JJF(沪苏浙皖) 4009-2023 荧光法叶绿素a测定仪校准规范

沪苏浙皖地方计量校准规范荧光法叶绿素

测定仪校准规范Calibration

Specification

Instruments

2024-02-29

上海市市场监督管理局江苏省市场监督管理局发布浙江省市场监督管理局安徽省市场监督管理局

a

测定仪Calibration

Specification

Instruments

4009-2023

目录

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

II

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

ꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏꞏ

13引 言

JJF

JJF

1059.1-2012

GB/T

6682-2008

HJ

897-2017

±10%5%5%/h荧光法叶绿素

a

测定仪校准规范µg/L

GB/T

14581-1993

HJ

494-2009

HJ

897-2017

HJ/T

91-2002

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用

±20%

AC

(220±22)

HJ

897-2017

个标准点配制对应不同叶

µg/L

0.2

µg/L50

µg/L100

µg/L150

µg/L200

µg/L

标准溶液的浓度值和仪器的叶绿素

y

abxy

µg/Labx

µg/L

x

x

算线性误差（不包含最低浓度点），取结果绝对值最大值为仪器的线性误差校准结

abx

x

x

3y

——

i

a

µg/Lx——

i

B

µg/Lx

——

i

B

µg/Lx——

i

%6.2 a20

μg/LB7次。按公式（456cc(c

c)

c=

771

45

c——iμg/Lc——7

μg/Ls——μg/Ls——%6.3

6

a

20

μg/L

B

c

10

1

1hc7S

=

c

c0

maxc

100%

7

——%c——

10min

μg/Lc——μg/L6.4

a

2

1

B

a

1

3

3

8cc=

ccc

100%

8c——%c——

3

μg/Lc——

a

μg/L7

JJF

1071-2010

5.12

C

D8由于复校时间间隔是由仪器的使用者、使用情况以及仪器本身质量等诸因素所

1

附录

B

/

B

3%k=2

B

B

20

B

B

20

20

μg/L

a

B

290

μg/L

单标线吸量管准确移取

1

的罗丹明

B

mL

mL

10

的罗丹明

B

储备标准溶液。再用分度吸量管移取

mL

罗丹明

B

储备溶液置于

单标线容量瓶中，即可配制成

290

μg/L

B

B

B

04

B

24

h

实验室过程中产生的废液，应集中收集，并做好相应的标识，委托有资质的单附录

叶绿素B.1 将一定量样品用滤膜过滤截留藻类，研磨破碎藻类细胞，用丙酮溶液提取叶绿750

nm664

nm647

nm

630

nm波长处测定提取液吸光

a

B.2 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备

COCH

MgCO

9+1

900

4.1

100

1.0

g

4.2

100

实验用水，搅拌成悬

mm

0.45

μm0.7

μmB.3

1

L

500

具磨口塞的棕色玻璃瓶。

1000

×g

3000

4000

15

，旋盖材质不与丙酮反应。

mm

石英比色皿。

0.45

μm

聚四氟乙烯有机相针式滤器。B.4

GB/T

14581HJ/T

91

HJ

494

0.5

m

1005001

L

500

2

L

30

，取水面下

5

cm

样品，转移至采样瓶（5.1）。在每升样品中加入

1

mL

碳酸镁悬浊液4.4

0.5

m，在水深

1/2

样品采集后应在

0

℃～4

℃避光保存、运输，24

h

内运送至检测实验室过滤

24

h

-20

14

d

5.24.5体积，见表

1，用量筒量取一定体积的混匀样品，进行过滤，最后用少量蒸馏水冲

50

kPa注：仅当富营养化水体的样品无法通过玻璃纤维滤膜时，可采用离心法浓缩样

a

5.3

3

4

3

4

4.3

12

5

min

5.54.3

10

注：叶绿素对光及酸性物质敏感，实验室光线应尽量微弱，能进行分析操作即

4

2h

24

h

23

5.4

1000×g

3000

4000

10min5.7

a

6.3B.5

将试样移至比色皿中，以丙酮溶液（）为参比溶液，于波长

nm647

nm630

nm

750

nm

波长处的吸光度应小于

0.0055.7

7.16.4B.6

a

mg/L1

A664

A1.54

A

A7500.08

A630

A1——

a

mg/LA——

664

nm

波长下的吸光度值；A——

647

nm

波长下的吸光度值；A——

630

nm

波长下的吸光度值；A——

750

nm

波长下的吸光度值。

a

μg/L

=

11V

——

a

μg/L1——

a

mg/LV1——V

——L

μg/L

μg/Lμg/L

μg/L=2μg/L66464763075020102030405060μg/L201.

1.

2.

3.

4.

附录

μg/L附录

1.

2.

Uk=23.

4.

5.

5.

x

x

附录

E.1E.1.1

a

E.1.2E.1.2.1

B

E.1.2.2 E.1.3 校准方法：在仪器常用测量范围（0.2200µg/L

内，按照均匀取点的原则

0.2

µg/L50

µg/L100

µg/L150

µg/L200

µg/L

5

a

B

3

B

a

B

B

E.1.4540AC

(220±22)

V

HzE.2x

xxx——

i

B

µg/Lx

——

i

B

µg/Lx——

i

%E.3 [uc(xi)]2

c2(xi)u2(xi)c2

(x)u2

(x)

μg/L

μg/Lμg/L

μg/L0.20.220.210.170.205052.0252.0351.9852.01717.09+0.291430103.43103.49103.43103.451427.59-0.172140155.65155.73155.63155.672148.860.412860206.94206.90207.04206.962857.29-0.09c

xc

x

1x

xxE.4E.4.1

B

i

5

B

3

n=3），共计

15

N=15），

a

E.1

y

y

y

aabxN

2

717.091429.60

x

x1 10.3407

1 717.091429.60

x

x1 10.3407

11u

x

0.0724 3

15 15289659.6b

nN

x

x

50μg/L

a

B

x

x=0.29%

B

s E.4.2ss

1

s

1

E.4.2.1 s1

B

U

3%

k

2

s2稀释过程引入的不确定度来源主要考虑吸量管和单标线容量瓶体积校准的不确

a

50μg/L

B

单标线吸量管和

36mL

单标线容量瓶。a单标线吸量管的最大允许误差为1000mL单标线容量瓶的最大

±0.10mL

。可以认为均匀分布，则由吸量管

b在移液及定容过程中由于实验室温度在（20±2）℃之间变动，引入的不确定度通过温度变化范围与体积膨胀系数确定，水的体积膨胀系数为

，因此±2×2.1×10

2

2

2s

2

2

2s s

s

s

1s

2

s)=

2

c

x= ==0.001399(

a

50μg/L

2222s2

2rel

3rel

2222222 22E.5

a

50

μg/L

1 1x 715μg/Lx(715c

xx(715

x

=

717.09μg/L

==

（10.8223μg/L）2=1.6%0.001399(μg/L)

（3.0472μg/L）2

uc(xi)

c=

（10.8223μg/L）2=1.6%0.001399(μg