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文档简介
长沙医学院
组织学与胚胎学实验
(参考资料)
组织学与胚胎学属于医学基础形态科学,组织学实验在于要求学生掌握光学显微镜下
的细胞形态与组织结构特点。因此,必须重点培养学生的显微镜操作技术和组织切片的观
察分析能力(NS组织学自学);胚胎学实验以观察早胚演化基本规律和各时期胎儿发育过
程的形态特征为主(NS的发生学自学)。总体安排36学时,每次2学时,分18次完成,
先后秩序、实验方法、阅片要求可根据具体情况作必要的调整。本实验指导仅供实习参考。
第一章绪论
一、实验课教学目的
组织学与胚胎学(histologyandembryology)的教学分两部分进行,即理论课教学和实验
课教学。后者是在教师的指导下,学生借助实验指导观察组织切片、光镜和电镜照片、幻灯
片、显微投影片、录像片、多媒体课件和胚胎模型等,并进行一些必要的技术操作,其目的
是:
1、通过实验过程中的操作和观察来验证和巩固理论知识,加深学生对理论课内容的理
解。
2、通过对各种组织切片的观察,逐步培养学生学会观察、比较、分析和综合各种现象
的科学方法,培养学生独立思考和独立工作的能力。
3、进行本学科的基本技能训练,使学生能够熟练使用光学显微镜,了解组织和器官切
片的•般制作过程,学会在光镜下正确绘图和描述所观察到组织或器官的形态结构特点。
4、通过胚胎学实验课使学生能用动的、变化发展的立体概念,了解胚胎各种组织、器
官的发育和演变过程。
二、实验室规则
为了实现上述实验课教学的目的,学生应遵守下列实验室规则:
1、遵守学习纪律,不迟到不早退,不随地吐痰和丢纸屑等。
2、保持安静整洁的学习环境,不大声说话,有问题请举手向老师提出。
3、严肃认真,严守操作规程,爱护实验器材,不可擅自拆卸或调换显微镜部件,用完
后使显微镜处于休息状态,填写好贵重仪器使用技术卡并放回原位。
4、每次课前课后要检查玻片,如有损坏或遗失要及时报请教师处理,损坏玻片要赔偿。
5、实验完毕后,将玻片按编号放回玻片盒,填写好切片使用卡并放回原位。
6、每次实验结束后,值日生做好清洁卫生,并整理好台凳,关好实验室门窗、电。
三、光学显微镜的构造、使用方法和保护
I、双目显微镜的主要构造:由机械部分和光学部分组成。
(1)机械部分:镜筒、物镜转换器、滤片槽、载物台、推进器、粗调焦手轮和细调焦手
轮。
(2)光学部分:
①照明器:是显微镜的灯光照明系统,直接组装在镜座内部。
②集光器:是个装在载物台下可以沿着光轴方向垂直移动的透镜系统,它的主要作用
是把照明光线聚集在被观察的物体上。
③光阑:在集光器上装有孔径光阑,它对于物像的质量和分辨力大小有着重要的作用。
④物镜:分低倍、高倍和油镜三种。低倍镜是4X和10X,高倍镜是40义,油镜是100X。
⑤目镜:常用放大倍数为10X的目镜,物像的放大倍数=目镜倍数义物镜倍数。目镜内
有一黑色指针,可作指示镜下结构。
2、单目显微镜的使用方法
⑴取镜:拿单目显微镜时必须一手紧握镜臂,另一手平托镜座底,切忌单手提取以免目
镜脱落。将显微镜放在座位台面10cm以内。
⑵放置组织切片:将组织切片的盖玻片朝上(否则转高倍镜时不但看不到物像,而且容
易压碎玻片)放在载物台上,然后用标本夹固定。用推进器调节玻片,将有组织的部分对准
中央孔。
⑶调节焦距:从侧面观察低倍镜头,旋转粗调焦手轮使镜头接近玻片为止(但镜头不能
接触玻片,江光XS-2的单目显微镜调到载物台不能升为止),从目镜观察,慢慢转动粗调
焦手轮,使载物台下降至物像清楚为止,同时旋转细调焦手轮,边旋转边观察,直到视野物
像清晰为止。集光器上下移、彩虹光圈缩小扩大及电光源调节都可以调节光线强弱。
⑷用显微镜观察组织切片时的正确姿势是正坐,左或右手轻轻转动细调焦手轮调节焦距
使镜卜物像清晰,右或左手转动推进器的手轮调节视野。
⑸转换高倍镜:需转换高倍镜时,必须先在低倍镜下将要观察的部分移到视野正中,然
后直接转换高倍镜头,此时镜下隐隐约约可见物像,再稍微转动细调焦手轮即可看清楚物像。
⑹油镜观察:使用油镜时,也应先用肉眼分清正反面,低倍镜进行初步观察,选好要观
察部位,将其移至视野中央。转开物镜头,在切片上滴一滴香柏油,转换油镜头(100X),
同时肉眼看着将镜头浸入油内。然后慢慢转动粗调焦手轮,直到看清楚物像后,再用细调焦
手轮继续调节进行观察。油镜用完后,须用擦镜纸将物镜及玻片上的镜油拭去,再用擦镜纸
或细绸布沾少许二甲苯擦去物镜上的油渍,然后用擦镜纸轻轻拭抹镜头。
⑺显微镜用毕:观察完毕,取下玻片,按号放回玻片盒内。物镜转成“八”字形,下降
载物台至最低位置,光源关掉,盖上镜罩,填写好使用卡。
3、显微镜的保护
(1)不能拆卸生物显微镜的任何部件或与其它显微镜调换部件,使用前后要检查各部
零件是否齐全,如发现损坏应及时报告教师,以便修理。
(2)目镜、物镜和玻片要保持干净,如观察组织切片时在视野内发现有污物或模糊看
不清时,可照下列方法检查:
(一)移动玻片时污物也随之移动,这是玻片不干净,可用干净的抹布去玻片上的污物。
(二)若移动玻片时污物不移动,可能是目镜或物镜的镜面有污物。可旋转目镜,如污
物随目镜转动而转动就是目镜镜面弄污,否则是物镜镜面弄污。这样可用干净的抹镜纸沿着
镜面一个方向轻轻抹去污物,切勿来回磨擦镜面,防止灰尘磨损镜面,更不要便用其它抹布
或普通纸后抹镜面。必要时可用抹镜纸蘸少许二甲苯抹去镜头的油污,再用一张抹镜纸抹去
二甲苯。
四、组织切片的一般制作方法
一般需经过以下步聚:
1、固定:从人体或动物体内迅速取厚约0.5~1.0cm的组织块,放入固定液固定6~24小
时。固定的目的是使组织细胞在尚未发生死后显著变化之前,用固定液使细胞内的蛋白质凝
固以保持组织原来的结构成分,提高细胞内微细结构的折光率以利于观察,但其形态结构与
活的组织细胞有很大差异。常用的固定液有以下几种:
