设计性试验生物化学

设计性试验生物化学研究目的及意义：

小鼠糖尿病模型替代人类糖尿病患者用于治疗糖尿病，明确四氧嘧啶造出标准Ⅰ型糖尿病的最佳剂量、以及明确治疗的机理，最终用于临床治疗，为糖尿病患者带去福音。本实验的目的就是为了做出一种具有临床相似性，重复性好的小鼠糖尿病个体。研究背景：

近年来，随着我国社会经济条件的改善，人民生活水平的不断提高，饮食结构的改变，劳动强度的减低，人群平均寿命延长，应激状态增多，以及糖尿病检测手段的改进，与世界各国一样，糖尿病患病率在逐渐上升，糖尿病对我国人民健康的影响日趋严重，我国虽属世界上糖尿病低患病率国家，但糖尿病患者的人数已居世界第二位(仅次于美国)，增加速度惊人。据初步统计我国糖尿病患者总数约3600万人，其中Ⅰ型糖尿病的患者占5%，总数约200万人，我国Ⅰ型糖尿病的发病率约为0.7～1.0/10万。我国Ⅱ型糖尿病的患病率增长较快，据1979年在我国30万人口中的调查，糖尿病患病率为0.6%，1989年为2.02%，年均增长0.1%左右，1994年我国普查20万人口，患病率已上升为2.5%，目前20～75岁人群中糖尿病患病率约为3%左右。糖耐量低减患者不低于3%。Ⅰ型糖尿病：胰岛B细胞受损，常导致胰岛素绝对缺乏，所以需要依赖胰岛素治疗，也就是说患者从发病开始就需使用胰岛素治疗，并且终身使用。原理是？为啥子？搞不懂？1.为什么选用用四氧嘧啶？

由于四氧嘧啶诱导的大鼠糖尿病模型与人类Ⅰ型即胰岛素依赖性糖尿病类似，故四氧嘧啶是制备大鼠糖尿病模型的常用药物。2.四氧嘧啶的作用机理是什么？其作用机制是通过产生超氧自由基选择性地破坏胰岛B细胞,使细胞内DNA损伤,同时激活多聚ADP核糖体合成酶的活性,从而使辅酶Ⅰ含量下降,两者共同作用导致mRNA功能受损,引起细胞死亡，导致血中胰岛素浓度下降及高血糖产生，形成胰岛素依赖性Ⅰ型糖尿病。本文主要探讨四氧嘧啶在糖尿病大鼠模型中的应用,通过研究大鼠两种不同的给药方式致糖尿病模型差异,旨在为制造稳定的大鼠糖尿病模型选择一种最佳方案。3.做出与临床一致的Ⅰ型糖尿病模型需用四氧嘧啶的最佳浓度是多少？下面我们将一起去探究？？？？？？技术路线：

实验材料的购买实验前的准备实验处理方法实验数据的收集实验后的照顾实验结果的处理实验所需材料：实验动物雄性SD大鼠80只，清洁级，体重190-220g，购自四川医学科学院实验动物中心。试剂四氧嘧啶（alloxan，ALX，美国Sigma公司）使用

前用生理盐水配成不同浓度。

生理盐水购自四川科伦医药公司。仪器One2touch血糖仪（稳豪型）和血糖试纸（产品

型号HEA-21525针+25片）,美国强生公司生产。注射器购自四川省广元市康康医疗器械有限公司。自制简易大鼠固定器

显微镜购于淘宝造模前准备：在开始造模前将80只大鼠随机分成A,B,C,D,E五组，接着五组均禁食12h。

取四氧嘧啶分别配置成为体积分数为2%，4%，6%…

接着……E不作任何处理腹腔注射生理盐水10ml腹腔注射2%的四氧嘧啶10ml腹腔注射4%的四氧嘧啶10ml腹腔注射6%的四氧嘧啶10mlDCBA

造模后在日照时间10h以上的阳光充足的条件下饲养一周。

一周后分别抽取大鼠眼眶静脉或尾静脉血液做血糖测定，或者收集大鼠尿液做血糖测定。造模成功指标上法测定的血糖浓度高于9.99mmol/L为造模成功的Ⅰ型糖尿病大鼠

123456…16A组B组C组D组E组组别每组大鼠

编号血糖浓度可行性分析：

大鼠易得到，容易饲养，在科研工作中被广

泛利用。

手术器材和设备均为实验室常用，四氧嘧

啶购买方便

。

大鼠为哺乳类动物，与人体的构造级生理

方面比较相似，具有高的的可靠性。实验步骤简单。统计学方法分析实验结果：将实验数据输入电脑软件采用SPSS15.0软件进行统计学分析。P<0.05为差异有显著性

参考文献[1]叶华虎,袁菊芳,李敏,等.四氧嘧啶诱发糖尿病模型效果的性别差异[J].中国比较医学杂志,2010,20(1):19-22[2]古筱茹.不同剂量四氧嘧啶皮下注射对大鼠糖尿病模型稳定性的影响[J].现代医药卫生,2007,23(7):953[3]李妮,周微雅,钟玫,等.四氧嘧啶制作家兔糖尿病