猪场若发生非洲猪瘟后如何做好清场净化工作以达到成功复养

摘要本文通过介绍ASFV感染规模化猪场清场净化、成功复养的典型案例，综合归纳了ASF生物安全防范的关键点，主要在于营造猪场阴性环境、引入阴性种猪；一切工作的重心是将病原隔离、远离养殖场；所有可能携带病原的风险因子，如车辆、人员、野兽、生活物资和雨水等，都必须严谨消杀，做到ASFV阳性止步于场外，病原检测不阴性不入场；防控的终极目标是控制传染源，消除病原一切入场机会。1背景非洲猪瘟（Africanswinefever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（Africanswinefevervirus，ASFV）引起的1种急性、出血性、烈性传染病，主要感染家猪和野猪。非洲猪瘟自1921年第1次在肯尼亚被报道，至1957年才从非洲传播至西欧和拉美，经历近100年，该病流行趋势不仅未被遏止、净化，在2007年后还加速传播至更多的国家和地区。2017年3月，俄罗斯远东地区发生ASF疫情，离中国近在咫尺。2018年8月3日，中国动物卫生与流行病学中心确诊沈阳市发生ASF，是我国发现的首例非洲猪瘟病毒疫情报道，此后疫情在封控中快速传播，至10月21日在云南省昭通市、10月25日贵州省毕节市发生，在短短83d内全国从北到南基本完全蔓延。2019年8月，菲律宾多地也暴发ASF疫情。ASF尽管来势凶险顽固，早期世界范围内也不乏净化成功的案例，国内感染场净化复养也多有成功，以华中地区复养成功的一大型规模场为例，其净化综合措施具有可操作的典型性，借此重点阐述非洲猪瘟防范的生物安全关键点，利于养殖者参考借鉴，提高疫病重点防控的效率和效果。

2养殖场感染前基本状况猪场选址、布局合理，生物安全防范具备良好的“地利”基础。猪场地形依山丘规划，远离居民区、水源地和主干道。场内生产区和生活区呈东西轴向布局，间距约200m，中间地带为坡地林果绿化带，两区在夏秋季均不会因南北风产生相互干扰。妊娠舍与分娩舍以南北向主干道为轴，对称辐射排列。繁殖区规划妊娠舍连体8栋，每栋4列，每列48个限位栏，合计1536栏；分娩舍连体16栋，每栋2列，每列13个产床，合计416个床位。公猪舍1栋位于妊娠舍上风向，2列共24个栏，配置采精室和人工授精实验室。保育区位于繁殖区下风向接近出猪台，连体5栋，每栋2列，每列13栏，合计130栏，每栏可容纳30头保育猪。采用多点生产，育肥阶段在场外饲养点。疫情发生前存栏长大二元母猪1500多头，杜洛克公猪22头，疫情发生后拔牙失败，猪只全部清场无害化处理。根据日常生产管理流程评估风险等级，分析ASFV可能的感染途径有：第1位是外来运输猪车，消毒不够彻底，携带病原；第2位是飞鸦，猪场绿化好，远距离跨区扩散感染场病原；第3位是员工，每月固定月假，在外接触病原带入；第4位是食堂，采购市场菜品引入病原；第5位是饲料运输车，猪场交叉转运携带；第6位是雨水，可能尘霾、气溶胶携带病原随雨入场。3清场病原净化与生物安全防范设施配置清场后针对性采取全方位无死角的洗消处理，重置生物安全防范设施，核心目标为彻底净化猪场环境病原，为复养阻遏病原再次传入，关键环节与操作内容如下。1）养殖舍内环境循环清洗、消毒。栏舍采用烧碱溶液浸泡，高压冲洗，重点在排污沟、漏缝地板反面、天花板，以及猪只活动和排泄物触及的食槽、饮水器，湿帘风机和保温箱等设备内外尘垢。清洗干燥后，采用过硫酸氢钾溶液喷雾湿透消毒；在干燥后密闭养殖舍，采用烟熏剂熏蒸；最后采用热风机升温至60~80℃持续2h。连续多遍循环清洗、消毒程序，每个循环完成后进行环境采样检测ASFV，直至无阳性检出。2）养殖舍外环境循环清理、消毒。包括生活区、养殖舍外所有杂物、杂草全部清除、焚烧；洗消粪库、无害化冻库、道路和污水沟，然后采用烧碱溶液喷洒。环境同样采样检测ASFV，直至无阳性检出。3）养殖相关可移动用具、用品洗消。可清洗类型集中消毒池烧碱水浸泡，晾晒后集中管理间加温60~80℃持续烘烤2h。办公用品、档案资料采用烟熏剂密闭熏蒸消毒，采样检测至无阳性检出。4）重置养殖场重要通道。入场、出场口分别设置独立淋浴室和更衣室，只能单向通行，不能逆行。生产区、生活区的进、出双向通道，淋浴间共用，更衣间分开；必需品经高温烘箱传递窗进出，猪只出场通道只允许内部车停靠、转运。5）增设场外防非配套设施。包括洗消烘中心、三级隔离点、隔离场和检测实验室。外来运输车辆必经洗消烘中心规范处理，人员入场前必经三级隔离，引种必经隔离场待养。进场人员、物资、种猪必检，阳性止步。6）装备饲料全封闭自动化输送系统。外来运输车止步于场外料仓，消除饲料车交叉传播机会，颗粒料直接打入料仓，不用进入场内仓库，饲料经管道可输送至每一栋猪舍，阻断饲料二次污染途径。7）增配专用转运车。包括活猪、无害化死猪转运车，分别固定行驶路线、转运点和停放点，外部车辆不得直接靠近养殖场，一律经洗消烘中心完成洗消后在隔离点定点转接。8）装备必要防非隔离设备。养殖舍窗户、粪库采用网布封闭，隔离飞鸟；采用固定栏板围场，封闭场区外野兽或小动物进出通道，以及分隔净污道路线；搭建雨棚遮蔽猪只运动场，猪只不能接触雨水。9）配套功能场与繁育场同等级别防疫。多点育肥场、引种隔离场采用与繁育场相同处置程序完成净化操作，也保证无阳性检出。10）复养前终极处理。洗消完成连续3周3次全场采样检测至ASFV无阳性检出，养殖舍内外、沿路与道路两侧采用生石灰溶液套白，人员撤离出场，空场6个月，重新启用前再次采样监测3次，保证环境阴性。4复养场生物安全防范源头控制清场净化完成后，复养成功的关键是ASFV病原的源头控制，将一切可能的传染源阻遏在养殖场外，守住第1道防线是唯一的途径。4.1

