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文档简介
核酸的理化性质
核酸的相对分子质量核酸是生物体内的大分子化合物。相对质量比较大,一般为106-1010
之间。不同生物体内的DNA的相对分子质量差异很大。RNA的相对分子质量也在数百到数百万之间。
核酸的溶解性和黏度生物体内的核酸属于极性化合物,一般溶于水不溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂。
生物体内DNA的结构比较细长,即使很稀的浓度也有极大的黏度。当DNA变性时,黏度下降。RNA分子的黏度比DNA小。
核酸的酸碱性
核酸分子结构中既包括含有酸性的磷酸基团,又含有碱性的碱基,所以核酸是两性电解质,一般条件下,由于碱基是弱碱性,所以核酸常表现出酸性。核酸的紫外线吸收
核酸分子中的碱基都含有共轭双键,对260nm的紫外光具有强烈的吸收作用。因此,可用紫外分光光度法对核酸进行测定。
实验室中最常用这一特性定量测定小量纯的DNA和RNA。也可用紫外法检测样品是纯品,检测时用紫外分光光度计读出260nm和280nm处的OD值,从OD260/OD280的比值即可判断样品的纯度。
检验待测样品是否纯品可用紫外分光光度计读出260nm与280nm的OD值,从OD260/OD280的值即可判断样品的比纯度。纯DNA的OD260/OD280应为1.8
纯RNA的OD260/OD280应为2.0
样品中如含有杂蛋白及苯酚,OD260/OD280的值即明显降低。
对于纯的样品,只要读出260nm的OD值即可算出含量。通常按1OD值相当于50μg/ml双螺旋DNA,
40μg/ml单螺旋DNA(或RNA)2μg/ml寡核苷酸计算。这个方法既快速又准确,而且不会浪费样品。对于不纯的核酸可以用琼
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