兽医临床实验室检查

二、血涂片的制备一般分血液涂片制作、染色、镜检分类计数三步进行。1．血片的制作选取一边缘光滑平整的载玻片作推片，用左手的拇指和中指夹持一洁净载玻片，取被检血液一滴（最好是新鲜的未加抗凝剂的血液），置于其右端，右手持推片置于血滴前方，并轻轻向后移动推片，使与血液接触，待血液扩散开后，再以30°～40°角度向前均速推进涂抺，即形成一血膜，迅速自然风干（图1-8）。涂片时，血滴越大，角度（两玻片之间的锐角）越大，推片速度越快，则血膜越厚；反之则血膜越薄。血液分布应均匀，厚度适当，对光观察呈霓虹色，血膜位于玻片中央，两端留有适当空隙，以便注明动物类别、编号及日期，即可染色。反之，重行制作，直至合格后，再行染色。

图1-8涂制血片的方法推好的血片2．血片的染色血片的染色有多种方法，但常用瑞特氏染色法。瑞特氏染色法：先用玻璃铅笔在血膜两端各划一线，以防染液外溢，将血片平放于水平支架上；滴加瑞氏染液于血片上，直至将血膜盖满为止；待染色1~2min后，再加等量磷酸盐缓冲液，并用洗耳球轻轻吹动，使染色液与缓冲液混合均匀，再染色3~5min；最后用蒸馏水冲洗血片，待自然干燥或用吸水纸吸干后镜检。所得血片呈樱红色者为佳。染色冲洗血红蛋白是一种微红色的胶体物质，由珠蛋白与亚铁血红素结合而成。是红细胞的重要组成部分，也是红细胞赖以携带氧气和二氧化碳的物质。一、血红蛋白的测定步骤：（1）在测定管内加1%盐酸溶液至“20/2”刻度处。（2）用血红蛋白吸管吸血20µl的血液，加入测定管内并混匀，注意不要产生气泡。一、血红蛋白的测定血红蛋白吸管的使用

