心血管病研究进展

男性女性国家或地区心血管病恶性肿瘤其他心血管病恶性肿瘤其他

备注保加利亚56.021.422.658.723.218.1男女均居世界之首罗马利亚50.220.529.356.721.222.1英国47.033.519.536.142.421.5前联邦德国39.833.127.033.241.225.5瑞典47.228.124.733.044.122.9芬兰48.924.526.639.335.225.4美国41.331.227.534.438.627.0加拿大37.236.626.228.546.425.1新加坡41.530.128.441.429.229.4男性在亚太地区最高中国城市37.932.229.942.026.431.6女性在亚太地区最高

（45岁以上人群中心血管病及肿瘤死亡占总死亡人数的百分率）WHO世界卫生统计年报美国用于心血管病的治疗费用2740亿美元我国用于心血管病防治费用1000亿元人民币心血管病是“第一杀手”国际疾病分类原则第九版(ICD-9）规定心血管病高血压病风湿热慢性风湿性心脏病缺血性心脏病肺心病脑血管疾病动脉粥样硬化先天性心脏病1.重大的心血管国际会议AHA:AmericanHeartAssociation(美国心脏协会)；ACC:AmericanCollegeofCardiology(美国心脏病学会)

；ESC：EuropeanSocietyofCardiology(欧洲心脏病学会)，ISHR：InternationalSocietyforHeartResearch

(国际心脏研究会）2.Medline文献检索选择前沿热点问题的依据心血管研究中的热点问题1.心肌细胞能否再生2.干细胞移植治疗心肌梗死3.动脉粥样硬化与炎症及免疫的关系与心血管疾病5.心肌损伤与保护6.心血管病的功能基因组学研究成熟个体的心肌细胞能否增殖与再生？热点之一：Ki-67

Ki-67抗原是增殖细胞核抗原,是一种与细胞周期相关的蛋白质，是目前多种恶性肿瘤尤其是乳腺癌研究中的热门生物指标，可以通过Ki-67抗原的检测，了解恶性肿瘤的细胞增殖活性。Ki-67标记梗塞心脏的心肌细胞distantmyocardiumtheborderzone(BeltramiAP:NEnglJMed344(23):1750-7,2001)梗塞心脏的分裂心肌细胞中可见到纺锤体IdentificationofMitoticSpindlesinDividingMyocytesfromInfarctedHeartstubulinPIa-actinMerge处于胞质分裂过程中的心肌细胞AMyocyteintheProcessofCytokinesis.梗塞心脏中有丝分裂的心肌细胞核梗塞心脏中心肌细胞的胞质分裂1-6心肌梗塞对有丝分裂心肌细胞数目的影响增殖的心肌细胞来源于哪里？移植的女性供体心脏中的染色体Y参见QuainiF:NEnglJMed346(1):5-15,2002thearrowsindicatethepresenceofKi-67,andtheyellowareasshowtheYchromosomes.女性供体心脏心肌细胞的Y染色体1-10男性受体细胞进入女性供体心脏的可能途径参见Schwartz-RobertS:NEnglJMed346(1):2-4,2002研究发现，有些鱼类和两栖类动物的心脏有很强的自我修复的能力，但这种现象在哺乳动物身上以前尚未看到。2011年，由美国得克萨斯大学研究者完成的一项实验发现，将刚出生一天的小鼠心脏的左心室尖切下一部分(占肌肉组织的15%)，很快小鼠的心脏便开始再生，21天后完全恢复，两个月后心脏功能恢复正常。但是，当研究人员给出生7天的小鼠进行相同手术后，心脏并未出现再生。因此表明，老鼠的心脏自主再生能力仅能维持非常短暂的时间。发表在《Science》。1.TurningBacktheCardiacRegenerativeClock:LessonsFromtheNeonate.TrendsCardiovascMed.2012Aug14.2.Epicardialprogenitorcellsincardiacregenerationandneovascularisation.VasculPharmacol.2012Aug11.3.Cardiacregenerationfromactivatedepicardium.PLoSOne.2012;7(9):e44692.4.Migrationofcardiomyocytesisessentialforheartregenerationinzebrafish.Development.2012Oct3.尚待进一步解决的问题1心肌细胞再生的机制2心肌细胞再生的来源3分离特异性的心脏干细胞干细胞移植治疗心肌梗塞热点之二：心肌梗死一般在冠状动脉闭塞后20～30min，即有少量心肌细胞

