1、pH2、溶解性总固体3、总硬度
4、碱度
5、酸度
6、钾和钠7、钙
8、镁
9、氯化物
10、氨氮的测定1、pH测定
pH是水分析中的最重要的和最经常进行的分析项目之一,是评价水质的重要参数。水受到污染时可能会引起pH发生较大的变化。测定方法:电位计法、目视比色法原理:pH由测定电池的电动势而得。该电池通常由饱和甘汞电极为参比电极,玻璃电极为指示电极所组成。在25℃,溶液中每变化1个pH单位,电位差改变为59.16mV,据此在仪器上直接以pH的读数表示。温度差异在仪器上有补偿装置。标准缓冲溶液l.pH标准溶液甲(pH=4.00,20℃)
称取先在105℃干燥2h的邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)10.21g溶于水并稀释定容至1000mL。
2.pH标准溶液乙(pH=6.88,20℃)
分别称取先在105℃干燥2h的磷酸二氢钾(KH2PO4)3.40g和磷酸氢二钠(Na2HPO4)3.55g溶于水并稀释定容至1000mL。
3.pH标准溶液丙(pH=9.22,20℃)
称取四硼酸钠(Na2B4O7·10H20)3.81g溶于水并在容量瓶中稀释至l000mL。以上三种缓冲液的pH随温度不同而稍有差异。pH计的矫正温度的矫正:测定待测样温度调整pH计温度设置pH的矫正
一点定位法:选取与被测试液pH相近的缓冲溶液为标准
两点定位法第一点定位:用pH=6.86缓冲溶液第二点定位:水样pH<7用pH=4.0定量第二点pH>7用pH=9.18重新定量第二点
样品测定
液位要求
待测溶液的最低液位应该高于甘汞电极处(红色箭头)待测溶液塑料保护罩玻璃电极甘汞电极补充溶液孔复合电极最低液面实验中的注意事项电磁搅拌子应该先行放入;搅动稳定后再放入电极,以免电极被砸破实验完毕先提起电极再关电磁搅拌器实验结束,将电极洗净电极的清洗以滤纸或面纸吸干沾湿勿用力擦拭玻璃薄膜注意事项复合电极在第一次使用前,应在纯水或3M氯化钾溶液中浸泡24小时以上活化。复合电极和测温探头避免用力弯曲及与烧杯等器皿碰撞,特别是复合电极顶部的玻璃探头部分不能与任何硬物接触。在操作中,要保持复合电极插孔和复合电极插头的清洁与干燥,不得用手触摸。取下复合电极时,须将洁净、干燥的短路插头插入电极插孔,以免灰尘、湿气等进入。pH电极存放的原则是使保存液与填充液相同:不使用时,应将复合电极的玻璃探头部分套在盛有3M氯化钾溶液的塑料套内;pH=7或4的缓冲液可用作短时间保存
。测定pH时,为减少空气和水样中二氧化碳的溶入或挥发,在测水样之前,不应提前打开水样瓶。玻璃电极表面受到污染时的处理措施:
a、油和脂肪用表面活性剂清洗、甲醇或丙酮清洗。
b、硫化物沉淀、钙沉淀物或金属氢氧化物可用10%的稀盐酸清洗。
c、蛋白质附着物可用10%的稀盐酸和胃蛋白酶的混合物清洗。
挥发性固体
挥发性溶解固体
挥发性悬浮固体
固定性溶解固体固定性悬浮固体
固定性固体
溶解固体悬浮固体问题:如何区分溶解性固体与悬浮性固体?水中固体的分类=总固体2、溶解性总固体测定水中固体测定的环境意义:①若环境水体中的悬浮固体含量过高,不仅影响景观,还会造成淤积,同时也是水体受到污染的一个标志。②溶解性固体含量过高不利于水的功能的发挥。如溶解性的矿物质过高,既不适于饮用,也不适于灌溉,有些工业用水(如纺织、印染等)也不能使用含盐量高的水。③在废水处理过程中,固体,尤其是悬浮固体和可沉固体的测定是重要的设计参数。溶解性总固体是水中溶解的无机矿物成分的总量。水样经0.45μm滤膜过滤除去悬浮物,取一定体积滤液蒸干,在105℃干燥至恒重,可测得蒸发残渣含量。将溶解性固体含量加上碳酸氢盐含量的一半(碳酸氢盐在干燥时分解失去二氧化碳而转化为碳酸盐)。分析步骤:(1)烘干105℃,1h反复干燥、冷却、称重至恒重(连续两次的称量差值小于0.0005g)(2)样品蒸干适量样品于水浴上蒸干(3)样品烘干105℃,1h反复干燥、冷却、称重至恒重结果计算:溶解性总固体=(m1+m2)×106/V+1/2ρ(HCO3-)式中