1.清洗方法：先用蒸馏水酒精乙醚三个步骤进行。

2.注意点：使用前后都要将管内洗干净。特别要将管内的血液挤干净才可进行以上三步的洗涤。

步骤（3）静置十分钟，然后向比色管内滴加盐酸溶液并摇匀，在于标准比色进行比色。再加再比色，反复进行直到比色管内的颜色与标准比色管一致为止。（4）读取液体凹面的刻度即为血红蛋白的含量。血红蛋白测定（1）血红蛋白含量增多：多见于机体脱水而血液浓缩和各种疾病，腹泻、呕吐等（2）血红蛋白含量降低：主要是由于红细胞损失过多或生成不足所致，可见于各种贫血和失血、溶血、红细胞生成障碍等。诊断意义血红蛋白测定各种器材必须干净干燥用血红蛋白吸血不能多也不能少读数时若管内有气泡可有蘸取酒精少许并接触气泡部位即会消除注意事项血红蛋白测定二、红、白细胞计数目前采用的方法有两种：①显微镜目视计数法；②自动血细胞分析仪法。红、白细胞计数主要方法及步骤实验步骤红细胞计数白细胞计数血液稀释取4ml的生理盐水于小试管中，然后用血红蛋白吸管吸血液10µl，将管外壁的血液擦拭干净，放置于装有生理盐水的小试管中，混匀白细胞稀释液0.38ml或0.4ml；用沙利氏吸管吸取供检血液20μl加入试管内，混匀，寻找计数室将计数板盖上血盖片平放在显微镜的载物台上，在低倍镜下，暗视野下寻找计数室与红细胞计数相似，只是将镜头调到白细胞计数室中（四角的4个大方格中的任何一个）。充液将配好的稀释液用吸管吸取一滴充在计数板与血盖片之间，并静置1~2min再计数。同红细胞计数计数在高倍镜下计数，计红细胞计数室中的四角的及中央的一个总共是4个中方格的红细胞数用低倍镜计数，计4个角上的4个大方格（共有16×4=64个中方格）的白细胞按顺序全部数完计算每立方毫米血液中所含的红细胞总数（个/mm3）=（x1+x2+x3+x4+x5）×5×10×400=X×20000白细胞数（个/mm3）=W/4×10×20=W×50或白细胞数（个/L）=W/4×10×20×106临床意义:红细胞增多：红细胞和血红蛋白含量增多，绝大多数为相对增多，见于各种因素导致的脱水等。红细胞减少：红细胞和血红蛋白含量降低，主要是由于红细胞损失过多或生成不足所致，可见于各种贫血和失血、溶血、红细胞生成障碍等。诊断意义白细胞总数增多：多数细菌感染性疾病，如链球菌、肺炎双球菌等，在严重的组织损伤，急性大出血，急性溶血，某些中毒（敌敌畏中毒、酸中毒及尿毒症等）以及注射异体蛋白（血清、疫苗）后，均可导致白细胞数目增多。白血病时，白细胞数持久性、进行性增多，红细胞数目却明显下降。诊断意义白细胞总数减少：某些病毒性疾病，如犬传染性肝炎、猫泛白细胞减少症、流行性感冒、马传染性贫血时，白细胞总数减少；伴有再生障碍性贫血的疾病时，白细胞总数减少；此外长期使用磺胺类及氯霉素类药物、X线照射，恶病质及各种疾病的濒死期等均会引起白细胞数减少。白细胞分类计数是指将血液制成薄片，染色后油镜观察，求出各种白细胞所占百分比。即可计算出每mm3血液中种类白细胞的绝对值。白细胞总数的变化，并一定表示各类白细胞均增多或减少，常常仅限于某种或两种白细胞数的变化，从而引起白细胞之间百分比的相对改变。因此，白细胞计数对疾病的诊断具有一般意义，而白细胞分类计数则有具体意义，在临床上，应将二者结合起来进行分析。三白细胞分类计数方法与步骤一般分血液涂片制作、染色、镜检分类计数三步进行。镜检计数先用低倍镜做大体观察，观察血膜细胞上分布情况及染色质量等。如染色合格，在血片上滴上一滴香柏油，再换用油镜进行观察计数。由于比重大的细胞多分布在血片的边缘和尾部，如粒细胞、单核细胞等，比重小的细胞则多分布在血片的头部和中间，如小淋巴细胞等。为减少细胞分布的固有误差和避免重复计数，通常在血片的两端或两端的上下部按二区或四区计数法（图1-9，图1-10）有顺序地移动血片，计数白细胞100~200个（白细胞总数在1万个/mm3以下计数100个，在2万个/mm3以下计数200个，在2万个/mm3以上计数400个），分别记录各种白细胞数，最后计算出各种白细胞所占百分比。碱性碱性酸性单核细胞大淋巴细胞中淋巴细胞晚幼粒细胞中性粒细胞杆状核血小板记录时，可用白细胞分类计数器，或设计一个表格用画“正”字的方法加以记录。某种白细胞的百分率=（某种白细胞数/分类计数白细胞总数）×100%；某种白细胞的绝对值=白细胞总数×某种白细胞的百分率。诊断意义1．嗜中性白细胞增多与减少（1）嗜中性白细胞增多：嗜中性白细胞病理性增多是机体抵抗外来感染和对体内炎症性刺激的一种防御性反应，常见于各种急性感染性疾病、急性炎症及重症烧伤、创伤时。分析嗜中性白细胞的增减变化时，应特别注意核象的变化。杆状核和晚幼细胞增多，并出现中幼细胞，甚至出现早幼细胞及原始粗细胞，称为“核左移”，通常表示骨髓造血机能增强；如分叶核细胞显著增多，并且细胞核分为4~5叶甚至多叶的比例较多者，则称为“核右移”，表示造血机能减退。结合白细胞总数的变化，分析嗜中性白细胞核象的变化，更有意义。核左移，同时白细胞总数也增多，称为再生性核左移，为骨髓造血机能增强，机体处于紧急动员、积极防御阶段的表现；核左移，但白细胞总数仍维持在正常范围内，甚至减少者，则称为退行性核左移，为感染严重，骨髓造血机能衰竭，释放功能不良，机体抗病能力降低的表示；核右移则为骨髓造血机能减退、机体抗病能力降低表示。（2）嗜中性白细胞减少：多由于骨髓造血机能受到抑制，对嗜中性白细胞的生成不足，或因最急性感染，致使嗜中性白细胞向组织中的游走速度超过由骨髓向血液中的释放速度等因素所致。常见于病毒性疾病及各种疾病的重危期（如中毒性休克、胃肠破裂等）。2．嗜酸性白细胞增多与减少嗜酸性白细胞的功能，可能与机体的过敏反应有关，具有抗组织胺及吞噬抗原-抗体复合物的作用。（1）嗜酸性白细胞增多：常见于某些寄生虫病（如肝片吸虫病、球虫病、旋毛虫病等），某些过敏性疾病（荨麻疹等）以及湿疹、疥癣等皮肤病过程中。（2）嗜酸性白细胞减少：常见于某些疾病的重症期，也可见于应用皮质类固醇药物时。3．淋巴细胞增多与减少（1）淋巴细胞增多：常见于某些慢性传染病（如结核病、布氏杆菌病等)、急性传染病的恢复期、某些病毒性疾病（如流行性感冒等）及血孢子虫病等。（2）淋巴细胞减少：常见于急性传染病的初期及各种疾病的垂危期。4．单核细胞增多与减少单核细胞对感染的控制具有重要作用。（1）单核细胞增多：可见于某些原虫病（如锥虫病、梨形虫病等）、某些慢性细菌性疾病（如结核、布氏杆菌病等）以及某些病毒性疾病（如马传染性贫血）时。（2）单核细胞减少：见于急性传染病的初期和各种疾病的垂危期。5．嗜碱性白细胞在一些慢性变态反应性疾病、高脂血症、伴有IgE长期刺激的疾病（如犬慢性恶丝虫病）、白血病时，出现嗜碱性白细胞增多。四、血液生化检验生化检查是指用生物化学的方法对机体进行检查。正确、综合的对生化指标进行判读，可以了解机体各器官的一部分情况，帮助判断营养、免疫，脱水程度等机体的状态。常用的检查设备：血液生化分析仪课程名称（一）单项指标的意义及关联1、谷丙转氨酶(ALT)ALT顾名思义是谷氨酸和丙酮酸之间的转氨酶，主要存在于肝脏、心脏和骨骼肌中。肝细胞或某些组织损伤或坏死，都会使血液中的谷丙转氨酶升高，临床上有很多疾病可引起转氨酶异常。ALT升高的原因很多，包括急性软组织损伤及严重的创伤、剧烈运动或运动过度、感染性疾病如肺炎、结核等、心脏疾病如心力衰竭、心肌炎等、胆囊炎、应用一些药物等非肝脏因素。所以临床生化检查见到ALT的轻度增高不应只怀疑肝脏问题，要综合考虑动物病情并全面分析化验单。

