药物血浆蛋白结合与药物代谢动力学

药物血浆蛋白结合与药物代谢动力学第一节浓度依赖性血浆蛋白结合及其引起的非线性动力学

一、理论基础

1.浓度依赖性结合的含义

与血浆蛋白有高度亲和力的药物，其结合程度与药物浓度密切相关，这种结合称为药物浓度依赖性结合，简称为浓度依赖性结合。2.浓度依赖性结合引起非线性动力学的原理药物与血浆蛋白结合之间的关系可根据质量作用定律用下列方程式加以描述：

CB＝KnPCF/1+CF（7-1）

CB、CF分别为结合型及游离型药物克分子浓度，K为结合常数，P为血浆蛋白的克分子浓度，n为结合位点数（假定只有一类结合点）。（7-1）式右侧分子、分母各用K除，则：

CB＝nPCF/(1/K+CF)

（7-2）若1/K>>CF,（7-2）式可简化为

CB=nPCFK

（7-3）第2页,共22页，2024年2月25日，星期天

由于总药物浓度Ct为CB与CF之和，则结合型药物分数FB可用下式表示：

FB＝CB/Ct

＝nPCFK/nPCFK+CF

＝

nKP/1+nKP（7-4）

n、K、P均为常数。（7-4）表示1/K>>CF，即药物与血浆蛋白亲和力很低时，FB为一常数，其值为nKP/(1+nKP)。只有在这种情况下，结合才是线性的，即亲和力很低的药物在其浓度改变时，结合型与游离型药物分数（FB与Fu）均保持不变(见图7-1)。结合常数仅为102mol-1的药物，几乎是一条与X轴平行的直线。此时消除速率常数接近一个恒定值，总药物浓度的消除按恒比进行，其血药浓度的衰减符合一级动力学。但当药物具有高度亲和力时，K值大，（7-2）式中1/K>>CF的假设不能成立，（7-4）式亦不能成立，由图7-1可知，当药物浓度改变时，FB及Fu不恒定，随药物浓度而变化，结合变为非线性，即结合呈现明显的浓度依赖性。当药物浓度随时间衰减时，Fu越来越小，消除变得相对越来越慢，此时总药物浓度的衰减不按恒比进行，即血药浓度的经时变化不呈一级动力学函数关系。这表现在对数浓度-时间曲线发生弯曲，依据结合对清除率及表观分布容积影响程度的不同，曲线可表现为下凹或上凸。第3页,共22页，2024年2月25日，星期天血浆药物浓度（mol·10－3）

图7-1药物与血浆蛋白结合的浓度依赖性

(a)结合药物分数(FB)与血浆药物浓度之间的关系；(b)游离药物分数（Fu）与血浆药物浓度之间的关系。曲线上的数字表示药物与血浆蛋白的结合常数（K）第4页,共22页，2024年2月25日，星期天二、浓度依赖性结合引起的非线性动力学的特点

1.转运机制的可饱和性

结合引起的非线性动力学和代谢引起的非线性动力学一样，其动力学过程亦呈现转运机制的可饱和性。对于前者，由于血浆蛋白上的结合位点有限，随浓度不断提高，结合愈趋于饱和，FB变小，而Fu则变大。当K较大（通常K>104）时，以及在药物浓度较高时，这种结合能力的饱和现象愈明显，图7-1中的K>104的两条曲线出现明显转折，此时浓度依赖性结合引起非线性动力学十分显著。2.半衰期随剂量增加而缩短

对于高度结合的药物，特别是亲和力很强、结合位点数有限的酸性药物，其超饱和浓度（剂量）和饱和内浓度（剂量）相对比，有不同的动力学特征。突出表现在剂量增大时，t1/2反而缩短。例如，

保泰松

低剂量时，t1/2达3天左右，高剂量时，t1/2仅3h因剂量增大，Fu升高，可用于消除的药物相对增加（只有游离药物可供消除）。对于浓度依赖性结合引起的非线性动力学来说，结合能力的饱和并不意味着消除机制（代谢或排泄）的饱和；第5页,共22页，2024年2月25日，星期天而对于剂量依赖性代谢引起的非线性动力学，剂量增大，t1/2延长。例如，

水杨酸剂量300mgt1/23h10g20h3.

