质谱仪的类型及构成

质谱仪的类型及构成12.1.1概述

相对分子质量精确测定与化合物结构分析的重要工具；第一台质谱仪：1912年；早期应用：相对原子质量、同位素等的测量；现代：有机化合物结构鉴定的重要工具；特殊性：联用技术，相对分子质量测定。M+(M–R2)+(M–R3)+(M–R1)+第2页,共89页，2024年2月25日，星期天发展过程：

20世纪40年代：高分辨率质谱仪出现，有机化合物结构分析；

20世纪60年代末：色谱-质谱联用仪出现，有机混合物分离分析；促进天然有机化合物结构分析的发展；

20世纪90年代：基质辅助激光解吸电离源、电喷雾电离源、大气压化学电离源，开创了质谱技术研究生物大分子的新领域。

2002年由于“发明了用于生物大分子的电喷雾离子化和基质辅助激光解吸离子化质谱分析法”，美国科学家约翰·芬恩与日本科学家田中耕一共享该年度诺贝尔化学奖。

第3页,共89页，2024年2月25日，星期天12.1.2质谱仪与质谱分析原理进样系统离子源质量分析器检测器1.气体扩散2.直接进样3.气相色谱1.电子轰击2.化学电离3.场致电离4.激光

1.单聚焦2.双聚焦3.飞行时间4.四极杆

质谱仪需要在高真空下工作：离子源（10-310-5Pa

）

质量分析器（10-6Pa

）(1)大量氧会烧坏离子源的灯丝；(2)用作加速离子的几千伏高压会引起放电；(3)引起额外的离子－分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化。第4页,共89页，2024年2月25日，星期天原理与结构仪器原理图进样系统离子源质量分析器检测器真空系统第5页,共89页，2024年2月25日，星期天进样装置气体扩散；插入式直接进样杆：适用于有一定挥发性的固体或高沸点液体试样；色谱作为进样装置。第6页,共89页，2024年2月25日，星期天离子源离子源的功能是提供能量将待分析试样电离，组成由不同质荷比（m/z）离子组成的离子束。++++:R1:R2:R3:R4:e+M+(M-R2)+(M-R3)+MassSpectrum(M-R1)+第7页,共89页，2024年2月25日，星期天质量分析器

质量分析器的作用是将离子源产生的离子按m/z顺序分离，相当与光谱仪器上的单色器。

用于有机质谱仪的质量分析器有双聚焦分析器、四极杆分析器、离子阱分析器、飞行时间分析器、回旋共振分析器等。

第8页,共89页，2024年2月25日，星期天质量分析器特点对比第9页,共89页，2024年2月25日，星期天检测器（1）电子倍增管15～18级；可测出10-17A微弱电流。（2）渠道式电子倍增器阵列第10页,共89页，2024年2月25日，星期天12.1.3质谱仪的类型1.无机质谱仪火花源双聚焦质谱仪（SSMS），电感应耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）和二次离子质谱仪（SIMS）等。

2.同位素质谱仪

小型低分辨同位素质谱仪：轻元素(H，C，S等)大型高分辨的同位素质谱仪：重元素(U，Pu，Pb等)3.有机质谱仪

——用途最广的质谱仪4.生物质谱仪

电喷雾电离质谱仪（ESI-MS），基质辅助激光解吸电离质谱仪（MALDI-MS），快原子轰击质谱仪（FAB-MS），离子喷雾电离质谱仪（ISI-MS），大气压电离质谱仪（API-MS）等。

第11页,共89页，2024年2月25日，星期天有机质谱仪1.按进样方式分类

直接进样质谱，气相色谱-质谱联用仪（GC-MS），液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）。