ALT主要大量存在于肝脏细胞的细胞浆中，其浓度高于血清的1000-3000倍。故肝细胞的轻度损伤就可使其升高，极其敏感，有资料报道1%的肝细胞损伤可造成ALT升高一倍。所以可以说只要肝脏有轻微损伤就能引起ALT的明显变化，而因黄疸怀疑早期及中期的肝病，没有ALT的升高是不成立的。但ALT的降低目前未证明其有临床意义。（一）单项指标的意义及关联2、谷草转氨酶(AST)

AST存在各组织细胞中，肌肉组织中含量很高，其中心肌细胞中的含量明显高于肝脏细胞，所以AST伴随CK(肌酸激酶）的明显升高常提示骨骼肌损伤或心脏疾病。

当肝脏轻度损伤时，引起血清ALT及AST同时基本等比例升高。而当肝有严重损伤时，AST升高的比例要高于ALT，升高的比例越高，提示肝损伤的程度越重。（一）单项指标的意义及关联3、总胆红素(TBIL)

TBIL是直接胆红素和间接胆红素的总和，正常血清中的胆红素基本是来源于衰老的红细胞破碎后产生出来的血红蛋白衍化而成，在肝内经葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素，未在肝内经葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素。总胆红素升高的原因包括溶血性疾病、微生物感染引起间接胆红素过多，来不及被肝脏转化为直接胆红素和胆汁而引起单纯因间接胆红素升高导致直胆升高。肝病时，胆红素不能转化为胆汁或因肝细胞肿胀而导致肝内胆汁淤积引起直胆和间胆同时升高造成肝细胞性黄疸。发生胆囊炎、总胆管阻塞时，胆汁排入十二指肠障碍而引起阻塞性黄疸。（一）单项指标的意义及关联

因犬猫被毛长度及皮肤颜色不同，临床一般通过眼结膜、瞬膜和口腔黏膜的颜色观察来判断。一般30mmol/L以下的黄疸不宜用肉眼察觉，称为隐性黄疸。怀疑隐性黄疸时，可通过尿液化验来进行判断。当发生轻度溶血时，肝脏将间胆转化成直胆的能力可在一定范围增强，所以这时血清胆红素水平不会上升。但在发生中重度溶血时，大量红细胞破碎导致进入血清中的间接胆红素过多，肝脏来不及转化而导致血清总胆红素水平轻中度升高。犬的埃利希氏体、支原体感染，猫的传染性腹膜炎也能引起肝前性黄疸（一）单项指标的意义及关联肝细胞性黄疸时直胆和间胆均升高。当怀疑发生肝细胞性黄疸时，要结合ALT、AST、ALP指标及各项临床症状做出诊断。要知道犬猫的肝脏疾病在一半以上的病例中是不引起黄疸的。肝细胞性黄疸时总胆红素的高低在一定程度上是与肝病的严重程度成正比的，当总胆红素值显示为重度黄疸时，如果ALT、AST值升高不多被称为胆酶分离。胆酶分离的原因是肝细胞严重受损，间胆不能被转化，胆汁大量在肝内淤积，而具有活性的肝细胞数量很少，受损后释敢的酶也相应减少，往往提示极严重的肝损伤、肝硬化中晚期以及肝衰竭。（一）单项指标的意义及关联

梗阻性黄疸是指肝细胞具备将间胆结合为直胆及产生胆汁的能力，但胆汁排出受阻，所以直胆升高，间胆正常或轻度升高。胆结石、寄生虫、肝脏肿瘤、胆囊肿瘤、胰腺肿瘤造成的胆管阻塞及压迫是主要病因。此时，ALT一般轻度升高，AST轻度升高或正常，ALP明显升高。总胆红素降低一般提示缺铁性贫血、缺锌或仪器误差。（一）单项指标的意义及关联4、碱性磷酸酶是(ALP)

ALP由6种同工酶组成，广泛存在于机体各组织中，肝、肾、骨骼、肠道、胎盘及某些肿瘤组织内都存在，但主要存在于肝脏和骨骼中。

在犬猫临床上，ALP升高所提示的临床意义不完全相同。在犬提示肝脏疾病、库兴氏综合征、糖皮质激素或抗癫痫药物使用。在猫提示糖尿病、胆管炎、胆管性肝炎、肝脂变、甲亢等。在犬甲状腺机能减退时，ALP可能轻度下降。（一）单项指标的意义及关联5、肌酸激酶(CK)

CK可在体内催化肌酸和磷酸肌酸之间的相互转化，广泛存在于心肌和骨骼肌中，脑、胃肠道、前列腺、肺等组织中也有分布。在兽医临床CK的明显升高主要提示心肌、骨骼肌或脑组织的病变。（一）单项指标的意义及关联6、总蛋白(TP)TP是指肝脏产生的白蛋白和含量极少的纤维蛋白原、α、β球蛋白、凝血酶原、凝血因子，浆细胞产生的γ球蛋白共同组成的复杂混合物。TP的升高常见于各种原因引起的脱水、中毒、休克、慢性感染、淋巴肉瘤、浆细胞瘤等。TP降低主要见于各种原因引起的白蛋白下降。（一）单项指标的意义及关联7、白蛋白(ALB)ALB是机体维持血浆胶体渗透压的主要力量，它能转运胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇和部分药物及重金属离子，还具有一定的球蛋白保护作用。ALB升高主要见于急性重度脱水和休克，但这在临床上并不常见。ALB降低分为两种原因。第一为合成不足，长期饥饿、营养不良、肠道吸收不良等原因引起的原料不足或严重的肝病导致的ALB产生不足或停止；第二为过度流失，肾小球病变、肾病、蛋白丢失性肠病、大量炎症性胸腹腔渗出均能导致ALB的丢失性降低。（一）单项指标的意义及关联8、球蛋白(GLOB)机体球蛋白包括α球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白，且以γ球蛋白为主，另两种球蛋白的含量极低。因为纤维蛋白原、凝血酶原和凝血因子所占的比重太小，所以兽医临床上血清球蛋白的数值是TP减去ALB所得。球蛋白的升高在犬常见于全身性慢性感染，如全身性脓皮症、艾利希氏体、心丝虫、蠕形螨、慢性跳蚤过敏等；还可见于淋巴肉瘤、浆细胞瘤、多发性骨髓瘤等高蛋白血症及自身免疫病。在猫较为常见，机体携带非自限性病毒时均能引球蛋白同程度的升高。白降低一般不会出现在猫。在成年犬可能与慢性失血、蛋白丢失性肠病、重度肝病及肾病有关，但后两者不常见。（一）单项指标的意义及关联9、白蛋白：球蛋白(A/G)