①10%福尔马林液体(Formalin)
②氯化汞+重倍酸钾+福尔马林(ZenkerFomalin)
③苦味酸+福尔马林+冰醋酸(Bouin氏液)
2、脱水:因组织有水分不能与石蜡相混合,所以固定后的组织放在自来水中冲洗,把
未与组织结合的多余固定液洗去,然后依次经浓度递增的乙醇中,逐步除去组织内的水分。
由于经过乙醇的处理,可把组织细胞内的脂肪溶解,使组织切片上含脂肪成分较多的结构呈
现空泡状。
3、包埋:目的是使组织变硬易于切成薄片,其方法是把脱水后的组织块先经三次二甲
苯除去酒精变透明,再经三次浸泡56℃的石蜡,使其充分渗入组织细胞内,最后把组织块
包埋在石蜡中。在包埋过程中,也能使组织细胞进一步收缩。
4、切片:把组织蜡块固定于小木块上,用切片机切成6-7um厚的蜡片,于温水中使蜡
片张开,裱贴于涂有蛋白甘油的载玻片上,在温箱中烘干。
切片时,若刀刃有缺口,可在组织切片上留下刀痕。裱片不平,则组织切片出现皱褶。
5、染色:目的是使细胞内各微细结构染上不同颜色,提高折光率以利于观察。常用苏
木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)染色,简称HE染色。苏木素为碱性染料,使细胞内
的某些物质如染色质和核糖体等染上蓝色。伊红是酸性染料,可使细胞质、红细胞和胶原纤
维等染上红色。
从上述切片的制作过程可以了解到,一张符合教学要求的组织切片是来之不易的,应认
真爱护。
五、观察组织切片和绘图的要求
1、观察组织切片的要求:组织胚胎学实验课主要内容为观察组织和器官的切片。在老
师指导下,集中注意力,独立地、顺序地观察组织切片。先用肉眼观察切片的一般轮廓、形
态和染色情况。再用低倍镜,后用高倍镜,必要时才使用油镜观察。应重视低倍镜(尤其是
物镜4X)下的观察,它可以了解组织切片的全貌、层次、部位关系。而高倍镜下观察只是
局部的放大,切勿放置切片后,立即用高倍镜观察。目的是训练学生正规的观察及分析方法,
从整体到局部,从一般的结构到特殊和细微的结构。必须注意将玻片上有盖玻片一面置于上
方,切勿反置。
2、绘图的要求:在组织胚胎学的实验过程中,绘图是一项重要的基本技能训练,通过
绘图作记录能加深对所学知识的理解和记忆,并训练绘图技巧。为此要求学生必须做到下列
各项:
①在全面观察的基础上选择有代表性或结构典型的部位,尽可能描绘出•部分能概括整
个组织或器官的主要内容。
②绘图必须实事求是,看到什么内容就绘什么,要注意各种结构之间的大小比例,位置
及颜色,正确地反映镜下所见,不能凭记或照图谱摹画。
③绘图要用红蓝铅笔,在HE染色切片细胞核和嗜碱性颗粒等要用蓝色笔,细胞质和嗜
酸性颗粒等用红色笔分别绘画。
④视野统用圆形表示,其大小的半径约4cm,要求画在报告纸的左上方;绘图后必须
用黑铅笔在图右侧标线及注明各种结构名称,标线要平行整齐,不要交叉或随便拉线。在图
的卜.方要写上第儿次实验课及其名称,图右下方要注明所观察的标本名称、染色方法、放大
倍数和日期等。
六、实验过程应注意的问题
1、实验课前必须复习好理论课的内容,并粗读实验指导的有关内容。
2、每次实验课必须带上实验指导、教科书、教学大纲、笔记本、实验报告本、红蓝铅
笔和铅笔、尺子、小刀及橡皮,以便实验过程中查阅及绘图和描述时使用。
3、取用规定的生物显微镜及玻片盒,并按编定的座号入座。
4、观察组织切片前应了解每张切片的制片方式和染色方法。因为同一结构应用不同的
染色方法,所显示的颜色也不同。而一种染色方法不可能显示切片中组织或细胞的所有结构,
必须通过多种相应的方法来加以补充和完善。
5、不论观察什么组织切片,首先以肉眼观察,大致了解切片中标本的数目、大小和染
色等,判断是实质器官还是中空性器官。然后要低倍镜下观察切片的整体结构,最后才根据
需要转换高倍观察更微细的组织结构。
6、观察切片时要根据实验指导要求有规律地逐一观察,例如观察细胞时先看细胞形态、
大小、分布排列规律,再看细胞核的位置、大小、形状、染色及核仁情况,最后看胞质多少、
染色及胞质内的特殊结构。实质性器官应从外向内观察,中空性器官则由腔向外观察其分层
结构。同时.,要逐步学会进行分析比较形态结构特点,既要识别它们的特殊性,又要认识它
们的共性。通过分析比较来鉴别类似的细胞、组织或器官。
7、注意切面与整体的关系。同一个细胞、组织或器官,由于所切的方向或部位不同,
在切片上所显示的形态结构就不相同。如从细胞的周边部切断,切面上无细胞核,从细胞中
央部切断,则可见细胞核。一个中空性器官,由于切的方位不同,可以呈现完全不同的形态。
因此,观察切片时要将镜卜所见的各种形态结构与整体相联系,这样才能正确判断细胞、组
织或器官的形态结构。
8、注意形态与功能的关系。细胞、组织或器官的功能状态不同,所呈现的形态结构也
有差异,如代谢旺盛的细胞,细胞核较大及染色较淡,核仁明显,提示它的常染色质较多,
DNA在积极转录或复制。合成蛋白质旺盛的细胞,胞质多为嗜碱性,这是粗面内质网和核
糖体发达的原故。因此,观察切片时要联想到细胞、组织和器官的功能状况。
9、注意胚胎发生动态变化。胚胎各器官的发生经历了从无到有、变化急剧、以新替代
旧等过程。有的结构形成后逐渐消失或改建,有的是种系发生的重现。因此,胚胎各器官的
发生是一种连续的动态变化过程,故学习时应建立动态的观点。
10、注意识别切片中的人工假象。在制作标本过程中,由于某些因素的影响,会使组织
切片上出现一些人工假象,如收缩,皱褶重叠、刀痕,气泡、空泡和染料残渣等,观察时应
注意识别。
思考题
1、你使用的显微镜有几个物镜?它们的放大倍数是多少?
2、粗、细调焦手轮是使物镜上下移动还是使载物台上下移动?
3、若用低倍镜能看到组织切片的结构,但转高倍镜时看不到,应考虑什么原因?
4、一般来说,细胞哪部分嗜碱性?哪部分嗜酸性?为什么?
5、电镜下粗面内质网丰富的细胞,在光镜下胞质HE染色的特点如何?