血药浓度及药-时曲线下面积随剂量增大而呈低比例增加

浓度依赖性结合还将导致剂量与浓度之间的非线性关系。这类药物给药剂量增加，血药浓度即血浆总药物浓度并不成比例增加，其总药物浓度-时间曲线下面积（AUCt）与剂量亦不成比例，并低于其剂量比。丙吡胺在治疗剂量时出现明显的浓度依赖性结合给药150、200、300mg，AUCt分别为100mg剂量的1.3、1.6及2.0倍，低于剂量比。在剂量依赖性代谢引起的非线性动力学中，当剂量超过酶代谢能力时，血药浓度及AUC均随剂量增加而呈现超比例增加，如苯妥英、水杨酰胺等。因为酶代谢能力饱和后，由一级动力学转为零级动力学。第6页,共22页，2024年2月25日，星期天4.超饱和剂量的药理作用远大于根据饱和内剂量所预测的作用强度。医药工作者必需了解给药方案产生的血药浓度是否接近或超过血浆蛋白的最大结合能力，多数药物的有效治疗浓度远低于血浆白蛋白浓度，其剂量的改变不致超过结合饱和点，所引起的动力学及药理作用强度改变不明显；但对某些药物，例如

氯贝特

保泰松

水杨酸盐

丙吡胺

丙戊酸对血浆蛋白具有高度亲和力，在治疗剂量下即可引起明显的浓度依赖性结合，当剂量超过血浆蛋白结合能力时药理作用强度明显增强，出现种种不良反应。例如水杨酸治疗风湿病，每天剂量达4g，大大超过白蛋白结合能力，CF升高，使肝、肾清除机制很快饱和，容易引致水杨酸中毒。第7页,共22页，2024年2月25日，星期天第二节药物血浆蛋白结合对药物代谢动力学参数的影响一、结合对清除率的影响

清除率是表示机体清除药物能力的一种重要参数。“充分搅拌”生理药动学模（“well-stirred”model）特别强调

清除器官血流量Q

器官内在清除率（CLint）

血浆蛋白结合对器官清除率的影响。对于仅受单个器官（如肝脏）清除的药物，器官清除率等于总体清除率（CL），它们之间具有下列关系：器官内在清除率为在不受血流量限制时消除器官消除药物的最大能力，它是药物的固有特征，与药物在器官中的摄取（extraction）直接相关；FB为血浆中结合药物分数。

“充分搅拌”模型将药物分为:

高摄取药物

低摄取药CL＝Q[FB·CLint/(Q+FB)]

（7-5）第8页,共22页，2024年2月25日，星期天高摄取药物利多卡因、哌替啶、吗啡、普萘洛尔等

具有很高的内在清除率,不论结合程度如何，在清除器官中均能全部摄取游离及结合型均可被清除。

高摄取药物的清除率不受结合的影响，与器官血流量成正比,这类药物

FB·Clint>>Q，方程式（7-5）则为：

CL≈Q（7-6）低摄取药物

清除仅限于血循环中游离药物，

内在清除率很低，FBCLint<<Q。这类药物方程式（7-5）可改写为：

CL≈FB·Clint

（7-7）

清除率与血浆蛋白结合率和消除器官的内在清除率有关。从以上讨论看出，血浆蛋白结合率能明显影响低摄取药物的清除率，但对高摄取药物的清除率没有影响。第9页,共22页，2024年2月25日，星期天二、结合对药物分布的影响

结合通常是药物向组织分布的一种限定性因素，使较多的药物储留合于血浆中，以减弱药物的最大作用强度，防止作用大幅度波动以及延长药物作用时间。但结合对表观分布容积Vd的影响很复杂，因不同情况可使Vd减小，增大或使药物呈现选择性分布。

1.结合使Vd减小某些药物如华法林、保泰松、氯贝特、某些磺胺类，丙戊酸等酸类药物在血浆pH下可解离，与白蛋白的结合点数虽有限，但有很高的亲和力，结合百分率很高，这类药物和白蛋白结合十分牢固，不易透过生物膜，表观分布容积很小而半衰期长，如保泰松。结合百分率为98%，K高达2.3×105，Vd只有0.09L/kg(相当于注入的白蛋白的分布容积)，t1/2长达75小时。对于这些药物，结合将起到血浆储留作用，使药物不易进入血管外组织被消除。第10页,共22页，2024年2月25日，星期天2.结合使Vd增大另有一些药物如三环抗抑郁药，酚噻嗪类及某些中枢性镇痛药等弱碱性或非解离药物，与血浆蛋白亲和力低，但结合位点数多，故也有较高的结合百分率值。它们对白蛋白的结合不牢固，且其往往与许多组织结合较强，故分布容积大，较易为消除器官消除，半衰期较前类药物短，如丙咪嗪结合百分率为95%，但K仅为7.0