TP高，A/G低是由于球蛋白偏高，原因有慢性炎症、免疫性疾病，多发性骨髓瘤，红斑狼疮等。TP低，A/G低是由于白蛋白偏低，见于肾病，营养不良等能够引起白蛋白流失的疾病。如果A/G低并且白蛋白低，球蛋白高的话，提示严重肝病，如严重肝脓肿、肝脂变（猫）、中重度的肝纤维化、肝癌晚期。（一）单项指标的意义及关联10、尿素氮(BUN)

BUN是机体内氨在肝中代谢产生的，主要通过肾脏排出体外。BUN升高临床上称为氮质血症，分为肾前、肾中、肾后性三种。肾前性见于充血性心力衰竭、高热、休克、消化道出血、脱水、严重感染、糖尿病酮症酸中毒、严重的肌肉损伤、应用糖皮质激素或四环素、阿蒂森氏症、高蛋白饮食、肝肾综合征等因素；肾中性常见于急性肾炎、慢性间质性肾炎、严重肾盂肾炎、先天性多囊肾和肾肿瘤等肾脏疾病引起的肾功能障碍；肾后性见于各种原因导致的尿路梗阻使肾小球滤过压降低，常见于尿道结石、难产、便秘、前列腺肿瘤、盆腔肿瘤、双侧输尿管结石等因素。血中BUN降低常见于过量摄入水分、蛋白质摄入过少、应用促蛋白合成的同化激素、妊娠晚期及严重的肝脏疾病。（一）单项指标的意义及关联11、肌酐(CREA)

肌酐是机体肌肉代谢的产物。在肌肉中，肌酸主要通过不可逆的非酶脱水反应缓缓地形成肌酐，再释放到血液中，随尿排泄。肌酐升高的主要原因为肾功能不全，当肾功能下降至正常的1/4-1/3时血肌酐开始上升。在严重感染、剧烈运动、生长激素过盛、糖尿病、VitC的大量使用时也可引起血中CREA升高。肌酐的降低见于妊娠晚期、严重的肌营养不良、重度的充血性心衰、应用雄性激素或噻嗪类利尿药等。（一）单项指标的意义及关联12、血钙(Ca)

血钙以离子钙和结合钙两种形式存在，血浆钙中只有离子钙才直接起生理作用。离子钙降低神经肌肉应激性的作用，当离子钙过低时神经肌肉应激性升高，可发生手足搐搦。过高时可使神经、肌肉兴奋性降低，表现为乏力、呕吐、对外界刺激漠然、腱反射减弱，严重时可出现精神障碍、木僵和昏迷。

高血钙常见于VitD中毒，补钙过量、原发性甲亢、肾衰引起的继发性甲旁亢、高蛋白血症、芽生菌病、体温过低、淋巴肉瘤（犬）、大量进食植物（猫）。低血钙常见于妊娠及哺乳期、幼龄动物快速生长期、低蛋白血症、肾衰、甲亢（猫）、急性坏死性胰腺炎、甲状旁腺机能减退等。（一）单项指标的意义及关联13、血磷(P)

血磷主要是指血中的无机磷，它以无机磷酸盐的形式存在。血浆中钙与磷的浓度保持着一定的比例关系。高血磷可引起厌食、骨骼异常及疼痛、血管及软组织钙化、诱发甲旁亢进等问题。血磷常见的升高原因有肾衰、VitD摄入过多、快速生长期、甲旁减退、溶骨性疾病。低血磷可引起动物贫血、无力、惊厥，常见原因有碱中毒、糖尿病酮症酸中毒治疗时胰岛素过量，静脉使用葡萄糖过量、产后瘫痪、甲旁亢、VitD缺乏。（一）单项指标的意义及关联14、血糖(GLU)

血糖升高的原因有糖尿病、紧张（猫）、肾衰竭、库兴氏综合征、甲亢、孕激素过多、生长激素过多、药物（葡萄糖、糖皮质激素、孕激素、甲状腺素）等引起。血糖下降的原因有小型幼龄动物的消化道疾病（常引起癫痫）、饥饿、严重的败血症、肝功能不全、阿蒂森氏症、垂体机能减退、胰岛素治疗过量。（一）单项指标的意义及关联15、淀粉酶(AMY)

血清淀粉酶主要来源于胰腺，另外近端十二指肠、肺、子宫、泌乳期的乳腺等器官也有少量分泌。血清淀粉酶在急性胰腺炎及慢性胰腺炎的急性发作胰腺损伤期升高2-3倍（主要在犬），肾衰竭、胰腺囊肿、胰腺肿瘤时中度升高，肝脏疾病及胃肠道疾病如肠梗阻、肠管坏死、便秘、胃肠穿孔、腹膜炎等，应用噻嗪类、糖皮质激素及羟乙基淀粉也可引起血情淀粉酶升高。