第二章细胞
细胞(cell)是构成有机体的形态和功能的单位,虽然它们的大小和形态各有不同,但
在光镜下都具有相同的结构。在电子显微镜下,它们各部分的结构,即使光镜下看不见的结
构均能显示出来。
实验要求
1、掌握HE染色细胞的主要形态结构,包括细胞核、细胞质和细胞膜所在的位置。
2、掌握电镜下细胞的超微结构。
3、进一步掌握生物显微镜的使用。
实验内容
一、口腔黏膜上皮细胞观察
1、细胞涂片制备
用牙签在口腔内表面(颊侧)刮下一些上皮细胞涂在载玻片上,注意不要涂得太厚。在
涂抹细胞处加2滴0.25%的美蓝溶液,使细胞核着色,盖上盖玻片,在镜下观察。
2、光镜观察
低倍镜可见上皮细胞三五成群。寻找单个存在的上皮细胞,然后转高倍镜。
高倍镜上皮细胞的正面观为多边形,胞质丰富,胞核较小,圆形或卵圆形,位于细胞
中央。
示教
电镜照片⑴细胞膜;(2)内质网;(3)高尔基复合体;(4)线粒体;(5)溶酶体
思考题
1、通常在光镜下可以看到哪些细胞器?
2、试分析能否在光镜下见到细胞膜和核膜?
第三章上皮组织
上皮组织(epithelialtissue)由密集的上皮细胞和少量细胞间质构成。依据其形态和功
能不同,可分为被覆上皮、腺上皮和感觉上皮。本章重点观察被覆上皮。被覆上皮有以下共
同特点:(1)细胞紧密排列成层,细胞间质少。(2)位于体表或衬于管、腔和囊状器官的内
表面。(3)细胞具有明显的极性,分游离面和基底面。(4)细胞基底面借助基膜与结缔组织
连接。(5)无血管。(6)有保护、分泌、吸收和排的功能。
实验要求
1、掌握各种被覆上皮的结构特点,了解其分布上的意义。
2、掌握被覆上皮的共同特点。
3、了解腺上皮的结构特点。
实验内容
一、单层柱状上皮(simplecolumnarepithelium)
材料:动物胆囊,HE染色切片
1、肉眼观察
胆囊壁切片呈长条状。有凹凸不平突起的一面是腔面,突起称皱裳。将玻片对光观察,
可见皱壁表面有一层蓝色结构,即为单层柱状上皮。
2、低倍镜观察
在皱裳表面找到单层柱状上皮。上皮有两个面:游离面即为胆囊内腔面,没有任何组织
相连接,其相对的另一面是基底面,与结缔组织相连接。移动玻片,选择蓝色椭圆形或杆状
细胞核排列整齐的部位转高倍镜观察。
3、高倍镜观察
上皮细胞呈柱状,胞质着浅红色,胞核呈椭圆形或长杆状,着紫蓝色,排列于细胞基低
部(思考:单层柱状上皮还分布在哪里?有何主要功能?)。
作、也:在高倍镜下绘画数个单层柱状上皮细胞,并描述其形态结构特点。
二、单层立方上皮(simplecuboidalepithelium)
材料:动物甲状腺,HE染色切片
1、肉眼观察
切片形状不规则,着色较红。
2、低倍镜观察
表面有结缔组织被膜,腺实质内有许多大小不等的圆形或方块状结构称滤泡。每个滤泡
中央充满粉红色均质块状物为胶状质,其周围可见一层紫蓝色圆形细胞核,即单层立方上皮。
找到圆形细胞核排列整齐的滤泡,转高倍镜观察单层立方上皮特点。
3、高倍镜观察
单层立方上皮由一层正方形细胞紧密排列形成,但细胞分界不明显,胞质着粉红色;胞
核圆,着紫蓝色,位细胞中央。请识别上皮细胞的游离面积基底面。
三、单层扁平上皮(simplesquamousepithelium)
(-)单层扁平上皮正面观
材料:动物肠系膜,镀银染色铺片
1、肉眼观察
铺片为•小块方形棕黄色组织,色深的细条状结构是肠系膜中的毛细血管和结缔组织,
淡黄色部位是单层扁平上皮。
2、低倍镜观察
可见许多不规则的黑色或棕色网格(实为细胞间质,是银颗粒沉积有细胞间质而形成
的)。网格内即为单层扁平上皮细胞。
3、高倍镜观察
单层扁平上皮细胞呈多边形,两相邻细胞交界处呈棕色齿状,细胞中央有一圆形或椭圆
形白色结构即为细胞核的位置。
(二)单层扁平上皮侧面观
材料:动物小肠,HE染色切片
1、肉眼观察
切片呈圆形或半弧形,其管腔面染色较深,显紫蓝色,所要观察的单层扁平上皮衬于小
肠壁的外表面。
2、低倍镜观察
沿小肠壁的外表面观察,可见些呈椭圆形的紫蓝色细胞核(有的因收缩呈圆形),即
为单层扁平上皮(又称间皮)的侧面形态。
3高倍镜观察
单层扁平上皮细胞核呈椭圆形或圆形,略突向表面。细胞核周围的胞质菲薄,呈粉红色
细线状。有些部位的胞质常与基底面组织紧贴,故不易分辨(思考:单层扁平上皮还分布在
何处?有何其它名称?)o
四、假复层纤毛柱状上皮(pseudostratifiedciliatedcolumnarepithelium)
材料:动物气管,HE染色切片
1肉眼观察
切片是气管横切面,呈圆形或半弧形(有的切片呈长条片状)。在管腔面或半弧形切片
的凹面(或长条切片的侧)可见一细条深色的结构,即为所要观察的假复层纤柱状上皮。
2、低倍镜观察
上皮较厚,可见儿层细胞核,呈紫蓝色;上皮游离面有纤毛,基底面可见一细条粉红色
结构,即为基底膜。
3高倍镜观察
上皮细胞的形态在切片上分辨不清,但可根据细胞核的位置及形态区别几种细胞。细胞
核大致可分三层:紧贴基膜的一层细胞核小,着色深,是锥体形细胞的核;中间层细胞核呈
卵圆形,是梭形细胞的核;近游离面的细胞核为椭圆形,是柱状细胞的核。柱状细胞的游离
面有纤毛(思考:纤毛是怎样形成的?电镜结构如何?有何功能?)。在柱状上皮细胞之间
夹有杯状细胞(gobletcell),因杯状细胞的黏液被溶解,故呈空泡状,底部狭窄,胞核位于狭
窄处之上。
五、复层扁平上皮(stratifiedsquamousepithelium)
材料:动物食管,HE染色切片
1、肉眼观察
切片是食管横切面,管腔面收缩形成许多皱裳,使管腔变小而不规则。沿管腔表面有一
层紫蓝色结构,即为复层扁平上皮。
2、低倍镜观察
在管腔面找到复层扁平上皮,其细胞层数约数十层,基底面呈波状与结缔组织连接。结
缔组织形成乳头(色较浅)突到基底层的凹面(为什么?)。从基底面到游离面,细胞分界
不清,但可从细胞核的形态变化观察其特点。
3、高倍镜观察
从基底面到游离面观察各层上皮细胞形态特点,基底层细胞矮柱状(一层),核呈卵圆
形,着色深,排列紧密,胞质很少(有些部位基底层细胞核可见2~3层,是因为切斜了;有
些部位在上皮内可见圆形或不规则形的浅色结构,是因上皮切斜,切到了深面突入基底层凹
面的结缔组织乳头,乳头周围染色较深部分即为上皮基底层细胞)。中间部有儿层多边形细
胞,分界清楚(细胞间的分界线实为细胞间质),胞质着色浅,胞核圆,位细胞中央。近游
离面有数层扁平细胞,胞核椭圆形,其长轴与表面平行(思考:复层扁平上皮还分布在何处?