101M－1，Vd值达40L/kg，t1/2为16小时。3.结合使药物选择性分布还有少数药物如普萘洛尔为代表的高摄取药物，结合使它们呈现选择性肝脏分布。这类药物在肝脏中与组织蛋白的亲和力或结合位点数高于血浆蛋白，其在肝脏中的清除包括血浆中游离型及结合型药物，这类药物的结合实际上不损害药物的血管外分布，而是使其选择性地移向具有高度亲和力或有较多结合位点数的组织，故其分布容积较大而介于上述两类药物之间，因易为肝脏摄取并代谢，故半衰期较上述两类药物均短，如普萘洛尔，结合百分率为93.2%，Vd为3.62L/kg，t1/2仅为167分钟。第11页,共22页，2024年2月25日，星期天三、结合对半衰期的影响

这种影响十分复杂，除与前述的许多因素有关外，还与药物的消除机制有密切的关系。高度结合的药物通过肾小球滤过的能力极低，这类药物中主要通过肾小球滤过而消除者将有特别长的半衰期，如二氮嗪，t1/2为30小时，某些造影剂长达一年以上。但结合通常不影响药物自肾小管的主动分泌过程，如某些青霉素虽然结合百分率达90%以上，但仍能迅速通过肾小管分泌机制而消除，t1/2仅为0.5～1小时。结合对药物的肝脏代谢的影响与对肾排泄类似，即通过扩散过程进入肝细胞被代谢的药物的消除速率与结合程度成反比，如涉及主动转运机制，则消除不受结合的影响。某些药物如普萘洛尔其结合反成为一种载体系统，促进药物被运送至消除部位，加速其消除，从而使半衰期缩短。这说明消除仅限于游离药物时，结合可减慢消除速率，半衰期延长；反之，当消除不限于游离药物从而不受结合影响时，结合可加速消除，使半衰期缩短。

第12页,共22页，2024年2月25日，星期天第三节游离药物浓度监测的必要性

目前，绝大多数文献报告的血药浓度监测和药代动力学研究是通过测定血浆（血清）总药物浓度（即一般所谓的血药浓度）进行的，因为通常采用的血样制备方法，无论是蛋白沉淀法还是有机溶剂提取法，测得的药物浓度是结合型与游离型药物浓度的总和。这在一般情况下是可行的，因为多数药物在治疗药物浓度范围内血浆蛋白结合率比较恒定，总浓度的变化能够反映游离药物浓度的变化，另外，游离药物浓度与总浓度比值的个体差异较药物代谢速率的个体差异小得多。然而，在一些特殊情况下测定总浓度将使结果的解释发生错误，应同时测定游离药物浓度。第13页,共22页，2024年2月25日，星期天1.浓度依赖性结合导致非线性动力学高度结合的药物的蛋白结合率随着药物浓度的改变而改变，总药物浓度的变化与游离药物浓度的变化并不平行，两者具有不同的药代动力学特征，总药物浓度不能反映游离药物浓度，从而影响了血药浓度-药物效应的相关性，此时应测定游离型药物浓度。丙吡胺是血浆蛋白结合引起非线性动力学的典型药物。该药血浆总浓度的药时曲线下面积（AUC）与给药剂量不成正比，但其游离浓度的AUC却与剂量成正比；稳态时游离药物的肾清除率，分布容积与心脏指数相关，不测定游离药物的动力学则导致错误结论。又发现将给药速率增加4倍，其稳态血药浓度只增加2倍，而稳态游离药物浓度同样增加4倍。通过不同药动力学模型研究发现，应用游离药物分数以及游离药物清除率计算得到的理论稳态血药浓度与实测结果十分相符，而应用总浓度清除率计算则与实测结果明显不吻合。另外，游离药物浓度与该药的抗心律失常作用的相关性明显优于总药物浓度。由于该药总浓度呈现非线性动力学，故计算生物利用度时Dost相应面积律不能适用，但游离药物浓度为线性动力学，因而有提出采用测定游离药物浓度的AUC来计算生物利用度。2.疾病影响药物血浆蛋白结合疾病对药物蛋白结合的影响可致通常的血药浓度-药物效应关系发生改变，如仅依据总药物浓度调节剂量将易导致毒性反应。肝、肾疾病时由于血浆白蛋白浓度降低以及内源性蛋白结合抑制物如胆红素、游离脂肪酸增多使许多药物的血浆蛋白结合率降低，游离药物分数增加。如肝硬化病人奎尼丁的游离药物分数几乎增加3倍，肾脏疾病时苯妥英，水杨酸，氯贝特等药物的血浆蛋白结合率明显降低，此时如仍以总浓度的治疗范围调节药物剂量，实际上增加了游离药物浓度，将导致实际上的过量中毒，已有报告在这类病人中苯妥英中毒明显增加。此外，手术与创伤以及营养不良等疾病状态也可使血浆白蛋白降低，致游离药物分数增加。还应指出，某些疾病如炎症、恶性肿瘤、肾移植以及应激状态等，血浆

