高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体

高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体

回忆已学知识，你是否已经见到过动物细胞融合的实例？人-鼠(想像图)第2页,共22页，2024年2月25日，星期天2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体第3页,共22页，2024年2月25日，星期天鼠细胞人细胞人工诱导一、动物细胞融合杂交细胞动物细胞融合（技术）：是指（在一定的条件下）两个或多个细胞融合形成一个细胞的过程。1、概念：第4页,共22页，2024年2月25日，星期天2、诱导融合的因素化学法：聚乙二醇(PEG)诱导融合.物理法：电激融合生物法：灭活的病毒诱导融合.病毒颗粒黏附细胞表面细胞膜连接细胞膜被病毒颗粒穿通细胞融合、形成杂种细胞

为什么灭活的病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性但保留融合活性第5页,共22页，2024年2月25日，星期天获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的病毒

物理（离心、振荡、电激）化学（聚乙二醇）直接诱导细胞融合去壁—原生质体融合—诱导新壁—杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性结果诱导方法步骤融合的原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合的比较获得杂交细胞小结第6页,共22页，2024年2月25日，星期天3、动物细胞融合技术的意义和应用第7页,共22页，2024年2月25日，星期天问题：抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？二、单克隆抗体的制备第8页,共22页，2024年2月25日，星期天抗体的传统生产方法：从血清中分离抗体

该法制备抗体的特点：

产量低、纯度低，且抗体的特异性差。多种浆细胞动物体内多种抗体抗原第9页,共22页，2024年2月25日，星期天提示：每一个效应B淋巴细胞只分泌一种化学性质单一，特异性强的抗体。如果利用单个效应B淋巴细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。问题：怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？第10页,共22页，2024年2月25日，星期天材料：效应B细胞在体内只能由B淋巴细胞增殖、分化而来,不再进行分裂,在体外培养的条件下，也很难分裂。思考：用什么方法才能让B淋巴细胞在体外培养时既能产生抗体又能无限增殖?第11页,共22页，2024年2月25日，星期天杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术单克隆抗体

既能产生特异性抗体，又能大量繁殖的细胞骨髓瘤细胞能无限增殖+一个浆细胞只分泌一种特异性抗体设计方案：米尔斯坦科勒第12页,共22页，2024年2月25日，星期天读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念

人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。单克隆抗体的概念单:单个细胞克隆:无性繁殖单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体第13页,共22页，2024年2月25日，星期天单克隆抗体的制备问题思考Q1Q2细胞两两融合后，有哪些类型？B-B;B-瘤;瘤-瘤哪种是需要的类型，要筛选吗？第14页,共22页，2024年2月25日，星期天①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。

③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，可是能不断分裂增殖。你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？

小资料：第15页,共22页，2024年2月25日，星期天单克隆抗体的制备问题思考Question经过选择培养基筛选的杂交瘤细胞群进行克隆是否就得到产生纯度高的抗体？还需怎么办？第16页,共22页，2024年2月25日，星期天有限稀释法稀释多次稀释对能产生特异性抗体的单个杂交瘤细胞进行克隆，即单细胞克隆。由它产生的抗体，即单克隆抗体。将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。多孔细胞培养板第17页,共22页，2024年2月25日，星期天单克隆抗体杂交细胞灭活的病毒等手段小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞经免疫的小鼠提取杂交瘤细胞第一次筛选用特定的选择培养基第二次筛选能产生专一抗体的杂交瘤细胞体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体4.单抗制备过程中应用了那些技术？动物细胞融合、动物细胞培养1.此过程中至少进行了几次筛选？目的相同吗？3.单克隆抗体的优点？特异性强，灵敏度高，可大量制备。2.最终从哪儿提取单克隆抗体？第18页,共22页，2024年2月25日，星期天（1）作为诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速（如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等）三、单克隆抗体的应用第19页,共22页，2024年2月25日，星期天（2）治疗疾病和运载药物生物导弹=单克隆抗体+药物（治疗肿瘤）(“生物导弹”—单抗导向，药物为弹头)单克隆抗体的应用疗效高、副作用小第20页,共22页，2024年2月25日，星期天1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞

C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞A巩固练习2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段基本相同C.操作步骤基本相同D.都能形成杂种细胞D第21页,共22页，2024年2月25日，星期天3.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