维生素类药物

维生素类药物5/9/20241维生素类药物

概述一、概念维生素1）维持人体正常代谢功能所必需的一类微量的生物活性物质，主要用于机体的能量转移和代谢调节。2）大多数人体内不能自行合成,必须从食物中摄取。5/9/20242维生素类药物HotTip二、化学结构：醇、酯、酸、胺、醛，酚三、分类脂溶性维生素:VitA、D2、D3、E、K1

水溶性维生素:VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺5/9/20243维生素类药物

四、分析方法1.生物法

2.微生物法3.化学法4.物理化学法5/9/20244维生素类药物第一节维生素A（VitaminA）的分析

维生素A1活性最高，维生素A2的生物活性是维生素A1的30-40%，维生素A3的生物活性是维生素A1的0.4%，故通常所说的维生素A系指维生素A1。5/9/20245维生素类药物第一节维生素A（VitaminA）的分析来源1）天然产物主要来源于鲛类无毒海鱼肝脏中提取的脂肪油,即鱼肝油。从鱼肝油提取的VA多为各种酯类的混合物，其中主要为醋酸酯和棕榈酸酯。2）人工合成产物全反式维生素A醋酸酯《中国药典》收载的VA是人工合成的VA醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液，其制剂有VAD胶丸和VAD滴丸。5/9/20246维生素类药物药典收载情况VA及醋酸酯棕榈酸酯混合物的食用油溶液。人工合成的VA醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液，其制剂有VAD胶丸和VAD滴丸。浓缩VA油混合物Ch.PUSPBP5/9/20247维生素类药物第一节维生素A（VitaminA）的分析一、结构和性质（一）结构H维生素A醇-COCH3维生素A醋酸酯-COC15H31

维生素A棕榈酸酯5/9/20248维生素类药物环己烯共轭多烯侧链

存在多种立体异构化合物具有UV吸收易发生脱氢、脱水、聚合反应5/9/20249维生素类药物

（二）性质1。性状AddYourText2。稳定性3。紫外吸收特性AddYourText4。与三氯化锑呈色Text5/9/202410维生素类药物O2H+重排[O][O]VA酸VA醛呋喃型氧化物（无生物活性）5/9/202411维生素类药物H+++-H去水VA（VA3）烯丙型醇遇酸易发生脱水反应5/9/202412维生素类药物二、鉴别反应CHCl3反应机理：VA与三氯化锑(SbCl3)中存在的亲电试剂氯化高锑（SbCl5）作用形成不稳定的蓝色正碳离子。注意事项：反应需在无水、无醇条件下进行。水可使SbCl3水解成SbOCl乙醇可与正碳离子作用，使正电荷消失溶剂：饱和无水三氯化锑的无醇氯仿溶液5/9/202413维生素类药物2、紫外吸收特征去水维生素A（A3）：6个共轭双键，其最大吸收波长向红移，在340～390nm波长间出现3个最大吸收峰(348、367、389nm)。维生素A：5个共轭双键，其无水乙醇液在326nm波长处有最大吸收。5/9/202414维生素类药物3、薄层色谱法BPUSP薄层板：硅胶G硅胶展开剂：环已烷-乙醚（8：2）显色剂：三氯化锑磷钼酸现象：蓝色斑点

蓝绿色斑点5/9/202415维生素类药物

三、含量测定1紫外-可见分光光度法2

比色法3

高效液相色谱法5/9/202416维生素类药物（一）紫外-可见分光光度法利用维生素A醇和其醋酸酯分子中具多烯共轭体系结构，在325～328nm处有选择性吸收峰，故可进行含量测定5/9/202417维生素类药物三点校正法——三波长测定法（1）原因（2）原理5/9/202418维生素类药物<1>

1VitA的max（328nm）<2>

2和3在

1的两侧各选一点

(3)波长选择

等波长差法：

1-2=3-1

等吸收比法：A2=A3=6/7Amaxeg:《中国药典》中测定VA醋酸酯，1=328nm、2=316nm、3=340nmeg:《中国药典》中测定VA醇，

1=325nm、2=310nm、3=334nm5/9/202419维生素类药物(4)测定方法测定对象

VA醋酸酯（纯度较高）第一法（直接测定法）

max在326-329nm之间，且分别计算5个波长处的差值均不超过±0.02，直接用测得的A328，用下述公式计算含量标示量%=A328×D×1900×w/(W×100×L×标示量)×100%—等波长差法300、316、328、340、360nm5/9/202420维生素类药物最大吸收波长是否在326-329之间是否计算吸收度比值之差是否超过±0.02第二法（皂化）是否计算A328（校正）A3285/9/202421维生素类药物