2.按离子化方式分类

电子轰击质谱（EI-MS），化学电离质谱（CI-MS），快原子轰击质谱仪（FAB-MS），电喷雾电离质谱仪（ESI-MS）等。

3.按质量分析器分类

单聚焦质谱仪，双聚焦质谱仪，四极杆质谱仪，飞行时间质谱仪，离子阱质谱仪，傅里叶变换质谱仪等。第12页,共89页，2024年2月25日，星期天12.1.4主要离子源一、电子轰击离子源ElectronIonization(EI)源应用最广，标准谱图。++++:R1:R2:R3:R4:e+M+(M–R2)+(M–R3)+MassSpectrum(M–R1)+第13页,共89页，2024年2月25日，星期天第14页,共89页，2024年2月25日，星期天EI源的特点：电离效率高，灵敏度高；应用最广，标准质谱图基本都是采用EI源得到的；稳定，操作方便，电子流强度可精密控制；结构简单，控温方便。EI源：可变的离子化能量

(10～240eV)

对于易电离的物质降低电子能量，而对于难电离的物质则加大电子能量（常用70eV）。电子能量

电子能量

分子离子增加碎片离子增加第15页,共89页，2024年2月25日，星期天二、化学电离源（ChemicalIonization，CI）

离子室内的反应气（甲烷等；10～100Pa，试样的103～105倍），电子（100～240eV）轰击，产生离子，再与试样分子碰撞，产生准分子离子。特点：最强峰为准分子离子；谱图简单；不适用难挥发试样；得到的是非标准谱图。++气体分子试样分子+准分子离子电子(M+1)+;(M+17)+;(M+29)+;第16页,共89页，2024年2月25日，星期天化学电离源反应过程：

CH4+e→CH4+·+2eCH4+·→CH3++H·

CH4+和CH3+很快与大量存在的CH4分子起反应，即

CH4+·+CH4→CH5++CH3·CH3++CH4→C2H5++H2

CH5+和C2H5+不与中性甲烷进一步反应，与试样分子(XH)

CH5++XH→XH•CH5+→XH2+

•CH4M+17C2H5+＋XH→XH•

C2H5+→X+

•C2H6M+29化学电离法可以大大简化质谱，若采用酸性比CH5+更弱的C4H9+（异丁烷）、NH4+（氨）的试剂离子，则可更进一步简化。

第17页,共89页，2024年2月25日，星期天化学电离源（CI）与电子轰击电离源(EI)质谱图对比第18页,共89页，2024年2月25日，星期天三、快原子电离源（FAB）a.氩气

离子，加速、碰撞，电荷和能量转移

高能原子束。b.高能粒子打在置于涂有非挥发性底物靶上的试样分子使其电离。

不加热汽化，特别适合于相对分子质量大，难挥发或热稳定性差的试样分析，例如肽类、低聚糖、天然抗生素。有较强的准分子离子峰和较丰富的碎片离子信息。

第19页,共89页，2024年2月25日，星期天快原子电离源（FAB）质谱图第20页,共89页，2024年2月25日，星期天四、电喷雾电离源（ESI）软电离方式，易形成多电荷离子[M+nH]n+。

特别适合于分析极性强热稳定性差的大分子，如蛋白质、肽、糖等。液相色谱-质谱联用接口。第21页,共89页，2024年2月25日，星期天电喷雾电离源（ESI）：LC-MS结构流程第22页,共89页，2024年2月25日，星期天电喷雾电离电喷雾产生多电荷离子，相对分子质量M计算：选相邻峰，电荷n，n+1m1=(M+n)/2m2=(M+n+1)/(n+1)计算结果如表。不适用于非极性化合物第23页,共89页，2024年2月25日，星期天大分子量蛋白质的质谱图

相对分子质量为10000的分子若带有10个电荷，则其质荷比只有1000，在一般质谱仪可以分析的范围之内。

第24页,共89页，2024年2月25日，星期天第25页,共89页，2024年2月25日，星期天电喷雾电离-多电荷离子第26页,共89页，2024年2月25日，星期天五、大气压化学电离源（APCI）

