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文档简介

主讲老师：邢煜骞转化子的筛选转化子通常将摄取外源DNA分子并在其中稳定维持的受体细胞称为克隆子，把采用转化、转染或转导等方法获得的克隆子称为转化子。筛选方法可分为以下三类：根据载体标记基因筛选转化子根据报告基因筛选转化子根据形成噬菌斑筛选转化子根据载体标记基因筛选转化子法利用载体抗生素抗性基因相对应的选择药物利用载体除草剂抗性基因相对应的选择药物利用lacZ’基因互补显色试剂利用生产调节剂非依赖性利用核苷酸合成代谢相关酶基因缺失互补试剂利用载体抗生素抗性基因相对应的选择药物筛选选择标记基因选择药物及其浓度β-丙酰胺酶基因(bla、Apr或Ampr)氨苄西林(Ap或Amp),

30~50μg/mL氯霉素酰基转移酶基因(cat或Cmr)氯霉素(Cm或Cmp),30μg/mL卡那霉素抗性基因(npt、Knr或Kanr)卡那霉素(Kn或Kan),5μg/mL四环素抗性基因(tetR、Tcr或Tetr)四环素(Tc或Tet),12.5~15μg/mL链霉素抗性基因(str、Smr或Strr)链霉素(Sm或Str),25μg/mLlacZ’基因互补显色试剂筛选（蓝白筛选）lacZ’基因片段插入外源基因lacZ’基因片段未插入外源基因白色斑点蓝色斑点X-gal和IPTG培养基根据报告基因筛选转化子法β-葡聚糖酸糖苷酶基因（gus）筛选萤火虫荧光素酶基因（luc）筛选绿色荧光蛋白基因（gfp）筛选绿色荧光蛋白基因（gfp）筛选转化子根据形成噬菌斑筛选转

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