1《中国药典》附录省公开课金奖全国赛课一等奖微课获奖课件

《中国药典》年版附录通用检测方法和指导标准主要增修订内容凌大奎1/37一、主要汇报内容1、附录增修订标准2、拟增修订项目3、主要增订项目内容4、主要修订项目内容5、评价与展望2/37二、附录增修订标准1、新增通用检测方法应是当前药品检验检测急需、能处理当前存在突出问题，并能引导药品检验检测水平不停增高，能充分反应现阶段国内和国际药品质量控制先进技术成熟可靠方法。急需、前瞻、先进、成熟2、指导标准增订，理由和意义要充分，应对药品质量标准和质量控制有实际指导意义。3、修订内容应紧密围绕药品标准以及药品监督管理工作，修订必须有充分理由和科学依据，不轻易修改。3/37三、拟增修订项目1、一部共16项，其中新增6项：电泳测定法渗透压摩尔浓度测定法等离子体发射光谱法大孔树脂有机残留物测定法聚合酶链式反应法中药特征图谱指导标准4/37三、拟增修订项目2、二部共45项，新增12项：核磁共振波谱法离子色谱法电导率测定法锥入度检验法2-乙基己酸测定法光学显微镜法拉曼光谱法指导标准溶出度测定指导标准药品多晶型研究指导标准蛋白质含量测定法合成多肽中醋酸测定法氨基酸测定指导标准5/37四、主要增订项目内容核磁共振波谱法1、未知物结构测定2、已知物结构确证功效团分析异构体分析打假工作（肝素钠中掺伪物在2.16ppm有特征信号）3、含量分析（多组份抗生素,对映异构体分析）6/37四、主要增订项目内容离子色谱法1、有机、无机阴阳离子和低分子量亲水性有机分子分离测定（电导检测器）2、氨基酸不经衍生化直接测定（脉冲积分安培检测器）3、一些抗生素相关物质检验（脉冲积分安培检测器）4、金属形态与价态分析7/37四、主要增订项目内容拉曼光谱法指导标准1、与红外光谱一样，同为分子振动光谱IR与偶极矩改变相关│Mnm│=Raman与极化率改变相关│(aij)nm│=2、二者选一律互为补充3、拉曼光谱测定快速、准确，样品制备简单甚至无需制备4、拉曼光谱通常处于可见与近红外区能够有效地用光导纤维将各光学元件联结样品能够包封在对激光光源透明玻璃、塑料中或将样品溶于水中5、一些特殊拉曼技术，如共振拉曼和表面增强拉曼光谱能够使谱带强度增加103～106倍，使痕量物质结构研究成为可能。8/37四、主要增订项目内容重金属检验与测定法1、重金属检验法（化学法）一法硫代乙酰胺比色法适合用于溶于水、稀酸或乙醇等药品甲（Pb）乙（样品）加设监控管丙（Pb+样品）要求丙＞甲＞乙合格如丙＜甲采第二法二法炽灼后硫代乙酰胺比色法适合用于含芳环、芳杂环以及难溶于水、稀酸或有机溶剂药品。配成溶液后同一法操作。三法硫化钠比色法适合用于碱溶性药品，同原附录未加监控管。9/37四、主要增订项目内容2、原子吸收与光焰光度法无实质修改3、等离子体质谱修订附录完善了原附录增加了干扰与校正，样品溶液制备以及测定方法中增加了标准加入法等段落。本法是重金属测定中最灵敏一个方法（10-12～10-15）4、等离子体发射光谱新增附录本法灵敏（10-9～10-12）、准确、线性范围宽、元素覆盖范围宽、可实现各种元素同时测定。5、离子色谱新增附录可实施金属形态与价态分析6、原子荧光未收载与ICP-MS和ICP-AES比差与AA比相仿10/37四、主要增订项目内容制药用水1、生产工艺纯化水饮用水经蒸馏、离子交换、反渗透等方法注射用水纯化水经蒸馏灭菌注射用水注射用水按注射剂生产工艺制备2、修订后质量标准增二项检验a、电导率检验新增附录用于检验各种阴阳离子污染程度b、总有机碳检验控制有机污染（有机小分子、微生物）c、上述两项检验在线检测可对制水系统进行实时流程监控11/37总有机碳检验经过测定水中二氧化碳，间接测量水被有机物污染程度（1）方法与原理a.氧化:燃烧、氧化剂、光照b.检测：直接电导、薄膜电导、非色散红外（2）对TOC测量各种原理和方法不作任何褒贬，只强调技术要求a、能区分水中有机碳与无机碳，并能排除无机碳干扰b、应满足系统适用性试验要求85%＜（rss-rw）/（rs-rw）×100＜115%c、含有足够灵敏度（0.05mg/L）（3）TOC测量意义控制化学污染与微生物污染ATOCmeasurementisnotareplacementtestforendotoxinormicrobiologicalcontrol.Whiletherecanbeaqualitativerelationshipbetweenafoodsouce(TOC)andmicrobiologicalactivity.thereisnodirectnumericalcorrelation.12/37电导率检验1、对电导率仪普通要求a、仪器最小分辨率和读数精度0.1μS/cmb、电导率仪须定时校正（a）采取电导标准溶液校正电导池常数，实测电导池常数应在要求值±2%（b）与校正过仪器进行间接比对2、影响制药用水电导率测定原因主要有温度、大气中二氧化碳溶入、水pH值等13/37电导率检验3、判定标准（1）纯化水表1温度与电导率程度（纯化水）（略）采取内插法计算（2）注射用水表2温度与电导率程度（注射用水）（略）14/37电导率检验a、以小于测定温度最靠近温度所对应电导率值即为程度值b、调水样（不少于100ml）温度至25℃，猛烈搅拌，每5分钟测一次，当改变＜0.1μS/cm时统计读数，读数应小于2.1μS/cm（合格）c、如b步读数＞2.1μS/cm，则依法测定水pH值，由表3查得对应电导率程度，并与b步实测值比较，如b读数小于对应程度值，则为合格，如b读数大于程度值或pH值超出5.0-7.0，则不合格表3pH值和电导率程度（略）15/37电导率检验（3）灭菌注射用水a、温度25℃b、装量≤10ml，程度为25μS/cmc、装量＞10ml，程度为5μS/cm16/37电导率检验4、TOC和电导率检验用水（1）TOC检验TOC＜0.1ppm电导率＜1.0μS/cm（2）电导率检验电导率＜0.1μS/cm（3）可采取经超纯水装置制备并经检验合格水，如仍不理想，提议再经全玻璃重蒸17/37五、主要修订项目内容紫外-可见分光光度法1、波长校正增加了高氯酸钬溶液校正（以10%高氯酸为溶剂，配制含4%氧化钬溶液）λmax