1-酸性糖蛋白（AAG）增加，可使一些与AAG有较大亲和力的药物（主要为碱性药物）如氯丙嗪、普萘洛尔、利多卡因等的蛋白结合率升高，游离药物浓度降低。第14页,共22页，2024年2月25日，星期天3.药物血浆蛋白结合存在明显个体差异这种明显的个体差异使血药浓度-药物效应关系变得十分复杂，如奎尼丁血浆蛋白结合率范围为50-95%，不同个体间游离药物浓度相差可达10倍之多。总浓度虽属正常范围，结合率低的患者可引起毒性反应，结合率高的患者则可出现疗效降低。血浆样品先经平衡透析或作成超滤液以除去结合型药物后再行测定可得游离药物浓度。近年来，测定唾液药物浓度进行治疗药物监测和药代动力学研究者日渐增多，因唾液为一种无蛋白滤液，测得的为具有药理活性的游离药物浓度。目前国外已对茶碱、苯妥英，酰胺咪嗪、丙戊酸、丙吡胺以及利多卡因的游离药物浓度监测进行了大量研究，其与临床效应的相关性均优于总药物浓度。但在游离药物浓度推荐为常规临床应用之前仍需继续进行大量工作，特别是测定技术的改进。

第15页,共22页，2024年2月25日，星期天第4节药物血浆蛋白结合参数的计算

通常每分子血浆蛋白（如白蛋白）可与多个药物分子结合，即血浆蛋白分子上有多个药物结合点，其中与药物亲和力特别强的结合点称为一级结合点（n1），亲和力较弱者称为次级结合点（n2），n1大致为1~2点，n2约为10~20点，实际上对应于n1的结合常数K1较对应于n2的结合常数K2更为重要。假定血浆蛋白分子上只有一类结合点，且各点之间互不干扰，从（7-1）式可进一步得到下列方程式：

r＝nKCF/1+KCF

（7-8）r为每分子血浆蛋白结合的药物分子数。（7-8）作不同变换则可得到不同的作图方法，从而求解药物与血浆蛋白结合的参数。第16页,共22页，2024年2月25日，星期天一、Scatchard法将（7-8）式进行变换可得：

r/CF＝nK－Kr（7-9）由r/CF对r作图得一条直线，此即所谓Scatchard作图。例如，图7-2为硫贲妥钠与血浆蛋白结合的Scatchard作图，由斜率求得K为12000，由X轴截矩得n为5，Y轴截矩求得nK为60,000。

0Kn=60,000N=5K=12,000r/CF

10-4r/CF

10-40图7-2硫贲妥钠与血浆蛋白的结合r：结合型药物与白蛋白克分子比CF：游离药物浓度实际上按（7-9）式作出的图形有时并非直线，多数场合属双曲线，这表明蛋白分子上至少有两类结合点，此时（7-8）式应写为：

r＝[niKiCF/(1+KiCF)]（7-10）ii

第17页,共22页，2024年2月25日，星期天

这种曲线可拟合为不同类型结合点各自产生的直线的总和。图7-3为水杨酸与小牛血清白蛋白相互作用的实验资料，理论曲线为一双曲线（曲线I＋II），可按两类结合点进行分析，方程式（7-10）变为r＝

，曲线I＋II解析为直线I与直线II，由直线I的斜率及截矩得n1为0.72，K1为25000；由直线II得n2为5.3，K2150。由此可见水杨酸的一级结合点少于次级结合点，但亲和力大大强于次级结合点。近年来采用电子计算机分析更有助于结合点性质的阐明。

(n1K1CF/1+K1CF)+(n2K2CF/1+K2CF) 第18页,共22页，2024年2月25日，星期天○理论曲线●实验点n1=0.72K1n1=18,000n2=5.3K2n2=800K1=25,000K2=150r图7-3水杨酸与小牛血清白蛋白的结合曲线第19页,共22页，2024年2月25日，星期天二、Klotz法由（7-8）式还可得到下列方程式：

1/r=1/n+1/nKCF

（7-11