坏死，1～2h绝大部分心肌呈凝固性坏死，1～2周后坏死组织逐渐纤维化，6～8周成为陈旧性梗死灶。目前，对于心肌梗死的治疗方法，如溶栓治疗及冠状动脉旁路移植术，只能使其恢复再灌注，对于已经坏死的心肌并不能使其恢复功能。细胞移植则是一种新的治疗策略，它是把健康的细胞移植到病损的心肌中，加固其结构并改善其功能。动物实验已经显示了细胞移植代替心肌细胞的可能性，移植细胞可在宿主受损心肌细胞中存活，并增殖分化，改善宿主心脏功能。全能、多能干细胞移植

向心肌细胞分化

胚胎干细胞向心肌细胞分化

骨髓间充质干细胞胎幼心肌细胞移植骨骼肌卫星细胞移植90年代中~晚期90年代晚期90年代末至今特点：

（1）某些骨髓干细胞为多潜能细胞，具有分化成心肌细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞的潜能;（2）骨髓干细胞易从自体采集;（3）由移植的骨髓干细胞分化来的心肌细胞能与周围组织进行有效的电-机械偶合;（4）自体骨髓干细胞移植不存在免疫排斥反应。骨髓干细胞注射方法直接心外膜注射、心内膜注射、静脉注射和经冠状动脉导管注射四种形式，最后一种创伤小、有前途。德国的Strauer等首先将这种类型的细胞移植应用于临床。在急性心肌梗死后6天，将细胞注入冠状动脉内，观察10周后，发现心肌梗死范围从24.7%减少到15.7%，心脏射血分数（EF值）升高20%～30%，为骨髓单个核细胞移植掀开了新的一页。脐血干细胞脐血干细胞在自我更新、增殖分化和体外扩增等方面的潜能,明显优于骨髓干细胞,有可能成为未来细胞移植的重要供体。但胚胎干细胞的难获得性，排斥反应以及各种伦理学争论限制了该类细胞的运用。骨髓细胞移植使梗塞心肌再生(Nature410:702-4,2001)注射c-kitpos骨髓细胞的梗塞心肌心肌修复和间隙连接蛋白43骨髓细胞移植对心功能的影响TransplantedcellsinfarctedmyocardiumUnknownmolecularsignalProliferationanddifferentiationCytoplasmicproteinsNuclearproteinsFunctionalcompetence骨髓细胞移植使心肌再生的可能机制已进行多项小规模的临床试验：

采用自体骨髓干细胞,冠脉搭桥术时注入心肌,或经球囊导管注入冠脉,可使心梗范围缩小,心收缩力增强,侧支循环增多,心绞痛减少。

1.什么时间移植最好(心梗后?心衰时?)2.从何处取细胞?3.以什么方法送入心肌?4.移植多少细胞?5.副反应：心律失常、免疫排斥反应、致瘤性等。

尚待解决的问题细胞因子促进骨髓干细胞迁移及心肌再生细胞因子处理改善了心肌力学指标Growthfactor/cytokinesReferencesVEGFYeL:AnnThoracSurg.2007VCAM-1ZhangS:CircRes.2007HGFRoggiaC:ExpCellRes.2007G-CSFInceH:NatClinPractCardiovascMed.2007IL-1betaMitchellMD:AmJPhysiolHeartCircPhysiol.2007HMGB-1LimanaF:Circ.Res.2005

2003年，在实验鼠和人类心肌组织中先后发现了心脏自身干细胞。

英国医学刊物《柳叶刀》2011年11月14日在线发布的研究报告说，美国研究人员用心脏干细胞疗法治疗心肌梗塞的临床试验获得成效。培养从患者心脏提取的干细胞并用于治疗，可在一年内有效减少受损心脏中的疤痕组织。美国马里兰大学医学院研究人员第一次直接对新生儿和成人来源的心脏干细胞进行比较.他们发现新生儿心脏干细胞恢复心脏功能到将近正常水平的能力是成人心脏干细胞的3倍.再者,在心脏病模式动物中,经过新生儿心脏干细胞处理的心脏泵血能力要比那些成人心脏干细胞更强.相关研究于2012年9月11日发表Circulation期刊上.德国伯恩大学和美国康奈尔大学研究人员却发现，幼年实验鼠在被诱发生心肌梗死后，其体内心脏干细胞可以为心脏肌肉组织修复再生提供新细胞。该研究成果已经发布在《美国科学院院报》（PNAS）2012年网络版上。动脉粥样硬化是一种慢性

炎症及自身免疫性疾病热点之三：四个阶段

脂纹纤维斑块粥样斑块

继发病变出血、钙化、溃疡、血栓、动脉瘤稳定斑块不稳定斑块Pathogenisis1973：monoclonalhypothesis（Benditt）1841：thrombogenichypothesis(Rokitanski）