有何名称及结构特点?)。
作、I1:有高倍镜下绘画部分复层扁平上皮,并描述其形态结构特点。
如何描述复层扁平上皮的形态结构特点?例:
复层扁平上皮由多层细胞组成,可区分游离面和基底面。根据细胞形态不同大致分三种
细胞层:游离面有几层扁平状细胞,细胞核椭圆形,细胞长轴和细胞核的长轴均与游离面平
行;中间部数层多边形细胞,胞核间距较大,细胞分界清楚,胞质着色浅,胞核圆形,位于
细胞中央;基底层细胞紧贴基膜,是•层低柱状细胞,胞质少,胞核椭圆形,着色深,排列
紧密。上皮基底面凹凸不平,借以扩大与深面结缔组织的接触面。
六、变移上皮(transitionalepithelium)
材料:动物膀胱,HE染色切片
1、肉眼观察
玻片上有两条厚薄不一的组织,其中较厚的•条是收缩状态的膀胱壁,它有一个面可见
波浪状突起,即为管腔面,其表面呈紫蓝色的结构即为变移上皮。另一条较薄的组织是扩张
状态的膀胱壁。
2、低倍镜观察
收缩状态的膀胱壁有突起的一面,沿突起表面观察可见变移上皮,上皮细胞有多层,基
底层与结缔组织连接面较平,没有结缔组织乳头(这是与复层扁平上皮区别之一)。扩张状
态的变移匕皮细胞层数约3-4层,游离面和基底面都较平整(这是与复层扁平上皮区别之
二)。
3、高倍镜观察
膀胱收缩状态时,细胞层数多,表层细胞体积较大,为立方形或倒置的梨形(这是与复
层扁平上皮区别之三),近游离面的胞质染色较深(较红),称壳层•中间层细胞呈多边形,
基底层细胞呈矮柱状。扩张状态的膀胱,变移上皮薄,各层细胞趋向扁平,只有2~3层扁平
细胞。
七、腺上皮(glandularepithelium)
材料:动物颌下腺,HE染色切片
1、肉眼观察
不规则粉红色组织切片。
2、低倍镜观察
可见许多腺泡,染色深的是浆液性腺泡,染色浅的是黏液性腺泡。颌下腺是以浆液性腺
泡为主的混合腺,着色浅的黏液性腺泡较少,成群分布于着色深的浆液性腺泡之间。混合性
腺泡的特点是:在一个黏液性腺泡的一侧可见由几个染色深的浆液性腺细胞构成的半月。
观察时,注意从细胞的形态、位置、细胞质的染色深浅区别辨认腺泡的结构特点。
示教
1、分离假复层纤毛柱状上皮的细胞
2、电镜照片(1)微绒毛;(2)纤维;(3)连接复合体;(4)桥粒;(5)缝隙连接
思考题
1、在组织切片上,根据哪些形态结构特点确认上皮组织?
2、比较复层扁平上皮和变移上皮在形态结构和功能上有何不同?
3、镜下如何区分浆液性腺泡及黏液性腺泡和混合性腺泡?
第四章结缔组织
结缔组织(connectivetissue)由细胞和大量细胞间质构成。人体内结缔组织种类多,分布
广,形式多样。它们具有相同的特点:(1)细胞种类多,分散在大量的细胞间质中,细胞间
质包括基质和纤维。(2)都起源于胚胎时期的间充质。本章主要观察疏松结缔组织、致密结
缔组织、软骨组织和骨组织。观察时以疏松结缔组织为重点,并与致密结缔组织比较。结缔
组织分布于器官、组织和细胞之间,具有连接、营养、保护和防御功能。
实验要求
1、掌握疏松结缔组织在组织切片上的形态结构特点。
2、熟悉骨的形态结构特点及骨发生的两种形成方式之------软骨内成骨。
3、了解致密结缔组织和脂肪组织的形态结构特点及软骨组织的结构特点和分类。
实验内容
一、疏松结缔组织(looseconnectivetissue)
材料•:动物皮下组织,特殊染色平铺片
为显示疏松结缔组织中巨噬细胞的形态特点,在活体小鼠皮下注射台盼蓝染料,存活数
日后处死,取其皮下组织,用分离针分离平铺于玻片上,经固定、脱水和复合染色且即可在
镜下观察。这种铺片在光镜下可见有两种纤维(胶原纤维、弹性纤维)和两种细胞(成纤维
细胞、巨噬细胞)。有时可见二五成群的肥大细胞。
1、肉眼观察
铺片呈紫红色不规则组织块。
2、低倍镜观察
选择薄而较透明的部位观察。可见纵横交错,粗细不等的粉红色纤维是胶原纤维
(col-lagenousfiber)o有的胶原纤维呈波浪形,有的较直,有的分散较细,有的聚集成束。
混杂在胶原纤维之间的细如发丝的紫蓝色纤维即为弹性纤维(elasticfiber)»弹性纤维常为单
条直行,有分支,交织成网,断端常卷曲。网状纤维(reticularfiber)用浸银法方可显示,故
此片看不到,上述纤维之间有成纤维细胞和巨噬细胞。胞质中可见紫蓝色颗粒的是巨噬细胞。
3、高倍镜观察
选择纤维较分散、细胞较多的部位观察,可见下列细胞:
(1)成纤维细胞(fiboblast);只见浅紫色椭圆形细胞核,胞核中有1~2个核仁。细胞质
染色很浅,隐约可见淡紫色的胞轮廓,有的细胞质模糊不清。此种细胞数量最多。
(2)巨噬细胞(macrophage):细胞轮廓清楚,形态多样,呈卵圆形或不规则形;细胞核
小着色深(注意与成纤维细胞比较),胞质嗜酸性,其中可见吞噬的紫蓝色台盼蓝染料颗粒。
(3)肥大细胞(mastcell):细胞三五成群分布,胞体呈圆形或卵圆形,胞质中充满着色深