血清淀粉酶的下降无重要的临床意义，有报道见于重症糖尿病、严重的肝脏疾病、胰腺肿瘤的术后。（一）单项指标的意义及关联16、脂肪酶(LIPA)

血清脂肪酶的升高主要见于急性胰腺炎、胰腺癌。急性胰腺炎时血清淀粉酶升高持续的时间较短，而脂肪酶升高持续时间很长，故临床诊断意义较大。另外肠梗阻、十二指肠穿孔、

总胆管阻塞也能引起血清脂肪酶升高。（一）单项指标的意义及关联17、总胆固醇(CHOL)

胆固醇广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高，是机体组织细胞不可缺少的重要物质，不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸、维生素D以及甾体激素的原料。血清胆固醇升高可见于糖尿病、单纯的阻塞性黄疸、肥胖、高脂肪饮食、甲减、库兴氏综合征、肾病综合征等疾病。血清胆固醇降低可见于严重的营养不良、恶性肿瘤、肝细胞严重受损、蛋白丢失性肠病等情况。（一）单项指标的意义及关联18、甘油三酯(TG)血清甘油三酯升高常见于测定样本出现脂血、黄疸、溶血。提示的疾病有糖尿病、甲状腺机能减退（犬）、肾病综合征、阻塞性黄疸、妊娠、急性胰腺炎等。肥胖导致的高甘油三酯可引起胰腺炎、加重肝病，如引起动脉狭窄导致血栓可导致心梗、脑梗、失明、肾衰等后果。血清甘油三酯下降的原因有甲亢、阿蒂森氏症、严重的肝病极度营养不良、胆汁分泌不足、肠道吸收障碍等。低甘油三酯可诱发脂肪肝。（二）生化指标的综合判读

依据单项生化指标的变化是不能得出全面结论的，要多项指标加上血常规及电解质的综合判读来诊断动物是哪一个或几个器官出现病变。（二）生化指标的综合判读

1、肝胆疾病

肝胆系统的疾病有多种类型，生化指标的判读一般只能帮助判断发病部位及程度，很难明确疾病的性质，如要得到准确的诊断，还要结合影像学及病理学检查。

ALT是肝脏较特异性的酶，其明显升高则提示肝细胞受损，但即使升高10倍以上也不能反映肝脏的损伤是非常严重的。因为即使只有1%的肝细胞损伤．ALT就能升高1倍。而肝的代偿能力是超强的，50%的肝脏切除是对机体没有任何影响的。

AST也是肝脏较特异性的酶，如果ALT及AST同时明显升高，而CK没有升高时说明肝脏出现病变。但如果两种酶基本等比例升高，说明肝细胞损伤轻，只有胞浆破裂。如果AST的升高比例明显高于ALT的升高比例，则说明肝细胞受损严重，线粒体破袈了。比例相差越大，损伤程度越重，预后越差。（二）生化指标的综合判读

ALP的中度升高伴ALT及AST的明显升高说明肝脏受损。ALP的严重升高伴ALT及AST的明显升高则怀疑胆汁淤积性肝病。ALP严重升高而ALT及AST轻度升高可怀疑胆囊疾病或胆管阻塞。

ALB是在肝脏中合成的，所以在慢性、损耗性肝病、肝纤维化时ALB下降，且下降的程度与肝损伤的程度成正比。

BUN是在肝脏中由氨转化而来的。慢性肝病及肝衰竭时BUN降低。

GLU的明显降低是提示肝功能衰竭的，但动物在患肝病就医时往往因为紧张而导致GLU的轻度升高，尤其在猫，这并不能说明胰岛病变。

（二）生化指标的综合判读2、肾脏疾病

BUN与CRE在诊断肾脏疾病时要联合判读。BUN单独升高或BUN升高明显大于CRE的升高(BUN:CRE>20:1时，单位是mg/dl)时，提示为肾前性尿毒症，肾脏没有发生病变。在肾后性尿毒症早期时，CRE的升高往往要大于BUN的开高。肾源性升高是判断预后的重要因素。（二）生化指标的综合判读3、糖尿病

GLU轻度升高不能说明动物已患上糖尿病，即使血糖高于正常一倍也不能立即确诊。应同时监测尿糖，尿糖为阳性时诊断准确率要大大提高。但长期有糖尿病的动物因肾糖阂的升高而引起高GLU，但尿糖阴性。能引起GLU轻度升高的疾病很多，但最常见的原因是抽血时动物紧张及挣扎，尤其在猫。

BUN及CRE的升高提示有可能发生糖尿病性肾病，但要注意BUN:CRE>20:l(mg/dl)时只提示肾前性尿毒症。（二）生化指标的综合判读4、胰腺炎AMY的重度升高提示胰腺炎的急性损伤期；LIPA的中重度升高提示胰腺炎，因其半衰期长，所以诊断意义大于AMY。但以上规律在猫不明显；血Ca在坏死性胰腺炎时有明显降低，预后慎重；GLU的升高提示胰腺受损严重，预后慎重；重症胰腺炎引起急性肾衰时BUN及CRE明显升高。（二）生化指标的综合判读