APCI是ESI的补充。APCI主要产生单电荷离子，分析的化合物相对分子质量一般小于1000。碎片离子很少，主要是准分子离子。

针电极高压放电，空气中某些中性分子电离，产生H3O+，N2+，O2+

和O+

等，离子与试样分子发生离子-分子反应，使试样分子离子化。应用于液相色谱-质谱联用。第27页,共89页，2024年2月25日，星期天六、激光解吸电离源（LD）得到的主要是分子离子，准分子离子。碎片离子和多电荷离子较少。常用的基质：2,5—二羟基苯甲酸、芥子酸、烟酸、α-氰基-4-羟基肉桂酸等。

分析试样置于涂有基质的试样靶上；基质分子吸收激光能，与试样分子一起蒸发并使试样分子电离。属于软电离技术，用于分析生物大分子，如肽、蛋白质、核酸等。

第28页,共89页，2024年2月25日，星期天七、场电离源（FI）与场解吸源（FD）电压：7~10kV；d<1mm；强电场将分子中拉出一个电子；分子离子峰强；碎片离子峰少；不适合化合物结构鉴定。阳极+++++++++++++阴极d<1mm第29页,共89页，2024年2月25日，星期天场电离源（FI）与电子轰击电离源(EI)质谱图对比第30页,共89页，2024年2月25日，星期天场解吸源(FD)化学电离源(CI)电子轰击电离源(EI)质谱图对比第31页,共89页，2024年2月25日，星期天主要离子源特点对比第32页,共89页，2024年2月25日，星期天12.1.5质量分析器在磁场存在下，带电离子按曲线轨迹飞行；

离心力=向心力；m

2/R=B0zV曲率半径：

R=m

/（

zB0）质谱方程式：m/z=B02R2/(2V)离子在磁场中的轨道半径R取决于：m/z

，B0

，V。改变加速电压V，可以使不同m/z

的离子进入检测器。加速后离子的动能：(1/2)m

2=zV

=[(2V)/(m/z)]1/2第33页,共89页，2024年2月25日，星期天一、单聚焦磁场分析器方向聚焦：相同质荷比，入射方向不同的离子会聚；分辨率不高缺少能量聚焦。第34页,共89页，2024年2月25日，星期天二、双聚焦分析器方向聚焦：

相同质荷比，入射方向不同的离子会聚；能量聚焦：

相同质荷比，速度(能量)不同的离子会聚。

质量相同，能量不同的离子通过电场和磁场时，均产生能量色散；两种作用大小相等，方向相反时互补实现双聚焦。第35页,共89页，2024年2月25日，星期天双聚焦分析器第36页,共89页，2024年2月25日，星期天三、四极杆质量分析器离子在场的作用下产生振动，如果质量为m，电荷为z的离子进入四极场，运动方程是

保持Vdc/Vrf不变(直流电压/射频电压振幅)，改变Vrf值。对应于一个Vrf值，四极场只允许一种质荷比的离子通过。特点：分辨率较高，分析速度极快（适合联用仪器）；缺点：准确度和精密度低于双聚焦型。第37页,共89页，2024年2月25日，星期天四极杆质量分析器第38页,共89页，2024年2月25日，星期天四极杆质量分析器第39页,共89页，2024年2月25日，星期天五、飞行时间质量分析器离子以速度v进入自由空间（漂移区），假定离子在漂移区飞行的时间为t，漂移区长度为L，则特点：质量范围宽，扫描速率快，不需电场和磁场。分辨率低：原因在于离子进入漂移管前的时间分散、空间分散和能量分散。能量相同，质量越大，达到接收器的时间越长。t=L(m/2zV)1/2