的具有异染性的嗜碱性颗粒(因颗粒太密集而不能分辨)。
二、疏松结缔组织
材料-:动物食管,HE染色要片
1、肉眼观察
食管横切面,呈圆形,中央有细小不规则管腔。
2、低倍镜观察
找到管壁最外层,染色稍浅,即为疏松结缔组织切面。
3、高倍镜观察
在疏松结缔组织切片,主要看到的是胶原纤维和成纤维细胞。胶原纤维束粗细不等,染
成粉红色,被切成长短不一的纵、横和斜三种断面。成纤维细胞分散在纤维束之间,胞质不
明显,只见椭圆形或梭形的细胞核。在纤维束之间可看到一些小血管的横、斜切面。疏松结
缔组织切片中的其它细胞和纤维需特殊染色才能看到。
作业:在高倍镜下绘画部分疏松结缔组织,并描述其形态结构特点。
三、腱(tendon)
材料:动物肌腱。HE染色切片
1、肉眼观察
长条形是腱的纵切面,短而近似圆形的是腱的横切面。
2、低倍镜观察
在腱的纵切面上,可见粗而直的胶原纤维束紧密平行排列,分布在胶原纤之间的腱细胞
(tendoncell)核成单行排列,呈紫蓝色。在横切面上,可见粗细不一的纤维束横切面,纤维
束之间的腱细胞核。
3、高倍镜观察
腱细胞的胞核呈长梭形,胞质不明显。
四、脂肪组织(adiposetissue)
材料:人手指皮肤,HE染色切片
1、肉眼观察
切片呈长条状,根据染色深浅分三部分:着色最深的•面为表上,靠近表皮的浅染区是
真皮(为不规则致密结缔组织),真皮深色更浅的部分是皮下组织,由大量脂肪组织和少量
疏松结缔组织结构成。
2、低倍镜观察
找到圆形空泡状的脂肪细胞。许多空泡状的脂肪细胞聚集成团,被结缔组织包囊形成脂
肪小叶。
3、高倍镜观察
脂肪细胞较大,呈圆形或多边形。胞质呈空泡状,胞核及少量胞质被挤到细胞一侧,呈
梭形紫蓝色。
五、透明软骨(hyalinecartilage)
材料:动物气管,HE染色切片
1、肉眼观察
切片为气管横切面,管壁内呈浅蓝色“C”形或半弧形结构是透明软骨。
2、低倍镜观察
透明软骨的周边致密结缔组织结构成的软骨膜,呈粉红色。透明软骨的基质从外到内由
浅粉红色变成蓝色或紫蓝色(为什么?),基质中含有胶原原纤维,但它的折光性与基质相
同,故纤维无法分辨。软骨细胞位于软骨基质形成的软骨陷窝(lacunas)内,每个软骨陷窝周
围都有一圈深蓝色或紫蓝色基质即为软骨囊(capsule)。靠近软骨膜处的软骨细胞较小,呈扁
圆形,单个存在,渐进中部的软骨细胞逐渐增大,呈圆形或椭圆形。常见2~4个软骨细胞聚
集在一起,称为同源细胞群,切片上看到在软骨细胞周边的小腔隙(空白)是因固定标本时
软骨细胞收缩露出的部分软骨陷窝,在活体上软骨细胞占据整个软骨陷窝。
3、高倍镜观察
软骨细胞呈圆形或椭圆形,胞核位细胞中央,胞质很少。
作业:在高倍镜下绘画部分透明软骨,并描述其形态结构特点。
六、骨(bone)磨片
材料•:人长骨干(密质骨)横截面,镀银或龙胆紫染色磨片。
1、肉眼观察
镀银染色的磨片呈黄色:龙胆紫染色的磨片呈紫蓝色。
2、低倍镜观察
浏览整个标本,此磨片是长骨骨干部横截面的一部分,其骨髓腔面和外表面分别有内、
外环骨板,但磨片中内、外环骨板常被磨掉而不易见到。选择着色浅处(即较薄部位)观察:
可见许多同心圆状结构,即为骨单位(osteon),也称哈弗斯系统(Haversiansystem)»是神经和
血管的通道。磨片中神经和血管已不存在,中央管被染料沉积而呈黑色或深蓝色。以哈弗斯
管为中心,哈弗斯骨板呈心圆排列。在骨单位之间可见•些不规则骨板即间骨板(interstitial
lamella)»
3、高倍镜观察
选择一个结构比较清晰的哈弗斯系统观察:可见以哈弗斯管为中心的数层同心圆排列的
哈弗斯骨板。骨板内或骨板之间有许多着色深的小椭圆形结构即骨陷窝(因染料沉积而呈黑
色或紫蓝色)骨陷窝向四周伸出许多细线样结构即骨小管。相邻骨小管彼此交通。哈弗斯系
统最内层的骨小管可以直通哈弗斯管。骨陷窝和骨小管是骨细胞(osteocyte)胞体和突起分别
所在的位置,但骨磨片中的骨细胞已不存在。
作业:在高倍倍下绘画个哈弗斯系统,并描述其形态结构特点。
七、骨切片
材料:人长骨干横切面,HE染色切片
1、肉眼观察
一块不规则或长方形粉红色骨切片。
2、低倍镜观察
外表面有骨膜,为致密结缔组织。骨膜下有与骨干表面平行排列的骨板,称外环骨板;
内表面有与骨干表面平行排列的内环骨板。内、外环骨板之间有哈弗斯系统。每个哈弗斯系
统中央为哈弗斯管,管内有神经和血管。在相邻两层骨板中,可见点状和横条状的纤维束(思
考:如何理解各骨板中纤维排列方向)。
3、高倍镜观察
骨板内和骨板之间有许多骨陷窝,在活体上,骨陷窝被骨细胞占据,而在切片上,骨细
胞因被固定收缩而偏于一侧。
思考题
1、在组织切片上如何区分上皮组织和结缔组织/
2、在HE染色切片上,可见到疏松结缔组织的哪些成分?
3、试比较三种软骨组织有何异同/
4、简述密质骨的结构特点?
5、软骨和骨获取营养的方式有何不同?营养骨的血管和神经怎样进入骨髓腔?