5、库兴氏综合征

ALP升高；ALT及AST的轻度升高，提示肝糖原贮存量升高，发生肝损伤时明显升高。

蛋白分解代谢加快和肌肉消耗可导致BUN及CRE升高。发生继发性糖尿病时GLU升高。

采血方法末稍采血心脏采血静脉采血可根据动物的种类和用血量的多少来选择适当的采血方法，主要的采血方法有：一血液的采集与抗凝末稍（毛细血管）采血：用血量比较少，比如马牛在耳尖部；猪、羊在耳边缘；仔猪和小动物还可剪去尾尖部采血。此操作方法比较简单。末稍采血适用于一些小动物和家禽用血量大时可采用此方法。操作方法：鸡的采血方法：1、常用方法，右侧卧保定，用手在左侧触摸心搏动最明显的地方刺入或是从胸骨脊前端至背部下凹处连线的1/2处垂直刺入2~4cm或是三叉神经处即可采得。2、对成年鸡还可以将其仰卧保定，在胸腔入口处水平进针。心脏采血兔的心脏采血：将兔仰卧保定，在第3肋骨胸骨的左缘3mm处用注射针垂直刺入心脏。或用手触摸心搏动最明显处进针。心脏采血猪、兔的静脉采血：耳静脉、如用量多时，对仔猪或中等大小的猪可选择前腔静脉采血。

部位：将仰卧保定，拉直两前肢使体中线垂直或使两前肢向后与体中红线平行。手持针管，针头斜向后方与地面呈60°角，向右侧或左侧胸前窝刺入进2-5cm,即可。静脉采血牛、马、羊:

一般都在颈静脉，在上1/3与中1/3交界处，局部剪毛，消毒，手压近心端，待静脉怒张时，右手持针头对冷血管刺入即可。奶牛还可以有腹壁皮下静脉（乳前静脉），牛还可能在尾中静脉（2、3尾椎间）。静脉采血犬、猫、猴的采血：常在后肢外侧小隐静脉和前臂皮下（头静脉），位于前肢腕关节正前方稍向内。鸡的静脉采血：翼根静脉。静脉采血

1、EDT二钠盐，一般配成10%的浓度。0.1ml可使5ml的血液不凝固。

2、草酸盐合剂，铵盐和钾盐按3:2的比例，配成2%的浓度。此溶液0.5ml可以使5ml的血液不凝固。常用抗凝剂3、枸橼酸钠，常用3.8%的浓度效果最好，1ml可使4ml的血液不凝固。

4、肝素，是一种生理性的抗凝剂。所用制剂多为肝素的钠盐或是钾盐，常用浓度为1%，0.1ml可使10ml的血液不凝固。常用抗凝剂1、在采血过程中要对动物和用血量的多少选择适当的采血方法。2、采血过程中要对动物进行必要的保定。3、采血的基本步骤为保定、剪毛、消毒、进针、采血、止血几个步骤。4、若血液需要加抗凝剂时，应根据实验的项目及抗凝剂的特点来选择适当的抗凝剂。5、实验项目应尽早进行，抗凝血不宜放置过久。注意事项尿沉渣显微镜检验尿沉渣检查，在临床上很重要，故一般住院病畜应作此项检查。检查时应特别注意识别尿液中各种有形成分，各种上皮细胞、脓球、细菌及无机盐等。尿中有机沉渣检查红细胞白细胞上皮细胞管型无机盐沉渣检查碳酸钙磷酸铵镁结晶草酸钙三、尿液的化学检验（一）酸碱度测定（pH值）1、测定方法：检查尿的酸碱度常用广泛pH试纸法，将试纸浸人被检尿内后立即取出，根据试纸的颜色改变与标准色板比色，判定尿的pH。2、正常参考值健康动物尿液的pH值为：马7.2～7.8，牛7.7～8.7，犊牛7.0～8.3，山羊8.0～8.5，羔羊6.4～6.8，猪6.5～7.8，犬6.0～7.0，猫6.0～7.0，兔7.6～8.8。3、临床意义1）酸性尿液：生理性酸性尿液主要见于食肉、吃奶仔畜、过量饲喂蛋白质、饥饿和长时间运动等。病理性酸性尿液主要见于各种热性病、严重腹泻、呼吸性酸中毒、酸中毒（糖尿病、尿毒症），内服酸性盐类药物（如酸性磷酸盐、氯化铵等）。2）碱性尿液：生理性碱性尿液见于草食动物。病理性碱性尿液主要见于膀胱炎和膀胱麻痹造成的尿潴留、碱中毒等，及使用碱性盐类药物（如碳酸氢钠、柠檬酸钠、乳酸钠等）。（二）、蛋白质检验尿蛋白的测定是尿液中化学成分检查的一个主要项目，尿液中混有血液、脓或生殖道分泌物等，易造成“假性蛋白尿”，应与蛋白尿予以区分。确定蛋白尿后应区分是一过性、间歇性或持续性的。一过性蛋白尿尿蛋白程度轻，持续时间短或间歇出现，可能是体位性、功能性或病理性的。如果由某些诱因引起，待解除后在短期内可消失。持续性蛋白尿都属病理性的，有肾实质损害，动物常有原发病的临床表现。间歇性蛋白尿试验：定期测定尿蛋白，可区分间歇性与持续性的蛋白尿，全日中各次尿标本的蛋白量均超过正常为持续蛋白尿。体位性蛋白尿试验：与动物的体位有关。健康动物尿中仅有微量蛋白质，一般方法不能检出。检验尿中蛋白质时，被检尿必须澄清透明，对碱性尿和不透明尿，需经过滤或离心沉淀，或加酸使之透明，如向被检马尿内加入10％醋酸而使马尿液酸化透明。1．煮沸加酸法（1）原理蛋白质加热后凝固变性而呈现白色混浊。加酸可使蛋白质接近其等电点，促进其凝固，并溶解磷酸盐或碳酸盐所形成的白色混浊，以免干扰结果的判定。（2）操作方法取酸化的澄清尿液约半试管（酸性及中性尿不需酸化，如混浊则静置过滤或离心沉淀使之透明），用酒精灯于尿液的上部缓慢加热至沸腾，观察。如煮沸部分的尿液变混浊而下部未煮沸的尿液不变，则需判断是尿蛋白阳性和假阳性。待尿液冷却后，原为碱性尿，加10％硝酸1～2滴，原为酸性或中性尿，加10％醋酸1～2滴，如混浊不消失，证明尿中含有蛋白质，为蛋白质阳性；如混浊物消失，证明尿液中含磷酸盐类、碳酸盐类，为尿蛋白阴性。（3）结果判定阴性（—）：不见混浊；＋：白色混浊，不见颗粒状沉淀；＋＋：明显白色颗粒混浊，但不见絮状态沉淀；＋＋＋：大量絮状混浊，不见凝块；＋＋＋＋：可见到凝块，有大量絮状沉淀。2．磺基水杨酸法（1）原理蛋白质与磺基水杨酸离子结合，生成不溶解的蛋白质盐沉淀析出。（2）操作方法取酸化尿液2～3ml置于试管中，加入10%磺基水杨酸甲醇溶液（磺基水杨酸20g，加蒸馏水至100ml，再加入甲醇100ml）5～10滴，3～5min后，在黑色背景下观察判定结果。（3）结果判定阴性（—）：不见混浊；＋:轻微白色浑浊；＋＋：稀乳样浑浊；＋＋＋：乳样浑浊或有少量絮片；＋＋＋＋：絮片状浑浊。（4）注意事项本法灵敏度高，但易出现假阳性，最好与煮沸法对照观察。当尿中有尿酸、酮体或蛋白质存在时，出现轻度混浊而呈假阳性反应，但加热后混浊即消失，而蛋白质所生成的混浊加热后不消失。（三）尿中血液及血红蛋白的检验健康家畜的尿液中不含有红细胞或血红蛋白。尿液中含有不能用肉眼直接观察的红细胞或血红蛋白叫做尿潜血（或叫隐血）。1、原理尿液中的血红蛋白或红细胞被酸破坏所产生的血红蛋白有过氧化氢酶的作用，但其并不是酶，它可以分解过氧化氢而产生新生态的氧，使联苯胺氧化呈蓝色的联苯胺蓝。2、器材与试剂