-15%-3%03%

皂化

A328（校正）A328皂化计算A值(一个或几个超过±0.02)5/9/202422维生素类药物5、生物效价及换算因数

1IU的VitA=0.300ug的全反式维生素A醇=0.344ug的全反式维生素A醋酸酯（1）生物效价的定义维生素A含量是用生物效价表示单位IU/g（国际单位）

生物效价（IU/g）=吸收系数×换算因数

5/9/202423维生素类药物（2）换算因数的计算1g维生素A醋酸酯相当的维生素A的国际单位数为

1g维生素醇相当的维生素A的国际单位数为

5/9/202424维生素类药物(VitA酯)(VitA醇)换算因子=IU/g/5/9/202425维生素类药物1、判断法选择AA测定或A校正2、求

3、计算效价

（3）计算5/9/202426维生素类药物制剂——VitA胶丸的含量计算5/9/202427维生素类药物

第二法（皂化法）用醇制氢氧化钾加热皂化（水解），用乙醚提取，挥干溶剂，残渣用异丙醇溶解，测定含量。

测定对象VitA醇

等吸收比法300、310、325、334nm5/9/202428维生素类药物最大吸收波长是否在323-327之间是否A300/A325是否超过0.73色谱法纯化是否计算A325（校正），或A值5/9/202429维生素类药物计算A值03%－3%5/9/202430维生素类药物（二）三氯化锑比色法（三）高效液相色谱法5/9/202431维生素类药物思考题1）三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的依据（原理）是什么？2）三点校正紫外分光光度法测定维生素A醋酸酯含量时，校正公式是什么？换算因子是多少？写出测定其胶丸含量时标示量%的计算式。5/9/202432维生素类药物氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)第二节维生素B1的分析氨基嘧啶环噻唑环UV（一）结构一、结构与性质还原性5/9/202433维生素类药物1、溶解性易溶于水；微溶于乙醇；不溶于乙醚2、硫色素反应（二）性质3、紫外吸收特性4、与生物碱沉淀试剂反应5、氯化物特性5/9/202434维生素类药物二、鉴别试验（一）硫色素反应（二）生物碱沉淀反应（三）与硝酸铅的反应（四）氯化物反应

VitB1+NaOH

共热

Na2SNa2S+Pb(NO3)2PbS2（黑色）5/9/202435维生素类药物硫色素反应（鉴别与含量测定）硫色素反应为VitB1的专属反应原理NaOH环合［Ｏ］环合5/9/202436维生素类药物鉴别试验5/9/202437维生素类药物H+H+H+VitB1与生物碱沉淀试剂的反应（鉴别）H+5/9/202438维生素类药物（一）非水溶液滴定法（原料药）

三、含量测定原理

利用噻唑环上季铵和嘧啶环上氨基的弱碱性，在非水溶液中用高氯酸液滴定。5/9/202439维生素类药物（二）紫外吸收（鉴别与含量测定）

VitB1分子结构中具共轭双键，在紫外区246nm处有最大吸收，可进行鉴别与含量测定。原

理差示分光光度法？5/9/202440维生素类药物计算公式：

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素Ｂ125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)约70ml，振摇15分钟使维生素Ｂ1溶解，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，照分光光度法在246nm的波长处测定吸收度，按C12H17ClN4OS.HCl的吸收系数为421计算，即得。（二）紫外－可见分光光度法（维生素Ｂ1片剂）5/9/202441维生素类药物（三）硫色素荧光法激发波长365nm发射波长435nm1、方法与计算对照液+NaOH+铁氰化钾+异丁醇+NaOH+异丁醇+NaOH+铁氰化钾+异丁醇+NaOH+异丁醇供试液SdAb含量测定5/9/202442维生素类药物2、特点①灵敏度高，线性范围宽②代谢产物不干扰，适用于体液分析5/9/202443维生素类药物（三）高效液相色谱法（四）毛细管电泳法5/9/202444维生素类药物L（+）－抗坏血酸（活性最高）D（-）－异抗坏血酸（为前者5%）L（+）－异抗坏血酸（无活性）D（-）－抗坏血酸（无活性）第四节维生素C的分析一、结构与性质(一）结构两个手性碳原子，有四个光学异构体二烯醇强还原性弱酸性（一元酸）5/9/202445维生素类药物（二）性质1、性状白色结晶或结晶性粉末；无臭，味酸；久置色渐变微黄，水溶液显酸性。2、溶解性易溶于水；略溶于乙醇；不溶于氯仿和乙醚。3、旋光性比旋度+20.50-+21.505/9/202446维生素类药物4、酸性烯二醇结构由于共轭效应的影响