第五章血液和血细胞的发生
血液(blood)由血细胞和血浆结构构成,属于广义的结缔组织,血细胞主要由骨髓生成。
当血液流经骨髓组织时,成熟的红细胞、白细胞和血小板加入循环血液,及时补充衰老死亡
的细胞成分。最常采用血涂片的方法,观察血液和骨髓组织的细胞成分。
实验要求
1、掌握Giemsa染色血涂片中红细胞及各类白细胞形态;熟悉血小板的形态。
2、熟悉白细胞分类计数方法。
3、了解各类幼稚血细胞和骨髓组织细胞的形态特点。
实验内容
一、血涂片(bloodsmear)
材料:人外周血液涂片,Giemsa染色
1、肉眼观察
经染色的血涂片为淡橘红色,因制作方法不同于切片,其外观也有别于切片材料。涂片
标本一般较细腻、平整,稍加注意即可辨认。
2、低倍镜观察
数量众多的红细胞分散或成群附着于玻片上,在红细胞群之间可看到细胞核染成紫蓝色
的白细胞。挑选白细胞较集中的区域,转高倍镜对各类血细胞逐一仔细观察。
3、高倍镜观察
(一)红细胞为镜下主要细胞,正常为圆形、卵圆形,体积大小较接近,细胞无核,
胞质呈橘红,多数红细胞周边着色较深、中央着色浅。
(二)白细胞观察时应根据细胞大小、胞质内特殊颗粒的类型、胞质染色特征和细胞
核形态及分叶特征,区分出五种不同类型的白细胞。中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒
细胞、淋巴细胞和单核细胞。
中性粒细胞:数量最多,细胞圆形或卵圆形,直径约10~12微米,细胞核形态多样,核
可看到分叶,1~4叶,甚至多叶都可观察到,胞质内可见数量较多、细小的深色颗粒。
嗜酸性粒细胞:胞体较大,数量少于中性粒细胞,直径约12~16微米,核形态较饱满,
以2~3叶多见,胞质内充满粗大、均匀、红色或暗红色球形颗粒。
嗜碱性粒细胞:数量少不易找到,细胞大小与中性粒细胞相近。细胞核着色浅,分叶不
明显,胞质内可见分布不均匀、形态不规则、大小不等的深蓝色颗粒。
淋巴细胞:外周血涂片可以观察到中、小淋巴细胞两种,数量较多。小淋巴细胞圆形,
体积大小与红细胞相近,核大圆形和肾形多见,核因异染色质多聚集成块而深染,一侧常可
见到凹痕,少量天蓝色胞质环绕胞核;中淋巴细胞体积较大,以卵圆形多见,核形多样(肾
形、卵圆形、马蹄铁形),胞质较小淋巴细胞多,胞质内可见小量嗜天青颗粒。
单核细胞:体积最大,直径约14~20微米,细胞形态卵圆、椭圆多见,细胞核形态与中
淋巴细胞核类似,但核内异染色质量较少,染色较浅,呈网格状。胞质较丰富,染色灰蓝,
胞质内可见少量嗜天青颗粒。
血小板:体积较小(约红细胞直径1/4~1/3)»形态多样,因血小板与凝血有关,在制作
应血涂片时,由于制作者的操作技术原因,常发生聚集,造成分布上的不均等和成群现象,
观察时应注意。
作业:在高倍镜下绘画红细胞和各种白细胞,并分别描述它们的形态结构特点。
二、血涂片的制作及Giemsa染色液的配制
1、血涂片的制作:自手指尖处采集适量血涂制血片(步骤从略);待涂片自然干燥后(数
分钟),入甲醇液固定2~4分钟;涂片取出等甲醇干燥后,用Giemsa稀释染液(1:10比例
用磷酸缓冲液稀释)染色15-20分钟;自来水充分冲洗干净(有条件时先用不同pH度的缓
冲液分色,认定染色达到要求后,再自来水冲洗);镜检合格后,经干燥、透明等常规步骤
后,树胶片保存。
2、Gismsa染色液的配制
Gismsa染料粉剂1g
甲醇50ml
丙三醇(甘油)50ml
先将固体Gismsa染料放入研钵内,加少许甘油尽量充分研磨后,再用称量的甘油和甲
醇溶解,放置备用(如果是现配现用,最好在稀释前入60C温箱内加速溶解2小时以上)。
三、白细胞分类计数
血液中各种白细胞是有一定比例的,临床上常用百分比来记述(又称为白细胞分类计
数)。当患某些疾病时,白细胞的分类计数也会相应地发生改变。学会计数方法有助于了解
疾病情况和帮助诊断。计数方法如下:
1、请选择血涂片均匀,染色较浅的部位置低倍镜下,首先认出无细胞核且数目最多的
红细胞,其次找出细胞核染成紫蓝色的各种白细胞,转高倍镜观察。
2、高倍镜卜一辨认各种白细胞。按图示移动血涂片,把每个视野内所观察的白细胞分类
记录于白细胞分类计数表内,至细胞总数为100个时,即可计算出各种白细胞的百分比计数。
白细胞分类i•数表
白细胞类型102030405060708090100积累正常值
中性杆状1%~4%
粒细
胞分叶50%~75%
嗜酸性粒细胞0.5%~3%
嗜碱性粒细胞0-1%
淋巴细胞25%~30%
单核细胞3%~8%
其它
示教
1、网织红细胞
2、骨髓涂片
3、血块切片
4、电镜照片(1)嗜酸性粒细胞;(2)嗜碱性粒细胞;(3)血小板
思考题
1、试述红细胞、白细胞和血小板的形态结构特点,正常值和功能。
2、简述红骨髓的组织结构。
3、试述血细胞发生熟过程中形态变化的般规律。
第六肌组织
肌组织(muscletissue)主要山肌细胞组成,肌细胞之间有少量结缔组织和毛细血管。由于
肌细胞细而长,所以又称肌纤维。根据结构和功能特点,将肌组织分为骨骼肌、心肌、平滑
肌三种。根据肌纤维的形态、胞核的位置及数量、胞体有无横纹等,比较并区分三种肌纤维。
结合电镜照片的超微结构,理解肌纤维收缩的结构基础。
实验要求
I、掌握肌组织的形态结构特点及三种纤维在不同切面的光镜形态结构特点。
2、掌握骨骼肌纤维和心肌纤的电镜结构特点。了解平滑肌的电镜结构。
实验内容
一、骨骼肌(skeletalmuscle)
材料:动物舌,HE染色切片
1、肉眼观察
凹凸不平,染成深蓝色的是舌黏膜上皮,其深面为红色的骨骼肌组织。
2、低倍镜观察
舌黏膜上皮是复层扁平上皮,其深面的骨髓肌纤维有纵、横、斜等切面。肌纤维之间有
少量结缔组织,为肌内膜(endomusium)。想一想什么是肌束膜(perimysium)?什么是肌外膜
(epimysium)?
3、高倍镜观察
(1)纵切面:骨骼肌纤维呈长圆柱形,有多个细胞核,位于肌纤维的周边。肌浆
(sarooplasm)丰富。缩小光圈,将光线适当调暗,容易看到明暗相间的横纹(atriation),这就是
明带(1带)和暗带(A带)。肌纤维内与长轴平行的细丝为肌原纤维(myofibril)。
(2)横切面:肌纤维呈圆形或多角形,大小一致,细胞核位周边,胞质内有密集的细点
状结构,为肌原纤维的横切面。
二、心'肌(sardiacmuscle)
材料:动物心脏,HE染色切片
1肉眼观察
为一块粉红色组织
2、低倍镜观察
心肌纤维排列方向不一致,有纵、横、斜等切面。肌纤维之间有少量结缔组织利毛细血
管。
3、高倍镜观察
(1)纵切面:心肌纤维呈短柱状,有分支,相互吻合。心肌纤维胞质有肌丝束呈较深
的粉红色,也有明暗相间的横纹,但不如骨骼肌的明显。核呈卵圆形,位于细胞中央,有时
可见双核。细胞核两端无肌丝束,肌浆较丰富,故染色较浅。心肌纤维连接处染色深,称闰
盘(intercalateddisk),呈直线或梯形。观察电镜照片,掌握闰盘的超微结构。
(2)横切面:肌纤维呈大小一的块状。细胞核位于肌纤维中央,核的周围染色较浅,
有的无细胞核,只有浅染区,有的小而无浅染区又无细胞核(思考:这种不同形态的横切面
说明什么?)。
三、平滑肌(smoothmuscle)
材料:动物小肠,HE染色切片
1、肉眼观察
凹凸不平面为小肠的腔面,外层深红色部分即平滑肌形成的肌层。
2、低倍镜观察
主要由平滑肌纤维和极少量结缔组织构成,可见平滑肌纤维的纵、横和斜各种切面,
找到肌纤排列较疏松的部位用高倍镜观察。
3、高倍镜观察
(1)纵切面:平滑肌纤维长梭形,核位于细胞中央,呈杆状、椭圆形或扭曲形。
(2)横切面:呈小块状,大小不一。有的切面可见圆形的细胞核,有的则看不到(思
考:想一想为什么?)