m2——蒸发皿质量
m1——蒸发皿和溶解性固体质量
V——水样体积ρ(HCO3-)——碳酸氢盐的质量浓度3、总硬度(Hardness)造成硬度的阳离子:Ca2+、Mg2+、Sr2+、Fe2+、Mn2+等易形成水垢的阴离子:HCO3-、SO42-、Cl-、NO-和SiO3-等
水的硬度最初被用来度量水沉淀肥皂的容量。水的硬度是由多价金属阳离子造成的,这些离子能与肥皂生成沉淀,并与部分阴离子形成水垢。Ca和Mg在地球上是丰度排名第五和第八位的元素,水的硬度绝大部分是由Ca和Mg造成的。EDTA滴定法
在pH为10的条件下,用乙二胺四乙酸(EDTA)或其钠盐作为滴定剂,以铬黑T(EBT)作为指示剂与水样进行反应,根据所消耗的EDTA的量,可求得水样的总硬度。
在反应开始时,先加入铬黑T指示剂,其与水中的Ca2+、Mg2+生成酒红色络合物,随着滴定剂的加入,EDTA先与水中游离的Ca2+、Mg2+生成无色络合物,再与和铬黑T络合的Ca2+、Mg2+反应,从而将铬黑T释放出来。随着反应的进行,溶液的酒红色逐渐变淡,到反应终点时,突变为铬黑T的亮蓝色。主要仪器:锥形瓶(250mL)、移液管(25mL)、容量瓶(250mL)、酸式滴定管。上一页下一页二、仪器与试剂试剂:EDTA标准溶液(0.01mol/L)、氨性缓冲溶液(pH=10)、三乙醇胺溶液(1∶1)、0.5%铬黑T指示剂。
1、移取水样用移液管移取水样50mL于250mL锥形瓶中,加氨性缓冲溶液5毫升、铬黑T指示剂2~4滴。上一页三、操作步骤用EDTA标准溶液滴定至由紫红色变为蓝色(如图7-18),即为终点。平行测定1~3次。2.滴定四、结果计算要点提示:1.滴定硬度较大的水样时,在加缓冲溶液后常析出CaCO3沉淀,使终点拖长,变色不敏锐,这时可在水样中加1~2滴1∶1HCl,煮沸溶液以除去CO2,但HCl不宜多加,否则影响滴定时溶液的pH值。2.移液管、滴定管用前要用所取的溶液润洗。3.EDTA标准溶液要用酸式滴定管盛装。X=100.8×VM/V1×1000V——滴定时EDTA标准溶液消耗体积M——EDTA标准溶液浓度V1——水样体积100.08——碳酸钙摩尔质量4、碱度碱度——是指水中能与强酸发生中和作用的全部物质的总和,亦即能接受质子(H+)的物质总量。水体中构成碱度的物质可以归纳为三类:①强碱;②弱碱;③强碱弱酸盐。碱度的测定(酸碱滴定法)若用甲基橙作指示剂(变色范围:pH3.1~4.4)pH>4.4pH≈3.9(反应:①②③总碱度/甲基橙碱度)若用酚酞作指示剂(变色范围:pH8.0~10.0)pH>10.0pH≈8.3(反应:①②酚酞碱度)小结:使用不同的指示剂,碱度不同,甲基橙碱度>酚酞碱度试剂配置a、配置量取4.2mL盐酸,溶于纯水中,并稀释至1000mL。
b、标定称取0.1g~0.2g于250℃干燥至恒重的碳酸钠(基准试剂)于250mL锥形瓶中,加50mL纯水溶解,加4滴甲基橙指示剂,用配制的盐酸溶液滴定至溶液由黄色突变为橙色。同时做空白试验。
c、计算
c(HCl)=
m(V-V0)×0.05299分析步骤
吸取50.00mL水样于250mL锥形瓶中,加4滴甲基橙指示剂(0.5g/L),用盐酸标准溶液滴定至试液由黄色突变为橙色。计算
水样总碱度=c(HCl)×0.05004×V1×106/V
