《兽医实验室诊断》课件-6血液学检测血气指数分析

百年生机为时养器血液学检测，血气指数分析血液处理，血气指数分析CONTENTS01血液学检测02血气指数分析血液学检测Part-1血液学检测一（一）血液学检测的临床意义

目前，兽医临床与入医临床一样，都致力于提高即时服务水平，这样可以提供更好的客户服务和提高兽医医疗水平。

血液学检测是兽医技术员应掌握的一项重要技能，可为兽医提供准确可信的临床实验室检结果。理解各种血液学试验和检测方法的原理对于保证结果的准确性至关重要。通过血液学检测，为兽医技术员提供了进行额外诊断检测的方法、改善动物的护理并且增加诊所创收的机会。

血液中各种化学成分的测定有助于准确诊断，采取适宜的治疗及判断疗效。所测定的化学成分一般与特定器官的功能有关，这些化学成分可能是与特定器官功能相关的酶或特定器官的代谢产物或代谢副产物。完整的血液学检查适用于对疾病状态的诊断评估、健康动物的体检(如老年动物)和手术前的筛查。分析这些化学成分通常需要小心地采集血清样品，一些病例可能需要血浆。一血液学检测（二）血样的采集

准备采血时，技术员应首先确定需要进行何种检测。这在某种程度上决定采血所需的器具和采血的部位。样本必须在没有使用任何药物治疗前采集。如果已经进行了治疗，需在采血记录上予以注明。一旦动物接受了某些药物治疗，一些检测方法就无法得到准确的结果。

首选的血源是静脉血。颈静脉采血是常见动物最适合的采血途径。有些动物可能没有合适的采血静脉或采集静脉血可能会对其造成过度伤害。这时可能需要通过外周或毛细血管采血。右表列出了常用的采血部位。采血前采血部位必须用酒精擦拭清洁。酒精挥发后再进行采血操作。动物应保定，但应尽量减少入工保定。保定过程应尽量减少动物应激，动物应激通常会造成样品结果误差。犬头静脉颈静脉隐静脉猫头静脉颈静脉牛尾静脉乳房静脉颈静脉马颈静脉鸟类翅脉剪指甲兔耳静脉剪指甲啮齿类尾静脉心脏穿刺动物常用采血部位血液学检测一采血器具的选择：传统的采血工具是针头和注射器。用这种方法采血时，应选择适合动物的最大号针头。注射器应选择最接近采样容量的型号。使用过大的注射器可能造成动物静脉塌陷。最好的采血工具是真空采血系统。这种采血系统由一个针头、持针器和采集管组成。采集管可能是不含或含有抗凝剂的无菌管。管的容量从几微升至15

mL不等。采血时应选择合适型号的采集管，以减少样品的损伤并避免静脉塌陷。基于管内真空压力的大小，采集管内应采集适量的血液，以保证抗凝剂和血液成最佳比例。这种方法的优点之一是可以用不同的采集管采集多份样品，而不需要反复进行静脉穿刺。使用真空管采血的操作正确时，所得样品的质量最好。一血液学检测（三）血液样品的处理样品的处理方式直接影响化验结果的可信度，许多化学成分的分析需要采集血液并制备血清样品，全血或血浆适用于某些检测方法或某些特殊类型的仪器。一般化学分析仪都附有说明书指明所需样品的类型。1.全血

兽医技术员采集全血样品后，将其装入含适当抗凝剂的容器内防止凝集。血液采集后要尽快与抗凝剂混合，摇动手法应轻柔。剧烈晃动可造成溶血，红细胞内的化学物质释放入血浆，从而影响分析结果的准确性。2.血浆血浆是全血的液体组分，细胞则悬浮于其中。它主要由近90%的水和10%的溶质组成，如蛋白质、碳水化合物、维生素、激素、酶、脂肪、盐类、废物、抗体及其他离子和分子。离心后，吸收样品时严禁吸入试管下层的细胞，以确保样品内无任何细胞。如果样品不能在1h之内离心，则须冷藏保存。如果肝素沉凝的血浆在分离后保存过夜或冷冻保存，在检测前应将样品再次离心，以除去可能存在的纤维蛋白团块。冷冻会影响某些检测结果，因此应详细阅读检测说明，以确定哪些检测需在样品冷冻前完成。

