《生物技术大实验》教学大纲

生物技术大实验－细胞工程课程编号：适用专业：生物技术学时数：48学分数：1一、实验目的与要求：本课程是生物技术专业的专业课程的综合性大实验，是结合基因工程、细胞工程、微生物工程、蛋白质工程、酶工程、生物工程下游技术的相关技术而开设的综合性、设计性实验，由细胞工程实验、生物大分子分离与分析技术实验、微生物工程实验三部分组成。细胞工程技术是一般包括细胞培养技术、细胞融合技术、单克隆抗体技术、细胞折合技术、染色体工程技术、繁殖生物学技术等一系列重要基础技术。实验目的：通过本课程的学习使学生初步掌握植物、动物细胞的培养、融合和核移植等细胞水平上的基本操作技术和实验设计方法。使学生系统地掌握生物工程领域内的基本技术和基本技能，为更好地将生物技术应用于人类的生产和生活实践打下坚实的基础。同时，通过实验，培养学生观察、思考、探究、分析和解决问题的能力；养成实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约、爱护公物的良好作风。实验要求：1．掌握基本细胞工程技术的操作技能。2．了解细胞工程的各种技术的基本原理，技术路线和方法。3.

在掌握基本知识的前提下，能针对具体课题对重要研究的技术路线进行初步设计。

二、实验项目与提要：序号实验项目必做选做时数内容提要实验类型每套仪器人数1动物细胞工程常用培养液配制与检测必做41．细胞工程实验室基本操作技术2.

液体配制的准备3.

常用操作液及培养液的配制综合性实验4-52CO2培养箱等培养设备使用必做31．CO2培养箱使用方法2.

倒置显微镜使用方法基础性实验15-203小鼠组织细胞原代培养必做41．组织块法原代细胞培养2．酶消化法原代细胞培养综合性实验4-54小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集、运动能力检测与结构观察必做41．精子采集2．精子运动能力检查3．精子整体结构观察4．精子顶体结构观察综合性实验4-55小鼠输卵管卵母细胞采集与结构观察必做41．激素的分装、配制2．小鼠超排处理日程安排与超排处理3．小鼠卵母细胞采集及结构观察综合性实验4-56小鼠超数排卵及附植前不同发育阶段胚胎采集与结构观察必做121．小鼠超排处理日程安排与超排处理2．胚胎采集2.1输卵管胚胎采集2.2子宫角胚胎回收3．检胚及胚胎的形态学观察与鉴定设计性实验4-57小鼠组织细胞传代培养必做41．原代培养的首次传代2．细胞传代方法（酶消化法）3．细胞冻存保存综合性实验4-58小鼠胎儿成纤维细胞活性检测及细胞计数必做41．台盼蓝排除检测法检测小鼠胎儿成纤维细胞活性2．溴化乙锭和碘化丙锭排除检测法检测小鼠胎儿成纤维细胞活性3.

细胞计数综合性实验4-59细胞的冻存和复苏选做31．动物细胞的冷冻2．动物细胞的复苏

综合性实验4-510生产转基因动物综合技术体系的方案设计必做61.了解动物克隆技术的综合过程2.

掌握利用体细胞克隆技术生产转基因动物的原理和技术流程3.设计一套生产转基因动物综合技术体系的方案综合性实验4-5三、成绩考核方法：1．平时成绩：包括出勤、课堂提问、讨论情况等，占20％2．操作成绩：实验的操作，及实验的效果等，占20％3．报告成绩：实验报告等，占20％4．考试成绩：占40％5．综合考核成绩占100％

四、教材及主要参考书：教材：1.《细胞工程实验指导》自编教材

2005.92.《细胞工程》李志勇编著科学出版社

2003.8参考书：1.《植物细胞工程原理与技术》周维燕主编中国农业大学出