作'也:在高倍镜下绘画平滑肌纤维的纵、横切面,并描述其结构特点。
示教
1、骨骼肌横纹
2、心肌闰盘
3、电镜照片(1)骨骼肌超微结构立体模式图;(2)骨骼肌纤维;(3)心肌纤维;(4)
平滑肌纤维
思考题
1、试述肌组织的基本特点。
2,在组织切片上如何区别骨骼肌、心肌和平滑肌?
3、试述骨骼肌肌原纤维的光镜和电镜结构特点。
第七章神经组织
神经组织(nervetissue)是构成神经系统最主要的组织成分,由神经细胞和神经胶质细胞
组成。神经细胞是神经系统的结构和功能单位,亦称神经元(neuron),它们具有接受刺激、
整合信息和传导冲动的能力。神经元可分为胞体和突起两部分,突起乂分树突(sendrite)和轴
突(axon)。神经元与•神经元或与非神经元细胞之间是通过突触(synapse)传递信息。神经胶质
细胞(neuroglialcell)不具有传导神经冲动的特性,对神经元起支持、保护、绝缘和营养等作
用。两着的关系极为密切。
实验要求
1、掌握神经元的形态结构特点和化学突触的电镜结构特点。
2、掌握有髓神经纤维的结构特点。
3、了解神经末梢和神经胶质细胞的基本形态结构。
实验内容
一、多极神经元(multipolarneuron)
材料:动物脊髓,HE染色切片
1、肉眼观察
可见脊髓横切面中央部染成深红色蝴蝶形的部分为灰质,灰质有两个较窄的突起称后
角,两个较宽的突起称前角。其余染成浅红色的部分为白质。
2、低倍镜观察
辨认灰质和白质,以及灰质的前角和后角。在前角可见许多体积较大的多级神经元(运
动神经元,motorneuron),成群排列。神经元之间可见许多小而圆的细胞核,即为神经胶质
细胞核,胞质末能显示。选择一个突起较多、胞体较大而又切到细胞核的运动神经元进行高
倍镜下观察(思考:神经元胞体与神经胶质细胞核之间是什么结构?)。
3、高倍镜观察
神经元胞体切面呈三角形或多边形,有多个突起,它们多数是树突,不易见到轴突,为
什么?细胞核大而圆,位于胞体的中央,异染色质少,核仁明显。胞体及树突内有染成紫蓝
色呈块状或粒状分布的尼氏体(Nisslbodies),在电镜下它们的结构怎样(见示教电镜照片)?
轴丘(axonhillock)和轴突处则没有尼氏体,试根据此特征区分树突与轴突。
作业:在高倍镜下绘画一个运动神经元及其周围的神经胶质细胞(和神经纤维),并描
述其形态结构特点。
二、神经原纤维(neurofibril)
材料:动物脊髓,镀银染色切片
1、肉眼观察
染成深色蝴蝶形的部分为灰质,其余染成浅色的部分为白质。
2、低倍镜观察
辨认前角和后角。可见前角有许多体积较大的运动神经元(多极神经元)。
3、高倍镜观察
可见神经元胞体与突起内均有棕褐色细丝状的神经原纤维,它们在胞体内交织成网状,
在突起内则平行排列。
三、有髓神经纤维(myelinatednervefiber)
材料:动物坐骨神经,HE染色切片
1、肉眼观察
长索状的是神经纵切面,圆形的是神经横切面。
2、低倍镜观察
坐骨神经的外面有结缔组织包裹,称神经外膜。神经外膜向内伸延形成神经束膜,把神
经分成若干神经束。神经束膜的结缔组织伸入神经束内,分布在每一条神经纤维的周围称为
神经内膜。
3、高倍镜观察
纵切面:选择…条典型的神经纤维进行观察。先观察条有郎K结(nodeofRanvier)的神
经纤维,其中央的一条染成红色的线条为轴突,其外有髓鞘(myelinsheath)包着。由于制片
时髓鞘中的类脂被溶解,故髓鞘呈粉红色的网状。髓鞘边缘可见染色较浅、椭圆形的施万细
胞细胞核,应注意V神经纤维之间的成纤维细胞细胞核相区别,后者染色较深且细长。郎飞
结处无髓鞘,轴膜裸露。相邻两个郎S结之间的一段神经纤称为结间体。
横切面:神经纤维横切面呈圆形,中央淡红色的圆点为轴突。轴突的外周是髓鞘,有时
可见髓鞘边缘有施万细胞核。
学生制备新鲜的神经纤维标本:剪取青蛙部的坐骨神经,放在片上,用针分离后用美蓝
染色,并盖上盖玻片。选神经纤维分散的部位观察,可见轴突位于神经纤的维中央(透明发
亮的结构),轴突两侧呈暗绿色发亮的结构为髓鞘。
作业:在高倍镜下绘画有髓神经纤维(纵切面和横切面),并描述其结构特点。
四、触觉小体(tactilecorpuscle)
材料:人手指皮,HE染色切片
1、肉眼观察
标本染色紫红的一面为手指掌侧皮肤的表面,深面染色浅。
2、低倍镜观察
在复层扁平上皮基底面凹凸不平,上皮下面的结缔组织突向上皮,形成许多乳头。在结
缔组织乳头内可见卵圆形的触觉小体。
3、高倍镜观察
触觉小体内有许多扁平排列的细胞,外包结缔组织被囊,其中的轴突一般不能分辨。
五、环层小体(lamellarcorpuscle)
材料:人手指皮,HE染色切片
1、肉眼观察
标本染色紫红色的一面为手指掌侧皮肤的表面,深面染色浅。
2、低倍镜观察
在皮下组织内寻找圆形或卵圆形呈同心圆结构的环层小体。
3、高倍镜观察
环层小体中央有一条均质状的圆柱体,很难辨认其中的轴突。圆柱体周围有许多层同心
圆排列的扁平细胞。
六、运动终板(motorendplate)
材料:动物肋间肌,氯化金浸染压片
1、低倍镜观察
在压片上寻找到染成橘红色或淡紫色的骨骼肌纤维,可在其上面见到染成黑色的神经纤
维。
2、高倍镜观察
神经纤维的末端形成爪状分支,贴附在骨骼肌纤维表面。仔细观察单根神经纤维末端膨
大的纽扣状或爪状紧贴肌膜组成的运动终板。
七、神经胶质细胞(neuroglialaell)
材料:动物大脑,镀银染色切片
1、肉眼观察
标本表面着色深为皮质,皮质深面染色浅,为髓质。在皮质和髓质处观察神经胶质细胞。
2、低倍镜观察
在皮质和髓质内寻找儿种神经胶质细胞。
3、高倍镜观察
(1)原浆性星形胶质细胞(protoplasmiccell)多位于皮质内,突起粗短,数目多,分支也
多,此种细胞外形似绒球。(2)纤维性星形胶质细胞(fibrouscell)多在髓质内,多位于血管
周围。突起细长,数目较少。突起刚直,分支少,表面光滑。有的突起末端附着在血管壁上,
此种突起末端膨大称为脚板(endfeet)。(3)少突胶质细胞(oligodendrocyte)胞体小,突起数目
少,分支不多,常呈串珠状。(4)小胶质细胞(microglia)胞体呈梭形,突起较少,但上面有
许多小棘。
示教
1、小脑蒲肯细胞
2,肌梭
3、突触
4、电镜照片(1)尼氏体;(2)突触;(3)髓鞘
思考题
1、神经元有哪些类型?神经元的形态结构有何特点?