0.05004——与1.00mL氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)=1.000mol/L]相当的以克表示的总碱度(NaCO3)的质量V1——滴定水样消耗标准盐酸溶液的体积
V——所取水样的体积5、酸度酸度——指水中能与强碱发生中和作用的全部物质,亦即放出质子(H+)或经水解能产生H+的物质总量。水体中构成酸度的物质可以归纳为三类:①强酸、②弱酸、③强酸弱碱盐。酸度的测定(酸碱滴定法)若用甲基橙作指示剂(变色范围:pH3.1~4.4)pH<3.1pH≈3.9(反应:①若用酚酞作指示剂(变色范围:pH8.0~10.0)(反应:①②小结:使用不同的指示剂,酸度不同,酚酞酸度>甲基橙酸度无机酸度/甲基橙酸度)CO2酸度/酚酞酸度)pH<8.0pH≈9.0注意事项(1)水样取用体积参考滴定时所消耗氢氧化钠标准溶液用量,在10~25mL之间为宜。(2)采集的样品用聚乙烯瓶或硅酸玻璃瓶贮存,并要使水样充满不留空间,紧盖瓶盖。避免二氧化碳的影响。要避免或减少微生物活动产生的二氧化碳。6、钾和钠
原理:在高温火焰中,钾和钠很易电离,在火焰中具有较高的发射强度,且在一定范围内其发射强度与浓度成正比。可分别用766.5nm和589.0nm灵敏共振线进行测定,与标准系列比较定量。
仪器设备:原子吸收分光光度计:仪器操作参数可参照厂家说明书进行选择。
钾和钠空心阴极灯:灵敏吸收线为钾766.5nm,钠589.0nm;次灵敏吸收线为钾404.4nm,钠330.2nm。
乙炔的供气装置:使用乙炔钢瓶或发生器均可,但乙炔气必须经水和浓硫酸洗涤后,方可使用。空气压缩机:均应附有过滤装置,由此得到无油无水净化空气。
对玻璃器皿的要求:所用玻璃器皿均应经硝酸溶液(3.2)浸泡,用时以去离子水洗净。分析步骤(1)样品测定a、按仪器说明将发射部分调节至最佳状态。波长:钾766.5nm;钠589.0nm。火焰:贫燃性。测量高度:2cm。b、将水样直接喷入火焰,测定其钾、钠发射强度。(2)标准曲线的绘制a、精确吸取钾、钠混合标准溶液0~50mL,用纯水稀释至1L,配制为每升含钾0~5.0mg,含钠0~50.0mg的标准系列。应根据水样钾、钠含量高低选择适当的标准浓度范围。b、按水样分析步骤同时测定其发射强度。c、以标准浓度为横坐标,发射强度为纵坐标绘制校准曲线。7、钙原理:在碱性溶液中(pH=12)钙离子与钙试剂生成红色的配合物,其不稳定常数大于钙与EDTA-2Na配合物的不稳定常数,在此溶液中滴加EDTA-2Na溶液,就会将络合的钙试剂取代出来,滴定到终点时,呈现出游离指示剂的纯蓝色。
水样碱度大时,须加入盐酸,经煮沸后再进行测定,否则因加入氢氧化钠溶液而生成碳酸钙的沉淀,使结果偏低。分析步骤(1)吸取50mL水样,放入刚果红试纸(刚果红是酸性指示剂,变色范围为3.5到5.2,碱态为红色,酸态为蓝紫色)一小块,加入盐酸溶液酸化,直到试纸变成蓝紫色。(2)将溶液煮沸2~3min,冷却后,加2mL氢氧化钠溶液,(3)加入钙试剂20~40mg,以EDTA-2Na标准溶液滴定至红色变至纯蓝色为止,同时做空白试验,记下用量。计算水样中钙的质量浓度=(V1-V2)c×0.04008×106VV1——滴定中所消耗EDTA-2Na溶液体积V2——空白所消耗EDTA-2Na溶液体积c——EDTA-2Na溶液的浓度V——所取水样的体积8、镁原理:利用镁的基态原子能吸收镁空心阴极灯发射的共振线,且其吸收强度与其浓度成正比。将水样导入火焰使镁离子原子化后,在其灵敏共振线285.2nm下测定其吸光度,与标准系列比较定量。使用氧化型火焰。仪器设备:原子吸收分光光度计及其附件;镁空心阴极灯空气压缩机或空气钢瓶气乙炔钢瓶气分析步骤(1)低含量镁校准曲线的绘制吸取一系列梯度为0.30mL的镁标准使用溶液,制得梯度为0.30mg的镁的标准系列溶液。在285.2nm处测定吸光度,并绘制标准曲线。(2)一般含量镁校准曲线的绘制吸取一系列梯度为0.50mL的镁标准使用溶液,制得梯度为0.50mg的镁的标准系列溶液。在285.2nm处测定吸光度,并绘制标准曲线。(3)样品测定取水样10.00mL于10mL干燥具塞试管中,加0.60mL氯化镧溶液,测其吸光度。9、氯化物原理:
硝酸银与氯化物作用生成氯化银沉淀,当有多余的硝酸银存在时,则与铬酸钾指示剂反应,生成红色铬酸银沉淀,指示反应达到终点。因此,可以铬酸钾溶液充当指示剂,用硝酸银溶液滴定来测定氯化物的含量。硝酸银标准溶液的配制和标定
1、配制AgNO3溶液称取2.4gAgNO3溶于1000mL不含Cl-的蒸馏水中,贮存于带玻璃塞的棕色试剂瓶中,摇匀,置于暗处,待标定。2、标定AgNO3溶液准确称取烘干冷却的基准试剂NaCl8.2420g,放于锥形瓶中,加1000mL不含Cl-的蒸馏水溶解定容。吸取10.0mL用纯水准确定容至100mL,此溶液1.00mL含0.50mg氯化物。吸取25mL氯化钠标准溶液置于瓷蒸发皿内,加纯水25mL,领取一瓷蒸发皿,加50mL纯水做空白。各加K2CrO4指示液lmL,在充分摇动下,用配好的AgNO3溶液滴定至溶液呈淡橘色即为终点。并计算结果。
3、校正硝酸银标准溶液浓度,使1.00mL相当于0.50mg氯化物。注意事项AgNO3与有机物接触易起还原作用,所以AgNO3溶液应储存于玻塞试剂瓶中,滴定时也必须用酸式滴定管,具有腐蚀性,应注意切勿与皮肤接触。配制AgNO3的水应不含Cl-,而常用的去离子水中却常含有微量的CI-,所以在使用之前应先用AgNO3溶液检查,证明不含CI-的水才能用来配制AgNO3溶液。见光易分解,析出黑色金属银
2AgNO3
2Ag+2NO2+O2
所以应储于棕色试剂瓶中,放置暗处,保存过久使用前应重新标定。
分析步骤(1)水样的预处理
a、带颜色b、含有亚硫酸盐和硫化物c、耗氧量高(2)取预处理的水样50mL加入瓷蒸发皿中,同时用纯水做空白。(3)将水样调节至中性或弱碱性。再各加1mL铬酸钾溶液,用硝酸银标准溶液进行滴定,直至产生橘黄色为止。计算水样中氯化物含量=(V2-V1)×0.500×1000V10、氨氮的测定
原理:在碱性溶液中,氨与纳氏试剂(K2HgI4)反应生成淡黄色至棕色的配合物,在一定条件下,该络合物的吸光度与氨氮含量成正比。通常可在波长410~425nm范围内测其吸光度,计算其含量。试剂配制试剂用水均应为无氨水
1、无氨水可选用下列方法之一进行制备:蒸馏法:每升蒸馏水中加1mL浓硫酸和数粒高锰酸钾晶体,在全玻璃蒸馏器中重蒸馏,弃去50mL初馏液,取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中,密塞保存。
煮沸法:每升蒸馏水中加25mL5%氢氧化钠溶液,煮沸1h。离子交换法:使蒸馏水通过强酸型阳离子交换树脂柱2、纳氏试剂:二氯化汞-碘化钾-氢氧化钾(HgCl2-KI-NaOH)溶液HgCl2
KI
沉淀洗涤加入5gKI加入40%氢氧化钠澄清液实验步骤(1)水样预处理a、蒸馏装置预处理b、水样蒸馏以硼酸溶液作为吸收液。注意:冷凝管需浸没在硼酸吸收液以下。(2)标准曲线绘制氨氮标准溶液梯度为0.10mL,加水至标线,加入1.0mL酒石酸钾钠溶液,摇匀.加1.0mL纳氏试剂,摇匀.放置10min后,在波长420nm处,以水为参比,测定吸光度.由测得的吸光度,减去零浓度空白管的吸光度后,得到校正吸光度,绘制以氨氮含量(mg)对吸光度的标准曲线.(3)水样测定取50mL水样或经预处理的水样,按与标准曲线相同的步骤测量吸光度。结果计算氨氮=mV×1000注意事项:1、纳氏试剂的配制:配制时务必控制HgCl2的加入量,至微量HgI2红色沉淀不再溶解时为止。根据多次实验,配制100ml纳氏试剂所需HgCl2与KI的用量之比约为2.3/5。静止后生成的沉淀应除去。2、滤纸中常含痕量的铵盐,使用时应用无氨水洗涤。所用玻璃器皿应避免实验室空气氨的污染。三、微生物指标检测菌落总数总大肠菌群一、菌落总数1.方法——平皿计数法2.定义:
菌落总数(standardplate-countbacteria)水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养24或48h后,所得1mL水样所含细菌的总数。厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。3.主要培养基:营养琼脂4.主要仪器:培养箱36℃+1℃等5.检验步骤生活饮用水
1mL水样+15mL45℃左右琼脂摇匀,做平行样和空白对照。冷却后,翻转平板,36℃+1℃培养24或48h后计数。水源水先制成1:10,1:100等稀释液,再按生活饮用水的检验步骤进行检验。注意事项(1)操作要快而准,包括材料、加样、倒培养基。(2)吸液体时液体不能进入吸头。(3)样品稀释时一定要混匀。(4)倒培养基前,瓶口要过火焰。(5)一定要有空白对照。(6)培养基温度控制,培养基薄厚。6.菌落计数及报告方法
作平皿菌落计数时,可用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数,供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时,若其中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此平皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。7.不同稀释度的选择及报告方法①首选30~300之间进行计算,若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则将该菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例1)。②若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30~300之间,则视二者之比值来决定,若其比值小于2应报告两者的平均数(见表1实例2),若大于或等于2则报告其中稀释度较小的菌落数(见表1实例3、4)。③若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例5)。④若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例6)。⑤若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例7)。⑥若所有稀释度的平板上均无菌落生长,则以未检出报告之。⑦如果所有平板上都菌落密布,不要用“多不可计”报告,而应在稀释度最大的平板上,任意数其中2个平板1cm2中的菌落数,除2求出每平方厘米内平均菌落数,乘以皿底面积63.6cm2,再乘其稀释倍数作报告。⑧菌落计数的报告:菌落数在100以内时按实有数报告,大于100时,采用两位有效数字,在两位有效数字后面的数值,以四舍
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