1863：lipidinfiltrationhypothesis(Virchow)1976：response-to-injuryhypothesis（Ross）1999：inflammationandinmmunehypothesis（Ross）

MonoclonalHypothesis(1)BendittEP.EvidenceforaMonoclonalOriginofHumanAtheroscleroticPlaques.ProcNatlAcadSciUSA1973;70:1753-6(2)BendittEP.TheOriginofAtherosclerosis.ScientificAmerican1977;236(2):74-85(3)SchwartzSM.MonoclonalityofSmoothMuscleCellinHumanAtherosclerosis.AmJPathology1997;151(3):697Response-to-InjuryHypothesis1.RossR.Atherosclerosisandthearterialmusclecell.Science1973;180:1332-39(IF=31.85,2004)2.RossR.ThePathogenesisofatherosclerosis.NEnglJMed.1976;295:369-77;420-25(IF=38.57,2004)3.RossR.Thepathogenesisofatherosclerosis—anupdate.NEnglJMed.1986;314:488-5004.RossR.Thepathogenesisofatherosclerosis,aperspectiveforthe1990s.Nature1993;362:801-9(IF=32.182,2004)5.RossR.Atherosclerosis-Aninflammationdisease.NEnglJMed1999;340(2):115-123最早由Virchow于1856年所提出，认为动脉粥样硬化病变是动脉内膜的炎症反应。

RossR使动脉粥样硬化的炎症学说很多内容得到更新和深化。InflammationandInmmuneHypothesis高胆固醇血症导致免疫细胞在血管壁的募集氧化的低密度脂蛋白（OX-LDL）在巨噬细胞中的处理、抗原提呈及T-细胞的活化动脉粥样硬化中的免疫细胞单核细胞荷脂分泌细胞因子（如MCP-1),导致T细胞激活，释放IFR,导致平滑肌细胞表型发生改变，斑块形成。7引起动脉粥样硬化中自身免疫及炎症反应的部分抗原InflammatorymarkersandatheroscleroticriskMarkers:Serumamyloid淀粉样蛋白Leukocytecount白细胞计数Fibrinogen纤维蛋白原C-reactiveproteinC-反应蛋白

Nitrotyrosine氮酪氨酸

Myeloperoxidase髓过氧化物酶SolubleICAM-1、TNF-α、IL-6、CD40L

CRP

CRP可预测心血管病事件，独立于年龄、吸烟、胆固醇、糖尿病。经15个人群40000人研究:为低危险性，为中度危险,为高度危险.进而研究其基因多态性。药物涂层支架防治冠状动脉

再狭窄治疗介入心脏学的里程碑1百万只/年美国如何解决支架内再狭窄（ISR）是当今冠心病介入治疗最令人关注的难题之一。针对再狭窄发生的机制、影响因素及防治措施,进行了较多研究,如术中操作规范化，药物涂层支架、血管内放射治疗、再狭窄的基因治疗以及口服药物预防等。

药物涂层支架已完成或正在进行的多个临床试验已展示了令人振奋的结果。

药物涂层支架即将抗血栓和抗增殖药物包被于冠脉支架上,植入冠脉后药物在局部以“洗脱”方式缓慢释放,既能增加局部药物浓度,又能减少全身副作用,从而降低再狭窄率。抗血栓作用的药物涂层支架

如携带肝素、磷酸胆碱、碳化物等。因现在的支架均为金属材料,金属所带负电荷暴露在血液中可促进凝血过程,此类物质在支架表面形成完整的包膜,能减少血栓形成,进而降低再狭窄率。1雷帕霉素（rapamycin)

具抑制免疫及抗细胞增生作用2紫杉醇（paclitaxel)

通过抑制细胞有丝分裂而抑制平滑肌细胞增殖和迁移3放线菌素D（actinomycinD)

再狭窄高，效果不好主要抗增殖作用研究的药物

药物涂层支架改善了冠状动脉介入治疗的预后，但也带来了许多新问题，涂层药物抑制平滑肌细胞增殖的同时，也抑制了正常内皮细胞的再生，导致支架植入后血管内皮化过程延迟，增加了迟发型血栓形成风险。Stentthrombosis