血浆样品的制备：（1）.采集血液样品，置于含有适量抗凝剂的试管内。（2）.缓慢摇动试管12次，以混匀血液。（3）.确定试管已密封，避免样品在离心过程中蒸发。（4）.以2000～3000rpm离心（血样采集后1h之内进行)10min。（5）.小心地用毛细移液管将血浆层移出。（6）.将血浆置于标记有日期、采集时间、动物名称和病历号的试管内。（7）.立即操作、冷藏或冷冻样品。一血液学检测3.血清血清就是除去纤维蛋白原(一种血浆蛋白)的血浆。凝血过程中，血浆中可溶性的纤维蛋白原转变为不可溶性的纤维蛋白。血液凝集时，凝血块周围析出的液体即为血清。离心时，转速超过2000~3000rpm或离心时间过长都可能造成溶血。离心分离时，血清分离管(SST)内的一种凝胶会在血清或血浆和血细胞之间形成物理屏障。此外，试管内壁还含有能促进凝血的二氧化硅颗粒。血液采集入SST试管后，应缓缓将试管上下倒置几次混匀，然后在离心前使血液凝集30min。任何测定延迟时，都应将血清从SST试管中移出并置于无菌试管中，然后将样品冷藏或冷冻保存。冷冻会影响一些检测结果，因此应详阅检测说明，以确定哪些检测须在样品冷冻前完成。

血清样品的制备过程：（1）.采集血液样品，并将其置于不含抗凝剂的试管内。（2）.室温下自然凝集20～30min。（3）.轻轻地用木棉棒沿着试管壁分离血凝块。（4）.密封试管，以2000～3000rpm的速度离心10min。（5）.用毛细移液管将血清移出。（6）.将血清置于标记有日期、采集时间、动物名称和病历号的试管内。（7）.合理冷藏或冷冻样品。一血液学检测（四）抗凝剂的选择需要用全血或血浆进行检测时应使用抗凝剂。抗凝剂是加入血液样品中防止或延缓其凝集的化学物质。特定抗凝剂的选择应基于待检项目而定。有些抗凝剂会影响分析，因此应了解检测项目以选取适当的抗凝剂。有的抗凝剂会干扰特定的凝集试验。除了选择抗凝剂之外，检测前血样和抗凝剂必须完全混匀(轻柔地倒转)。1

h内不进行检测的样品应冷藏。分析前应先取出恢复到室温，并轻柔地倒转混匀。全血不能冷冻，因为在冷冻和解冻过程中血细胞会发生溶解。血液学检测一1.草酸盐和柠檬酸盐

草酸盐有钠、钾、铵或锂盐制剂。柠檬酸盐有钠盐或锂盐制剂。钙是形成血凝块的必要物质，草酸盐和柠檬酸盐通过与钙形成不溶性复合物而阳凝血。草酸钾是最常用的草酸盐制剂，每毫升血防中加入1~2mg可防止凝血。柠檬酸钠也很常用，特别是输血时。目前市场上有商品化的含有适量为酸盐和柠檬酸盐抗凝剂的真空采集管。但是，草酚盐还可结合酶发挥活性所必需的金属离子。草酸钢盐可抑制乳酸脱氢酶和碱性磷酸酶的活性。因为是钾盐，不能用于分析钾离子浓度的血样。柠檬酸钠也可干扰钠离子的分析和许多常见的血液化学检测。2.乙二胺四乙酸二钠

乙二胺四乙酸(EDTA)不改变细胞形态，因此是血液学检查的首选。当血浆样品要用于化学分析，则不能使用。EDTA有钠盐或钾盐制剂，通过与钙形成不溶的复合物而阻止凝血，而钙是形成血凝块的必要物质。EDTA

管有含液体和粉末两种。液体的会对样品造成一定程度的稀释。为防止凝集，每毫升血液就加入1~2

mg

EDTA。商品化真空管内含有适量的EDTA。过量EDTA可造成细胞收缩，用自动分析仪进行细胞计数时造成结果无效。血液学检测一3.氟化钠

作为葡萄糖防腐剂的氟化钠，也有抗凝血的作用。作为抗凝剂时，每毫升血液应加入6~10

mg氟化钠。目前市场上有商品化的含适量氟化钠的真空采集管。即使存在其他抗凝剂，氟化钠还可作为葡萄糖防腐剂加入样品中。作为葡萄糖防腐剂，每毫升血液中加入2.5

mg氟化钠即可。氟化钠可干扰许多项血清酶检测。4.肝素

对于大部分需用血浆的检测，特别是血液化学分析，肝素是最适合的抗凝剂。肝素不可用于血涂片的分类计数，因为抗爱剂会干扰白细胞套色。肝素有钠盐、钾盐、锂盐或铵盐制剂。肝素通过阻止凝血过程中凝血酶原向凝血酶转化而发挥作用。由于肝素可造成白细胞凝集和干扰白细胞正常着色，因此肝素不可用于白细胞分析。每毫升血液中应加入20∪的肝素。商品化真空采集管内含有适量肝素。这些真空管在需要采集多个样品时最适用。血液学检测一（五）样品量