第40页,共89页，2024年2月25日，星期天六、

离子阱质量分析器环电极和上下两端盖电极，均为绕z轴旋转的双曲面，并满足：r20=2Z20

r0为环形电极的最小半径，Z0为两个端盖电极间的最短距离。直流电压U和射频电压Vrf加在环电极和端盖电极之间。在稳定区内的离子，轨道振幅一定，可以长时间留在阱内。一定质量的离子，在一定的U和Vrf下，可以处在稳定区。如果在引出电极上加负电压，可以将离子从阱内引出，U和射频电压Vrf加在环电极和端盖电极之间。第41页,共89页，2024年2月25日，星期天离子阱质量分析器第42页,共89页，2024年2月25日，星期天七、傅里叶变换离子回旋共振质量分析器（Fouriertransformioncyclotronresonanceanalyzer,FTICR）三对相互垂直的平行板电极组成，置于高真空和由超导磁体产生的强磁场中。

第一对电极：捕集极，与磁场方向垂直，加有适当正电压，其目的是延长离子在室内滞留时间；

第二对电极：发射极，用于发射射频脉冲；

第三对电极：接收极，用来接收离子产生的信号。

第43页,共89页，2024年2月25日，星期天傅里叶变换离子回旋共振质量分析器离子(m/z)进入磁感应强度为B的磁场中，作圆周运动，离心力和磁场力相平衡，即：或离子的回旋频率

c与离子的m/z成线性关系。B固定后，测得

c，可获得离子的质量。

得

外加一射频辐射，当频率等于离子共振频率，离子吸收能量而改变圆周运动的轨道，沿阿基米德螺线加速。射频辐射消失，出现图（C）运动，在上下极板之间产生感应电流信号(复合信号)，需傅里叶转换。第44页,共89页，2024年2月25日，星期天傅里叶变换离子回旋共振质量分析器特点FT-MS的优点：（1）仪器的分辨率极高，可超过1×106；（2）而且在高分辨率下不影响灵敏度（双聚焦分析器为提高分辨率必须降低灵敏度）；（3）FT-MS的测量精度非常好，能达到百万分之几；（4）具有多级质谱功能，可以和任何离子源相联，扩宽了仪器功能。扫描速率快，性能稳定可靠，质量范围宽等优点。需要很高的超导磁场，需要液氦，售价和运行费用较高。

第45页,共89页，2024年2月25日，星期天质量分析器特点对比第46页,共89页，2024年2月25日，星期天12.1.6质谱联用仪器质谱：纯物质的结构分析色谱：化合物分离色谱-质谱联用：共同优点类型：GC-MS；GC-IR；LC-MS；CZE-MS（毛细管电泳-质谱）困难点：载气(或流动液)的分离；出峰时间监测；仪器小型化；关键点：接口技术。第47页,共89页，2024年2月25日，星期天一、GC-MS联用仪器试样试样

58901.0DEG/MINHEWLETTPACKARDHEWLETTPACKARD5972AMassSelectiveDetectorDCBA

ABCD气相色谱(GC)质谱分离鉴定BACDADBCMS第48页,共89页，2024年2月25日，星期天GC-MS中的分子分离器填充柱色谱需要分子分离器分离载气,浓缩试样分子。毛细管色谱柱可直接与质谱联结。

分子分离器类型：

微孔玻璃式、半透膜式和喷射式三种。喷射式分子分离器：

由一对同轴收缩型喷嘴构成，喷嘴被封在一真空室中。可做成多级。第49页,共89页，2024年2月25日，星期天色谱-质谱联用仪的三维谱图第50页,共89页，2024年2月25日，星期天色谱-四极质谱联用仪第51页,共89页，2024年2月25日，星期天仪器结构色谱-四极杆质谱仪结构示意图第52页,共89页，2024年2月25日，星期天仪器与结构第53页,共89页，2024年2月25日，星期天色谱-飞行时间质谱联用仪第54页,共89页，2024年2月25日，星期天二、LC-MS联用仪器发展比GC-MS晚，20世纪80年代中期实用化。主要问题：溶剂去除。LC流速：0.5～数mL

真空泵抽气速度100

L

热不稳定，挥发度低，生物分子电离。关键：特殊接口与电离源技术（提出有27种）实际应用：热喷雾，80年代较多应用，后被APCI取代快原子轰击大气压化学电离：

APCI

电喷雾电离：ESI第55页,共89页，2024年2月25日，星期天1.电喷雾电离接口裂解++++++++++-----++++++++++-----++++++--++++++--蒸发++电荷液滴试样离子准分子离子分析离子