nm：241.13，278.10，287.18，333.44，345.47，361.31，416.28，451.30，485.29，536.64，640.52nm。2、波长允差紫外区±1nm500nm±2nm700nm±4.8nm18/37五、主要修订项目内容红外光谱1、原料药判别遇多晶干扰（1）按要求对样品进行预处理（重结晶与干燥）（2）采取对照品平行操作（3）采取溶液法2、制剂判别（1）提取（溶剂选择）辅料无干扰，晶型不变直接与标准光谱比对辅料无干扰，晶型有变与对照品同法处理后比对辅料有干扰，晶型不变在指纹区选择3～5个特征谱带波数允差为0.5%辅料有干扰，晶型有变不宜采取红外判别19/37五、主要修订项目内容3、多组份原料药判别可借鉴制剂判别方法4、混晶中无效或低效晶型程度控制采取基线密度法计算指定谱带吸光度后再计算各晶型相对含量（甲苯咪唑和棕榈氯霉素）20/37五、主要修订项目内容高效液相色谱法1、色谱柱（1）惯用色谱柱填料粒径3～10μm（2）微径柱填料粒径约2μm（UPLC或UFLC）硬件须匹配色谱条件可适当调整以品种正文要求条件测定结果为准2、柱温（1）通常为室温（2）以硅胶为载体普通色谱柱，最高使用温度不得超出60℃，（HTLC）（a）提升灵敏度峰高对数与柱温呈线性关系（b）改进选择性21/37五、主要修订项目内容