引进种猪隔离、检测种猪来源一致，经检测ASFV阴性，场外隔离场集中观察饲养1个月。每周一采集猪唾液、粪便、食槽和环境样品进行ASFV检测，连续4周均未有阳性样本检出，转运入场。4.2

进场人员、物资的隔离、检测建立分级隔离、检测体制。进入生产区之前必须经历三级逐级隔离检测，阳性止步，不能越级进场，非ASFV阴性绝对不得接近养殖区。一级隔离检测点（间距2km），人员、物品分离，初检ASFV阴性，当天人员转送二级隔离检测点（间距1km）；物品经紫外线、臭氧48h消毒，检测ASFV阴性，送三级隔离检测点（间距50m）。二级隔离检测点人员封闭隔离3d，每天采集唾液、皮肤、头发、外衣与鞋底样品检测ASFV阴性，再送生活区外三级隔离检测点。三级隔离检测点人员隔离1d，检测阴性后进入生活区，当日不能进入生产区。物品60℃烘烤48h检测阴性入场内库房。4.3

人员洗澡、更衣进出场日常程序坚持不变所有人员在二级隔离检测点洗澡、更衣，换装公司统一提供的新衣、鞋。自带衣服、鞋袜全部替换，经专人消毒液浸泡、清洗、干燥，收藏在个人专柜。随身物品包括手机由消毒通道进入三级隔离检测点。三级隔离检测点单向入口，再次更衣、洗澡，衣服全部留置外更衣室，不得带入淋浴室或入场；淋浴后入内换衣室，着装场内衣服、鞋进入生活区。全过程单人单间不多人混杂，外更衣间、洗澡间、内换衣间消毒后备用。单向出场口由生活区另外设置独立通道，只能单向出场，更衣、洗澡、穿衣过程不可逆行、也不能交叉。生活区与生产区为双向更衣、洗澡、换衣程序，进出场示意图见图1。图1复养场进出场流程示意图4.4