采血量是由用于检测所需的血清或血浆量和动物的水合状态决定。例如，水合状态良好的动物，细胞压积(PCV)为50%，则血样中含50%的细胞和50%的液体。10

mL的血样可提供5

mL的液体。对于脱水动物，血液浓缩会引起液体和细胞的比值缩小。PCV为70%的脱水动物，血样中含有70%的细胞和30%的液体，这意味着10mL血样中只有3

mL液体。

根据经验，采集的血样须为全部检测项目所需量的3倍，从而在技术员失误、仪器故障或需稀释样品时，不必重复采样。

在进行任何检测前，血样必须充分混匀，混合不充分会造成错误的结果。一血液学检测（六）影响结果的因素1.溶血

使用湿注射器采血、采集后剧烈地混合血样、施压使样品经针头注入试管或将全血样品冷冻都可能造成溶血。由于注射器内贮留的水会导致溶血，因此，用于采血的注射器必须干燥。将血液注入试管内之前，必须将注射器的针头拔掉，因为迫使血液从小针孔通过时会造成血细胞破裂，将血样移入试管时，兽医技术入员必须缓慢地将血液从注射器内推出，且要避免产生气泡。用过量的酒精擦拭皮肤且皮肤未干时便采样也会导致溶血。2.化学污染

常规化学测定所需的样品试管无须无菌，但必须是化学纯的。重复使用的试管必须将洗涤剂完全清洗干净，以免影响试验结果。3.不合理的标记

样品采集后，如果未立即在试管上做标记，可能会导致严重的错误。试管上必须标明日期、采集时间，动物名你和病历号。送检前，兽医技术入员应核对样品标记和送检表两次，制备样品和检测时也是如此。4.不适当的样品处理

理想情况下，所有的化学测定都应在样品采集后1h内完成，但实际中并不总是如此。在这种情况下，必须正确处理和保存样品，从而使它们的化学成分接近采集时动物体内的水平。样品温度不能过高，因为高温会破坏样品的些化学成分及活化某些物质。如果血清或血浆样品被冷冻保存，解冻后必须混匀，避免产生浓度差。5.动物的影响

临床中，血样采集前动物应禁食。采食后，血糖水平立刻升高，无机磷水平则会下降。餐后脂血症可导致血浆或血清呈混浊或云絮状。进食后肾小球滤过率一过性地升高也会影响肾功能指标的检测。采集血液前，不用限制饮水。血气指数分析Part-2血气指数分析二（一）概念血气分析（BG）是应用血气分析仪，通过测定动物血液的H+浓度和溶解在血液中的气体（主要指CO2、O2），来了解动物呼吸功能与酸碱平衡状态的一种手段，它能直接反映肺换气功能及其酸碱平衡状态。采用的标本常为动脉血。适用于：低氧血症和呼吸衰竭的诊断；呼吸困难的鉴别诊断；昏迷的鉴别诊断；手术适应证的选择；呼吸机的应用、调节、撤机；呼吸治疗的观察；酸碱失衡的诊断等。血气分析仪可直接测定的有动脉氧分压（PO2）、动脉二氧化碳分压（PCO2）、动脉氢离子浓度（pH），并推算出一系列参数，发展到今天可测定50多项指标。血气指数分析二（二）各检测指标解读1、酸碱度(pH)

参考值7.35～7.45。<7.35为酸血症，>7.45属碱血症。但pH正常并不能完全排除无酸碱失衡。2、二氧化碳分压(PCO2)

参考值(各种动物有差异)乘0.03即为H2CO3含量。超出或低于参考值称高、低碳酸血症。是判断各型酸碱中毒主要指标。3、二氧化碳总量(TCO2)

代表血中CO2和HCO3之和，在体内受呼吸和代谢二方面影响。代谢性酸中毒时明显下降，碱中毒时明显上升。4、氧分压（PO2）

为物理溶解于血液中的氧所产生的张力。检测指标二5、动脉血氧含量（O2ct）

是指每100ml血液中实际带氧量的毫升数，包括物理溶解在血液中的氧和以化学结合形式存在的氧。O2ct能真实地反映动脉血液中氧的含量，是较可靠的诊断缺氧和低氧血症的客观指标。6、氧饱和度(SatO2)

95℅～98℅是指动脉血液中Hb在一定氧分压下和氧结合的百分比，即氧合Hb占Hb的百分比。O2sat仅仅表示血液中氧与Hb结合的比例，虽然多数情况下也作为缺氧和低氧血症的客观指标，但与PO2不同的是它在某些情况下并不能完全反映机体缺氧的情况，尤其当合并贫血或Hb减低时，此时虽然O2sat正常，但却可能存在着一定程度的缺氧。7、实际碳酸氢根（AB）

AB是体内代谢性酸碱失衡重要指标，在特定条件下计算出SB也反映代谢因素。二者正常为酸碱内稳正常。二者皆低为代谢性酸中毒（未代偿），二者皆高为代谢性碱中毒AB>SB为呼吸性酸中毒，AB<SB为呼吸性碱中毒。检测指标二8、剩余碱（BE）

BE(B)和BE(ecf)代表体内碱储备的增加或减少，是判断代谢性酸碱失衡的重要指标。9、