3、有些色谱条件可适当调整，但流动相百分比调整有明确规定。组分百分比较低者（＜50%）相对于本身改变量不超出±30%，相当于总量改变量不超出±10%。如±30%相对改变量超出总量10%时，则以后者为准。4、系统适用性试验（1）理论板数nn=16（）2或n=5.54（）2（2）分离度R（关键指标）R=2或R=5、拖尾因子必要时，应要求拖尾因子22/37五、主要修订项目内容pH值测定法1、pH含义pH=-logaH+2、pH值测定pH=pHs+（E-Es）/RR=0.05916+0.000198（t-25℃）影响pH值测定原因表观pH值3、弱缓冲液pH测定除另有要求外，按下法测定先用苯二甲酸盐缓冲液（pH4.01）校正仪器，1min内pH改变＜0.05时读数，再用硼砂缓冲液（pH9.18）校正仪器，1min内pH改变＜0.05时读数，取二次读数平均值。4、水pH值测定加KCl适量（由制药用水正文自行要求）23/37五、主要修订项目内容电位滴定1、作图法零阶E～V曲线突跃部中点或拐点所对应滴定液体积一阶导数一级微商（△E/△V）极值所对应滴定液体积二阶导数二级微商（△2E/△V2）等于零时所对应滴定液体积24/37五、主要修订项目内容2、计算法二阶导数法较一阶导数法更准确，故最惯用采取线性内插法V0=V+△V式中V0：终点时滴定液体积a：二级微商为零前二级微商值b：二级微商为零后二级微商值V：二级微商为a时滴定液体积25/37V0=V+(a/a+b)△V=34.30+[1100/(1100+3600)]×0.10=34.32mlV（ml）E(mv)△E△V△E/△V△2E/△V233.00405100.402533.404153370.203533.604225090.204533.8043175120.206034.00443400120.1012034.10455300150.1015034.204702900440.1044034.305141100550.1055034.40569-3600190.1019034.50588-800110.1011034.60599-40070.107034.7060626/37五、主要修订项目内容不溶性微粒检验法1、应用对象由溶液型静脉注射液扩大至溶液型静脉注射液，注射用无菌粉末、注射用浓溶液及注射用无菌原料药2、统一了操作方法（1）取样体积大于5ml取5ml小于5ml依据实际装量取或合并成不少于25ml，每次取5ml（2）有效读数不少于3个，取平均值计算3、仪器校正（1）标准粒子10μm相对标准偏差小于5%（2）8μm与10

μm或10μm与12μm两个通道差值计数

≥68%

10μm通道累计计数27/37五、主要修订项目内容可见异物检验法1、合并原附录ⅨH及《可见异物检验法补充要求》2、10ml及以下规格，每次手持不超出2支3、目视检测时间不超出20秒4、所检样品必须系随机抽取28/37五、主要修订项目内容渗透压摩尔浓度测定法1、供试溶液浓度（1）由仪器可测定范围改为小于700mOsmol/㎏（2）经稀释供试液，其渗透压摩尔浓度不能简单地用实测值乘以稀释倍数表示，而应将实测值和稀释倍数完整表述2、扩大了应用范围，在制剂通则注射剂和眼用制剂项下有明确要求。3、各类制剂渗透压摩尔浓度范围暂不作统一规定，标准要求与血液等渗或靠近等渗（285～310mOsmol/㎏）29/37五、主要修订项目内容酸败度检验法羰基值原计算公式有误羰基值=1、854各种醛2,4-二硝基苯腙ε，而不是mε2、V1供试品稀释总体积V2

测定用供试品稀释液体积

25ml

5ml

25ml

3、修改为羰基值=S30/37六、评价与展望1、新版药典就采取技术伎俩而言，已完全实现与国际接轨；各附录技术要求也已到达或靠近国际水平2、农药残留量测定法与重金属检验法增、修订使中药安全性检验技术水准得以大大提升，不但实现了方法学与国际接轨，而且所包括农药品种和重金属种类也涵盖了国际上主要控制品种3、总有机碳和电导率检验法增修订以及在制药用水质量标准中实施，使制药用水化学污染与微生物污染得以有效控制4、PCR扩增技术在中药判别中应用31/37六、评价与展望5、离子色谱在重金属形态与价态分析以及氨基酸分析中应用6、溶出度计量法判定7、重量（装量）差异计量法判定8、渗透压摩尔浓度用于中药注射剂检验9、新技术新方法在品种各论中推广应用32/37附一农药残留量测定法1、方法学由单一GC法扩大为GC、HPCL、GC/MS和LC/MS2、农药品种由24种（其中有机氯9、拟除虫菊酯3和有机磷12）扩充为色谱法124种（其中有机氯和拟除虫菊57、有机磷54和氨基甲酸酯13），按色-质联使用方法统计则为128种。3、测定方法分两个层次：一为色谱法（GC、HPLC）方法包含样品前处理（提取、净化）、色谱测定、色谱验证和质谱确证二为色-质联机法（GC/MS、LC/MS）方法包含样品前处理（提取、净化）、色-质联机测定3