溶剂离子/中性离子对++++++++--其他离子电喷雾电离：毛细管加电压3～６kV，液滴表面电荷密度增加到临界点，静电场的排斥力大于表面张力，液滴越来越小。第56页,共89页，2024年2月25日，星期天电喷雾电离流出液在高电场下形成带电喷雾，在电场力作用下穿过气帘。气帘的作用：雾化；蒸发溶剂；阻止中性溶剂分子。第57页,共89页，2024年2月25日，星期天电喷雾电离分子不裂解，产生多电荷离子，相对分子质量M计算：选相邻峰，电荷n，n+1m1=(M+n)/2m2=(M+n+1)/(n+1)计算结果如表。不适用于非极性化合物第58页,共89页，2024年2月25日，星期天电喷雾电离-多电荷离子第59页,共89页，2024年2月25日，星期天大气压化学电离（APCI）热喷雾(100～120

C)+化学电离；适用于热稳定化合物分析。第60页,共89页，2024年2月25日，星期天大气压化学电离（APCI）毛细管大功率加热器HPLC入口Corona放电针蒸发器雾化气+++++++++++++++++++++++第61页,共89页，2024年2月25日，星期天大气压化学电离

（APCI）

LC-APCI-MS

分析谱图第62页,共89页，2024年2月25日，星期天2.离子阱质量分析器

特定m/z离子在阱内一定轨道上稳定旋转，改变端电极电压，不同m/z离子飞出阱到达检测器。第63页,共89页，2024年2月25日，星期天3.LC-MS(离子阱)联用仪器结构示意图第64页,共89页，2024年2月25日，星期天LC-MS(四极杆)联用仪器结构示意图第65页,共89页，2024年2月25日，星期天三、毛细管电泳-质谱联用仪器与液相色谱-质谱联用仪的原理基本相同。三个问题：1.几十

kV的电压，缓冲溶液，安全；2.毛细管电泳流速1

L/min，直接连接，破坏层流；3.进样量很小（fmol），需要高灵敏度。接口：电喷雾ESI。第66页,共89页，2024年2月25日，星期天CE-ES-MS联用仪器接口示意图第67页,共89页，2024年2月25日，星期天CE-ES-MS联用仪器结构示意图第68页,共89页，2024年2月25日，星期天四、ICP-MS联用仪器（无机质谱）ICP具有很高的原子化效率，可分析众多元素。第69页,共89页，2024年2月25日，星期天ICP-MS联用仪接口示意图第70页,共89页，2024年2月25日，星期天ICP-MS联用仪器特点1.试样在大气压下送入系统；2.试样在高温下进行完全汽化和分解；3.试样原子化、离子化比例高；4.大多数元素产生的是单电荷离子；5.离子能量分散很小；6.ICP不需要真空的离子源；7.离子源处于低电位，可配置简单的质量分析器。缺点：高温，需特殊材料；离子源气压高。第71页,共89页，2024年2月25日，星期天五、MS-MS联用仪器（多级质谱）1.MS-MS联用的作用

得到更多的分子离子和碎片离子的结构信息。早期：主要将亚稳离子作为一种研究对象。亚稳离子：指离子源出来的离子，不稳定，前进过程中发生了分解，丢掉一个中性碎片后生成的新离子。母子关系

结构研究20世纪80年代：软电离技术（ESI，APCI，FAB，MALDI等），基本上都只有准分子离子，没有结构信息，更需要串联质谱法得到结构信息。第72页,共89页，2024年2月25日，星期天MS-MS与GC-MS比较第73页,共89页，2024年2月25日，星期天MS与