20ml带塞试管和小试管各1支；滴管；普通滤纸；酒精灯；试管夹；联苯胺3g；冰醋酸2ml；过氧化氢溶液；乙醚3ml；95％乙醇。3、操作1）联苯胺法取一只大试管，加联苯胺冰醋酸1ml，再加过氧化氢1ml,震荡混匀，再缓缓加入被检尿液1ml，在5分钟内观察，交界面是否出现蓝绿色，若5分钟内出现蓝绿色，说明尿潜血阳性，表示尿中有血红蛋白存在。（1~2分钟内出现为四个加号）注：a若加入过氧化氢后马上出现蓝绿色，说明试管不干净

b加入尿样时应缓缓加入本法简单且比较灵敏，但是如果尿液中存在大量磷酸盐时，可发生乳白色沉淀，使反应无法测出。如果遇到这种情况可选用“改良联苯胺法”。2．改良联苯胺法取尿液10ml置于试管中加热煮沸（以破坏可能存在的过氧化氢酶，防止假阳性的干扰），待冷却后，加人冰醋酸10～15滴，使尿呈酸性，再加乙醚约3ml，加塞充分振摇，然后静置片刻，使乙醚层分离，如果乙醚层成胶状不易分离时，可加人95％乙醇数滴以促进其分离。血红蛋白在酸性环境下，可溶于乙醚内，取滤纸一小片，滴加联苯胺冰醋酸饱和液数滴，再在此处滴加上述乙醚浸出液数滴，待乙醚蒸发后，再滴加新鲜过氧化氢液1～2滴，如果尿液内有血液存在，滤纸上可显现蓝色或绿色，其颜色深度与含量成正比。（四）判定根据颜色的深浅判定，十：绿色；十十：蓝绿色；十十十：蓝色；十十十十：深蓝色。