2、突触的类型?化学突触的结构如何?
3、有髓神经纤维有何结构特点?神经、神经束、神经纤和神经原纤维的相互关系?
4、神经胶质细胞的种类、结构特点和功能如何?
5、神经胶质细胞和神经元有何区别?
第八章神经系统
神经系统(nervoussystem)由脑、骨髓及与它们相连的脑神经、脊神经、自主神经和神经
节共同组成,神经系统主要由神经组织构成。肉眼观察新鲜的或固定染色的脑和脊髓标本,
都可区分灰质和白质两部分,灰质主要成分是神经元的胞体、树突以及与它们联系的神经纤
维和末梢,白质主要由神经纤维束构成。由于大脑和小脑的灰质在表层故乂称皮质,白质位
于皮质下面称髓质。
实验要求
1、掌握大脑皮质、小脑皮质及脊髓灰质的组织结构。
2、了解脊神经节、交感神经节的结构特点。
实验内容
一、脊神经节(spinalganglia)
材料:动物脊神经节,HE染色切片
1、肉眼观察
脊神经节呈椭圆形。
2、低倍镜观察
假单极神经元排列成群,在细胞群之间有平行排列的有髓神经纤维束O
3、高倍镜观察
假单极神经元的胞体大小不一,呈圆形或椭圆形,胞质内有呈细点状的尼氏小体。核圆
形,染色质少,呈空泡状位于细胞的中央,核仁清楚。胞体的突起在此标本不易观察,假单
极神经元的突起自胞体发出后在胞体附近盘曲,然后分支成T字形(思考:T字形分支,其
终末分布到什么地方?)。每个神经元的外表面都有一层扁平的被囊细胞包裹。
二、交感神经节(sympatheticganglia)
材料:动物交感神经节,HE染色切片
1、肉眼观察
交感神经节呈椭圆形。
2、低倍镜观察
其基本结构与脊神经节相似,但多极神经元胞体均匀分布,不集中成群。
3、高倍镜观察
交感节的神经细胞是多极神经元,细胞大小差别不大,胞核较大,染色质少,呈空泡状,
核仁明显o神经元的周围可见被囊细胞,但数目较少。神经元间有无髓神经纤维交错排列(思
考:交感节内的神经元接受哪里来冲动?它的轴突终末分布到什么地方?)。
三、脊髓(spinalcord)
材料:动物脊髓,HE染色切片
1、肉眼观察
脊髓横切面,可见灰质染成深红色,位于中央,呈H形。H形有两个较窄的突起称后角,
两个较宽的突起称前角,白质在其外周,染成浅红色。
2、低倍镜观察
脊髓的灰质,可见有大、中、小各型神经元。在脊髓灰质前角,观察有多极运动神经元,
成群分布。白质由许多粗细不一的有髓鞘(多数)和无髓鞘(少数)神经纤维和神经胶质细
胞构成。
3、高倍镜观察
在脊髓灰质前角神经元胞体,可见其胞质内有丰富的尼氏体,呈块状。胞核着色淡,呈
空泡状,核仁明显。在后角的神经元,大多数细胞体积较小,散在分布。主要是束细胞和联
合神经元。在灰连合含有中央管,其内覆盖着室管膜上皮。白质中可见粗细不一的占多数的
有髓神经纤维和少数无髓神经纤维和神经胶质细胞构成.
四、大脑(cerebrum)
材料:动物大脑,HE染色切片
1、肉眼观察
皮质部染色较深,髓质部染色较淡。表面皮质凹陷形成沟,沟之间是回。
2、低倍镜观察
皮质的表面是薄层结缔组织(即软脑膜),是由胶原纤维及一些弹性纤维组成,表面
覆以单层扁平上皮。结缔组织膜内有丰富的小血管。
皮质:除神经胶质细胞和大多是无髓鞘神经纤维外可见神经元的胞体。它们分层排列,
一般分为六层。在HE染色标本中,各层分界不清。可先找出细胞体较小,细胞多密集排列
的第2、4层,定位后再由外向内辨认。
(1)分子层(molecularlayer):神经元小而少,染色浅。
(2)外颗粒层(externalgranularlayer):细胞密集排列,主要是小锥体细胞。
(3)外锥体细胞层(externalpyramidallayer):较厚,细胞较少,胞体较大。主要是中小
型锥体细胞组成。锥体细胞在切片为三角形,顶树突朝向外表面。
(4)内颗粒层(internalgranularlayer):在中央前回不明显,而在中央后回较明显。细胞
大小及排列与外颗粒层相似,多为星形细胞。
(5)内锥体细胞层(internalpyramidallayer):主要是大、中型锥体细胞。在中央前回有
巨大的锥体细胞称Betz细胞。
(6)多形细胞层(polymorphiclayer):细胞体积小,形态多样。以梭形细胞为主,与髓
质分界不明显。
髓质:没有神经元的胞体,只有神经纤维和神经胶质细胞。
五、小脑(cerebellum)
材料:动物小脑,HE染色切片
1、肉眼观察
小脑表面有许多横沟,把小脑分隔成许多叶片,每一叶片表面有一层灰质,即小脑皮质,
里面红色区域为小脑髓质。
2、低倍镜观察
区分皮质和髓质,小脑皮质表面呈粉红色的为分子层,深部紫蓝色的为颗粒层。髓质被
皮质包围在中间。
3、高倍镜观察
小脑皮质由浅层到深层可为三层:
(1)分子层(molecularcelllayer):此层染色较浅,细胞少,分散,主要由星形细胞和篮
状细胞构成。
(2)蒲肯野细胞层(Purkinjecelllayer):此层明显,细胞体积较大,呈梨形,排列较整
齐。要了解蒲肯野细胞的整体形态,可观察镀银染色的示教片,可见其树突反复分支,形似
扁柏。在树突的分支上有树突棘密布(思考:这些树突棘与哪些细胞的轴突形成突触?)。
(3)颗粒层(granularlayer):主要由密集的颗粒细胞构成,还有一些高尔基细胞(思考:
高尔基细胞的轴突与哪些终末形成突触?)。
髓质:由神经纤维和神经胶质细胞构成。
示教
1、蒲肯野细胞
2、锥体细胞
思考题
1、试述杼髓的组织结构特点。
2、试述大脑皮质组织结构特点。
3、试述小脑皮质的组织结构特点。
4、比较脊神经节和交感神经节的结构特点。
第九章眼和耳
眼(eye)由眼球及其附属器官组成。眼球包括眼球壁和眼球内容物。眼球壁分三层,即纤
维膜、血管膜和视网膜;眼球内容物有晶状体、玻璃体和房水。眼附属器官包括眼睑、泪器
及眼外肌等。
实验要求
1、掌握视网膜的组织结构。
2、了解纤维膜、血管膜和眼球内容物的组织结构。
3、了解内耳组织结构。
实验内容
一、猪眼解剖
先观察眼球模型,了解眼球各部
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