MS-MS

联用仪

分析结果对比第74页,共89页，2024年2月25日，星期天2.MS-MS联用的主要串联方式（1）空间串联碰撞活化室将前级质谱仪选定的离子打碎，由后一级质谱仪分析。扇形磁场(B)电场(E)串联方式：BEB；EBE；BEBE四极杆串联方式：三级Q-Q-Q混合型串联方式：BE-Q；Q-TOF；EBE-TOF(飞行时间)MS活化MS选择分析第75页,共89页，2024年2月25日，星期天MS-MS联用方式示意图BE型BEB型Q-Q-Q型三级四极质谱仪第76页,共89页，2024年2月25日，星期天混合型MS-MS联用方式示意图BEQQ组合QEB组合第77页,共89页，2024年2月25日，星期天（2）时间串联MS活化MS前一时刻选定-离子，在分析器内打碎后，后一时刻再进行分析。

两类：离子阱质谱仪；回旋共振质谱仪时间上进行选择。无论是哪种方式的串联，都必须有碰撞活化室，从第一级MS分离出来的特定离子，经碰撞活化后，再经第二级MS进行质量分析，取得更多的信息。

第78页,共89页，2024年2月25日，星期天3.碰撞活化分解软电离：准分子离子峰，碎片很少，缺结构信息。准分子离子

“打碎”

碎片离子质谱分析串联质谱：碰撞活化、碰撞诱导分解(Collisionactivateddissociation,CAD；CollisionInduceddissociation,CID)技术把离子“打碎”。磁式质谱仪：离子加速电压超过1000V，高能CAD方式四极杆，离子阱：不超过100V，低能CID。Ar

碰撞室离子能量EMS1MS2第79页,共89页，2024年2月25日，星期天4.MS-MS串联质谱工作方式和主要信息（1）三级四极(Q-Q-Q)的工作方式和信息Q1：四级杆用于质量分离Q2：四极杆用于碰撞活化(CID)Q3：四极杆用于质量分离主要工作方式有四种第80页,共89页，2024年2月25日，星期天主要工作方式：a子离子扫描：MS1选定-质量，CID碎裂，MS2扫描得子离子谱。b母离子扫描：MS2选定一子离子，MS1扫描，得到的是能产生选定子离子的那些离子，即母离子谱。c中性丢失谱扫描：MS1和MS2同时扫描。保持固定的质量差，只有满足相差固定质量的离子才得到检测。d多离子反应监测：MS1选择一个或几个特定离子，碰撞碎裂,由其子离子中选出一特定离子，只有同时满足MS1和MS2选定的一对离子时,才有信号产生。

第81页,共89页，2024年2月25日，星期天(2)离子阱质谱仪MS-MS工作方式和信息

A阶段：打开电子门，基础电压置于低质量的截止值，使所有的离子被阱集,利用辅助射频电压抛射掉所有高于被分析母离子的离子。B阶段：增加基频电压，抛掉低于被分析母离子的离子。收集即将碰撞活化的离子。C阶段：利用加在端电极上的辅助射频电压激发母离子，使其与阱内本底气体碰撞，D阶段：扫描基频电压,抛射并接收所有CID过程形成的子离子，获得子离子谱。多级子离子谱，还可以提供母离子谱,中性丢失谱和多反应监测（MRM）。

第82页,共89页，2024年2月25日，星期天(3)FT质谱仪MS-MS工作方式和信息

FTMS的扫描方式：快速扫频脉冲对所有离子“同时”激发。

MS-MS功能的FTMS：其快速扫频脉冲可以选择性的留下频率“缺口”，用频率“缺口”选择性的留下欲分析的母离子，其他离子被激发并抛射到接收极。使母离子受激，使其运动半径增大又控制其轨道不要与接收极相撞。此时母离子在室内与本底气体或碰撞气体碰撞产生子离子。再改变射频频率接收子离子。还可由子离子谱中选一个离子再做子离子谱。离子损失很少，FTMS可以做到5~6级子离子谱。

第83页,共89页，2024年2月25日，星期天(4)飞行时间质谱仪的源后裂解

离