二、尿液的物理学检验（一）、尿量动物的尿量不仅与饲料、饮水、运动有关，而且与环境温度相关。动物的尿量一般较为恒定，24h内健康动物排尿量见下表。

动物种类尿量（L）动物种类尿量（L）马3~6猪2~5牛6~12犬0.5~2绵羊、山羊0.5~2骆驼8~12当尿量增高到一定程度时，便出现多尿。多尿可可分为生理性多尿和病理性多尿。生理性多尿见于大量的饮水及使用利尿药物，病理性多尿常见于糖尿病、急性肾功能衰竭的多尿期及肾小管酸性中毒等。当尿量减少到一定程度时，出现少尿。尿量减少常见于急性肾小球肾炎，急性肾功能衰竭少尿期，心力衰竭、高热及各种原因引起的脱水等。（二）混浊度（透明度）马属动物尿中含有大量悬浮在粘蛋白中的碳酸钙和不溶性磷酸盐，故刚刚排出即不透明而呈混浊状，尤其终末尿明显。尿液暴露于空气中后，因酸式碳酸钙释放出二氧化碳后变成难溶的碳酸钙，致使尿混浊度增加。马尿混浊度增加或其他动物新鲜尿液呈混浊不透明者，均为异常现象。可能因含有炎性细胞、血细胞、上皮细胞、管型、坏死组织碎片、细菌或混入大量黏液，而见于肾脏、肾孟（盏）、输尿管、膀胱、尿道或生殖器官疾病，也可能因含有各种有机盐或无机盐类而见于泌尿系统或全身性疾病过程中。欲行鉴别须进行尿样本的显微镜检查。马属动物尿变透明、色淡、清亮如水者，除因喂饲精料过多和过劳外，也是病理现象。见于纤维性骨营养不良，慢性胃肠卡他等使尿变酸性时。其他动物尿过于透明，常为多尿结果（三）、尿色在正常情况下，尿液因含有尿色素、尿胆素及卟啉等，呈现黄色，健康动物尿色因动物种类、饲料、饮水及使役状况等不同而存在差异。马尿液为较深黄色，犬尿液为鲜黄色，黄牛尿液为淡黄色，水牛尿液为水样外观。陈旧尿液则颜色加深。尿液的颜色可因各种病理变化及某些代谢物、药物等的影响而改变。1、黄尿尿色变棕黄色或深黄色，多为饮水不足或脱水性疾病所致。当阻塞性黄疸或肝实质性黄疸时，尿中胆色素增加，此时尿液呈黄褐色或啤酒色，摇振时易起泡沫，其泡沫也被染为黄色。2、红尿红尿是尿液变红色、红棕色甚至棕黑色的泛称，并非指某一种尿，有可能是血尿、血红蛋白尿、肌红蛋白尿、卟啉尿或药尿。1）血尿尿中混有血液时，因血液多少不同，而呈淡红或棕红色。血尿的特点是浑浊而不透明，摇振时呈云雾状，放置后有沉淀，镜检可发现多量红细胞，如血尿排于地面上，可见血丝或血块。注意观察排尿时，是整个排尿过程中尿液发红，或是排尿开始阶段或终末阶段的尿液发红。排尿初始，尿色鲜红，多为尿道病变或尿道损伤；终末阶段尿变红，常为膀胱病变所引起（如急性膀胱炎、膀胱结石或肿瘤等）；若排尿的全过程尿液均发红，为肾脏或输尿管病变所引起。2）血红蛋白尿尿中含有游离的血红蛋白，称为血红蛋白尿。特点是尿色褐红或呈酱油色，尿液透明、均匀，放置或离心后无沉淀，镜检无红细胞。血红蛋白尿是溶血性疾病的标志，见于新生骡驹溶血性黄疸病，马、牛巴贝斯虫病，牛血红蛋白尿病等。3）肌红蛋白尿肌红蛋白尿的尿色为红褐色，可见于肌病、马肌红蛋白尿症及硒缺乏症。4）药物性红尿动物用药后也可出现红尿，如安替比林、硫化二苯胺、蒽醌类药剂、氨苯磺胺及酚红等可使尿色变为红色。3、乳白尿如果尿液呈乳白色，多因肠道吸收的乳糜液进人受阻淋巴道，逆流入尿液所致，或是由于泌尿道细菌感染引起的脓尿和菌尿。尿中含有脂肪而使尿液呈乳白色，镜检可观察到脂肪滴和脂肪管型，见于犬脂肪尿病。此外，白色尿也见于肾盂及尿路的化脓性炎症。除上述情况外，给动物内服或注射某些药物，也可使尿液颜色发生改变，如内服呋喃唑酮，尿呈深黄色；内服芦荟时，尿呈红黄色；注射美蓝或台盼蓝后，尿呈蓝色；这些情况可通过病史调查而查明。（四）、气味尿液的气味来自尿内的挥发性有机物和酸，正常动物刚排出的尿略有有机芳香族气味，这与饲料的性质有关，因为有些蛋白质含有苯环的氨基酸，代谢后排出挥发性较强的芳香物质较多，气味可较强。尿液存储较长时间后，因尿素分解而有氨臭味，见于膀胱炎、膀胱麻痹、膀胱括约肌痉挛、尿道阻塞等时；当发生膀胱或尿道溃疡、坏死、化脓或组织崩解时，由于蛋白质分解而尿液带腐臭味；羊妊娠毒血症、牛酮病、产后瘫痪等时，尿液有酮味，如同烂苹果样气味。（五）比重（密度）正常尿液比重以溶解于其中的固体物质为转移。正常情况下，尿比重与肾脏排出的水分、盐类和尿素量有关。在病理情况下，尿比重还与糖、蛋白、细胞损伤程度、代谢、组织分解与合成情况等有关。1、测定方法选用刻度为1.000-1.060的比重计作为尿比重计。测定时，将尿盛于适当大小的量筒内，然后将尿比重计沉入尿内，经1-2min待比重计稳定后，读取尿液凹面的读数即为尿的比重数。注：1）、尿量不足时，可用蒸馏水将尿稀释数倍，最多不能超过两倍。然后将测得尿比重的最后两位数字乘以稀释倍数，即得原尿的比重。2）、测定时应在15℃的室温中进行，因为尿比重计上的刻度是以尿温为15℃时而制定的，故当尿温高于15℃时，则每高3℃应于测定的数值中加0.001；温度每低3℃，则于测定的数值中减去0.001。如尿比重计标明是以20℃为标准制定的，亦应用同法修正测定的结果。一、尿液的采集（一）尿液的采集方法动物的尿液可通过排尿、压迫膀胱、导尿或膀胱穿刺等采集。通常最好在早上采取尿样，因为这通常是一天中尿样浓度最高的时候。1．自然排尿尿液检查2．压迫膀胱排尿3．导尿一般情况下，尽量避免用导尿的方法来采集尿样。如果采用导尿来采集尿样，使用的导尿