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文档简介
☆思考讨论
你能举例说出哪些植物器官的细胞中富含糖类,脂质和蛋白质吗?植物叶肉细胞.果实细胞和种子细胞中通常含有较多的糖类、脂质和蛋白质禾谷类果实、种子:甘蔗的茎、甜菜的根:花生、芝麻种子:大豆种子:蔗糖(二糖)淀粉(多糖)脂质2021/3/29星期一1检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验第二章组成细胞的分子2021/3/29星期一2
应用某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。实验原理还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)+斐林试剂→砖红色沉淀Cu2O脂肪+
苏丹Ⅲ→橘黄色
苏丹IV→红色蛋白质+双缩脲试剂→紫色络合物实质:在碱性条件下,蛋白质与Cu2+反应生成紫色或紫红色络合物。2021/3/29星期一3基本步骤选材→样液制备→加入试剂→颜色反应
→观察→结果→结论选材的原则实验现象明显(富含检测之物,避免干扰);便于处理,易获得;经济节约;2021/3/29星期一4实验一:还原性糖的鉴定1、选材:
含糖较高、颜色为白色或近于白色的植物组织,苹果、梨最好。2、制样:
苹果切块→研磨→过滤→滤液4、检测:
3、试剂:
甲液:0.1g/mLNaOH
乙液:0.05g/mLCuSO4
组织样液(2ml)→斐林试剂(1ml)→振荡混匀→50℃~65℃水浴加热2min;
→观察试管中溶液颜色的变化2021/3/29星期一5实验一:还原性糖的鉴定2021/3/29星期一6注意事项1.斐林试剂不稳定,需混匀后使用!2.本实验对试管中的溶液进行加热时,试管底
部不要接触烧杯底部;3.另外,试管口不要朝向实验者,以免沸腾的
溶液冲出试管,造成烫伤。实验一:还原性糖的鉴定2021/3/29星期一7还原糖的检测结果2021/3/29星期一8检测方法实验二:脂肪的鉴定方法一:用苏丹染液检测组织样液方法二:制作子叶临时切片,显微观察子叶细胞的着色情况。特别提醒:
实验用的花生种子需提前浸泡3-4h,浸泡时间太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,切下的薄片不易成形。2021/3/29星期一9取材:花生种子(浸泡3~4h),将子叶削成薄片制片①取最理想的薄片②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液(2~3min)③去浮色(如何去浮色)④制成临时装片实验二:脂肪的鉴定1-2滴体积分数为50%的酒精溶液观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察结果及结论:圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。2021/3/29星期一10脂肪的检测结果2021/3/29星期一111、选材:
2、制样:
4、检测:
3、试剂:
实验三:蛋白质的鉴定
浸泡1-2天的黄豆种子(或用豆浆)或用鸡蛋蛋白黄豆浸泡切片→研磨→过滤→滤液A液:0.1g/mLNaOH
B液:0.01g/mLCuSO4
组织样液(2ml)→双缩脲试剂A
(1ml)
→双缩脲试剂B
(4滴)→观察溶液颜色的变化2021/3/29星期一12实验三:蛋白质的鉴定2021/3/29星期一13以造成碱性环境思考:为什么要先加入A液再入B液?注意事项:1、如果用鸡蛋清,应加以稀释,若稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗干净。2、鉴定之前,可以留出一部分样液,以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比,这样可以增强说服力。作对照2021/3/29星期一14蛋白质的检测结果2021/3/29星期一15成分待侧样品实验记录2021/3/29星期一161、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3~4滴而不能过量?
过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。2、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?
时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。深化2021/3/29星期一17比较斐林试剂与双缩脲试剂不同点0.1g/mlNaOH蛋白质等量混合,现配现用先加A液1ml,创
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