C3－OHpKa=4.17C2－OHpKa=11.5故VC表现为一元酸，可与NaHCO3生成钠盐5/9/202447维生素类药物５、水解性ＮaOHＮa2CO3酮酸盐5/9/202448维生素类药物6、强还原性二烯醇结构－２Ｈ＋２ＨＯＨ（Ｈ＋）Ｌ－抗坏血酸（有生物活性）Ｌ－去氢抗坏血酸（有生物活性）Ｌ－二酮古洛糖酸（无生物活性）5/9/202449维生素类药物50℃7、具糖的性质结构与糖类相似8、紫外吸收特性5/9/202450维生素类药物（二）鉴别试验1、氧化反应（１）与AgNO3反应5/9/202451维生素类药物（２）与2，6-二氯靛酚反应（含量测定）还原型原理氧化型自身指示终点法测定方法5/9/202452维生素类药物

快速滴定防止其他还原性物质干扰（2min内）

酸性环境

HPO3-HAc中VitC稳定剩余比色测定

（定量过量）（测剩余染料）讨论5/9/202453维生素类药物缺点

需经常标定贮存≤一周不稳定干扰多

氧化力较强5/9/202454维生素类药物（3）与碱性酒石酸铜反应（4）与KMnO4反应2、糖类的反应3、紫外分光光度法243nm5/9/202455维生素类药物1、原理（一）碘量法

三、含量测定

＋Ｉ２＋ＨＩＨ＋5/9/202456维生素类药物

取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.１mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.１mol/L)相当于8.806mg的C6H8O62、测定方法5/9/202457维生素类药物1、酸性环境减慢VitC被O2氧化速度2、新沸冷H2O减免水中O2的干扰3、讨论3、立即滴定减少O2的干扰4、制剂测定时注意，注意消除辅料的干扰。Na2S2O5+H2O2NaHSO3NaHSO3+CH3COCH35/9/202458维生素类药物（四）高效液相色谱法(二)2，6-二氯靛酚（三）紫外-可见分光光度法5/9/202459维生素类药物本章小结4、VitE：掌握硝酸反应的原理。1、VitA：掌握三氯化锑鉴别反应的原理、UV法含量测定的原理及两种测定方法的区别。2、VitB1：掌握硫色素反应原理。3、VitC：掌握其结构特征（还原性）、碘量法含量测定的原理及操作注意事项。5/9/202460维生素类药物第四节维生素D的分析维生素D2结构式一结构与性质5/9/202461维生素类药物第四节维生素D的分析二、性质1、性状无色针状结晶或白色结晶粉末；无臭、无味：遇光或空气均易变质。2、溶解性在氯仿中极易溶解，在植物油中略溶，在水中不溶。5/9/202462维生素类药物第四节维生素D的分析3、不稳定性含多个烯键，性质不稳定，遇光或空气及其它氧化剂无发生氧化变质，使效价降低，毒性增强。4、旋光性VD2：6个手性碳，VD3：5个手性碳二者均具有旋光性。5、显色反应：甾醇类共有反应6、紫外吸收特性5/9/202463维生素类药物二、鉴别反应1234显色反应1.与醋酐-浓硫酸反应2.与氯化锑反应3.其它比旋度测定

其它HPLC,TLCm.p.,UV,IR维生素D2维生素D3的区分反应5/9/202464维生素类药物

第四节维生素D的分析

（一）麦角甾醇的检查三、杂质检查（二）前维生素D的光照产物检查5/9/202465维生素类药物四、含量测定1）化学法2）光谱法3）色谱法1）化学法2）色谱法3）微生物法正相色谱法USPBPCHP5/9/202466维生素类药物苯二氢吡喃第五节维生素E的分析一、结构与性质

（一）结构：苯并二氢吡喃醇衍生物苯环+二氢吡喃环+饱和烃链5/9/202467维生素类药物CycleDiagramTextTextTextTextTextCyclenameAddYourText第五节

维生素E(VitE)R1

R2

﹡﹡VitE(dl-α-TocopherylAcetate)5/9/202468维生素类药物名称R1R2相对