高风险因素的全面管控1）外来运猪车辆不能直接抵近养殖区。车辆预先洗消完成后，再在500m外洗消烘中心完成二次洗消，停靠固定转运点等待场内转运车对接检验合格转运活猪或无害化处理死亡猪只。2）外来饲料罐车场外隔山止步。车辆洗消烘完成检测合格后，将颗粒饲料打入在场外坡底饲料塔，全封闭管道（约250m）越一道山坡远程输送到栋舍料仓，最后经管道输送至猪舍食槽。3）场外动物防范。除了养殖场围墙，整个生产区外围再构建栏板、拦网，阻断小动物流窜路径；固定人员、猪只行进路线，不交叉；隔断野生飞鸟、兽类进入通道。同时，养殖舍周边除草、灭鼠、杀虫，消灭可能潜在的传播媒介。4）实行雨污分流。雨污不混合，粪污注入沼气发酵池；雨水经独立管道排出场外，并且雨天不转运猪群，雨后人、猪通道必须全面消毒后才能进行猪只转运。5）常态化检测。每周五全场采样检测1次，主要采集三级隔离点、生活区厨房、公共道路等人员活动区；以及生产区各阶段猪只与环境，尤其休假返场员工负责生产区域。5复养成功的生物安全关键点1）感染场净化彻底。首先，清场的必要性。净化难度大，ASFV有囊膜，基因组为双股线状DNA，病毒大小170~190kb，基因组大，遗传稳定。病毒在猪体内多类细胞浆中复制，被感染猪只体液、内脏及排泄物中都存在ASFV，感染猪即是稳定传染源。其次，病毒存在中间宿主，存活时间较长。ASFV是仅有的虫媒DNA病毒，在家猪、野猪与蜱之间交叉感染，循环传播，可在钝缘蜱中增殖，存活几个月甚至几年，病毒在室温中可存活数周，低温暗室环境的血液中可存活6年，故必须完全清除病毒才能避免复发感染。再次，病毒净化是可行的。ASFV本身很容易被破坏，加热到55、60℃时血液中病毒存活时间分别只有30、10min，脂溶剂和消毒剂也都可以破坏、杀灭ASFV。最后，净化过程必须做到消杀病毒所有可能接触的环境和物料，并杀灭中间宿主。2）引种只能来源于ASFV阴性场。ASFV在猪体内的顽固性在国际上已经历长期的实践验证，在猪活体细胞中杀灭病毒不具备可操作性，病毒毒力也不会因自然传代完全丧失，即使弱毒株也会造成灾难性后果，带毒猪就是1个病毒工厂。因此，必须引入阴性场阴性种猪，并做好路途安全防范，风险区域不停留。引种须经隔离场30d以上的连续观察、检测，保证阴性猪群才能进场。ASFV应引起养殖者防疫观念的跃迁，认真评估引种风险的长期性，不能寄希望于可能与ASFV共存，应考量留种猪长期的自繁自养配套措施，将场际、猪群间的交流降到最低水平。3）让病原远离养殖场，阻断ASFV从场门进入的机会。实践证明，靠养殖场入口的消杀程序已无法保证将ASFV完全杀灭，大量检测结果显示外来车辆、进出员工、生活物资等都有一定比例的阳性检出，具有携带病原进场的风险。因此，防范ASFV必须“刀刃向外”，将防御外移，三级隔离程序证明是有效的。活猪、无害化死猪配置转运车也是让病原远离养殖场的有效途径之一，建议规模化猪场配制。4）病原入侵的媒介或载体必须阻隔在场外。①野兽类以及小动物流浪猫犬等，尤其野猪已经确证是可被ASFV感染且传播风险最高的媒介，物理屏障不够完善的养殖场必须加设挡墙或挡板阻止。②飞鸟类，虽然还未见鸟类携带ASFV传播疫情的相关研究报道，如偏好采食动物腐肉的乌鸦，偏好刨食粪库干粪和抢食饲料的鸟雀等，都可能远距离从感染场携带病原，必须驱离或围网隔离，使之无进场接触机会。③雨水，因尘霾、气溶胶可能携带病原，虽然目前的研究还不足以确认ASFV是否可以远距离空气传播，但大雨后1周左右开始发生疫情的养殖场不在少数，不应只是巧合。且ASFV在有水环境中存活更久，有研究表明，ASFV在水中比在饲料中具更高传染性。因此，具有露天运动场的养殖舍须要遮蔽封闭防雨防鸟。5）场内配套制定生产操作统一规范。①按工艺流程分阶段分区饲养。人员、物料尽量消除跨区流动，不串栋；规划好净、污道，不交叉，用不同颜色标记风险高低，高风险区禁止流入低风险区。②栋舍入口消毒隔离措施到位。将单一消毒池改进为踩消毒液后换鞋进入，设置活动门槛，内外工作鞋互不越界，并可防鼠类进入猪舍。③操作规范，饲养人员不得踩踏上产床、保育床操作。④完善日常消毒制度，以猪舍外为主，采用酸碱联合消毒法，猪舍内、外同步消毒，但是分别采用酸性或碱性消毒剂，轮替使用，形成固定制度，雨雪、雾霾后增补消毒。⑤做好动物福利，维持猪只舒适生活环境，以养代防，不过度采用有毒有害药物带猪消毒防疫。⑥延迟损伤性工作和严谨无害化处理。初生仔猪剪牙、耳缺、断尾等必须待仔猪能自主食乳、健康无病时执行，不过早伤害、增加感染风险。死胎、弱死仔、病猪组织、医疗废弃物等及时配置塑料包装袋分类无害化处理。⑦工作服勤换洗，养殖员工工作服每天换洗，长筒靴洗净后立于消毒池或倒立消毒室紫外线照射。⑧生活物资管控，食堂不采购畜类肉品，员工休假在家尽量不选购不携带猪肉菜品。⑨坚持例行检测，场内抽样监测与员工轮休返场同步进行；猪只不明原因体温升高、皮肤发红等及时采样检测。⑩科学组织生产体制，严谨设计批次化生产，严格执行全进全出，空猪舍洗消到位。ASFV的生物安全防范一样要遵循传染病预防的三大关键措施：