latethrombosis

Holmes,Nordmann两个大型临床病人荟萃分析发现

DES可引起迟发性支架血栓形成增加（0.15-0.2%/y）远期安全性和疗效有待进一步评估。热点之四：MicroRNAs与心血管疾病MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码蛋白质的、多物种高度保守表达并可调节基因表达的小RNA。MiRNAs一般约含20～24个寡核苷酸，在转录后水平下调基因表达。具有调控细胞增殖、分化和凋亡等生物学功能。最新研究预计有近千种miRNAs在人类基因组中表达，调节着大部分蛋白质编码基因及非蛋白质编码基因的表达。什么是microRNAs?1.MiRNAs(microRNAs)的发现1993年,Lee等发现lin-4，负性调节lin-14蛋白的表达；2000年,Reinhart等发现let-7，可降低lin-41蛋白的表达；此后不到一年的时间里，美国三个实验室同时从线虫、果蝇、哺乳动物的组织和细胞中克隆出大量的约含19-25个核苷酸长度的非编码RNA，并称之为microRNA。2.生物合成RNA聚合酶Ⅱ>1Kb65-75bp19-25bp核穿膜蛋白Exportin5RISC:RNA介导的沉默子复合体作用机制(1)如果miRNA与靶mRNA匹配完全，则该RISC复合体降解靶mRNA；(2)若两者序列部分匹配，尤其是miRNA的5'端2-8个被称为种子序列(seedsequence)的核苷酸与靶mRNA匹配完好，则通过抑制靶mRNA的翻译来沉默特定基因。4.MiRNA的生物学功能生物发育肿瘤细胞增殖与凋亡组织分化在心血管疾病中的作用5.1MicroRNA与先天性心脏病Dicer缺失可导致心肌收缩蛋白表达异常,肌小节明显错乱,并很快发展为心力衰竭。在心脏发育形成中，miR-1-1和miR-1-2基因在心室特异性表达，并在心室肌增殖中起负性调节作用。Hand2是胚胎心脏发育初级阶段所必需的一个基因，该基因突变或缺失可导致心脏发育不良甚至使心脏停留在早期发育状态。Hand2是miRNA-1的靶基因，miRNA-1可以适时阻止Hand2蛋白合成，调控心脏正常发育，5.2MicroRNA与心肌肥厚及心力衰竭应用并列microRNA微点阵方法分析186种不同microRNA在两种心肌肥厚鼠模型中的表达。

主动脉缩窄小鼠模型组(通过结扎胸主动脉造成心脏后负荷增加，建立肥厚心肌模型（thoracicaorticbanding，TAB)

27种microRNA表达明显增加，15种表达降低。显著表达激活钙磷酸酶A(activatedcalcineurinA，CnA)小鼠模型组(通过转基因技术使鼠心肌CnA过度表达，建立心肌肥厚模型)有33种microRNA高于对照组，有14种表达降低。TAB组和CnA组上调的microRNA中有21种相同，下调的microRNA中有7种相同。miR-1,miR-133a进一步研究发现他们是抑制心肌肥厚的重要因子。心肌肥厚模型中miR-1，miR-133a的表达水平均明显下降。Figure4.Cardiac-specificoverexpressionofmiR-195issuffi-cienttodrivecardiomyopathy.miR-195Figure5.RequirementofmiR-208forcardiomyocytehypertrophyandfibrosis.A,Schematicdiagramofaheartfollowingthoracicaorticbanding(TAB).B,Sectionsofheartsofapproximately3-month-oldwild-typeandmiR-208/miceareshownfollowingshamoperationorTABfor21days.miR-208miR-21研究发现采用反义寡核苷酸抑制原代心肌细胞中miR-21的表达，可抑制细胞肥大性生长。最新研究发现一种miR-21拮抗剂(antagomir-21)可有效地防止心肌纤维化、肥厚和心力衰竭。MiR-214在心肌肥大过程中也表达上调，但研究发现MiR-214转基因小鼠没有导致心脏异常的表型改变，这提示MiR-214在心肌肥大中的作用不显著。miR-2145.3microRNA与心律失常

使梗死区心肌内特异上调或下调miR-1的表达后发现，miR-1的过表达可加重心律失常的发生,而下调miR-1的表达则减轻心梗后心律失常的发生。

miR-1miR-133表达上调将导致心肌内向整流性钾通道功能异常，使3相复极延长而导致长QT综合征(LQTs)。应用反义寡核苷酸技术抑制miR-133，可以达到治疗LQTS的目的。miR-1335.4microRNA与心肌纤维化

miR-21及miR-29在纤维母细胞中表达丰富，而心肌细胞表达较少，因此推测在病理情况下纤维母细胞中miR-21表达上调可促进纤维母细胞增殖。miR-21和miR-29无论是体内还是体外实验均发现miR-29表达下调可诱导胶原表达，而使心肌纤维母细胞miR-29表达上调可减少胶原的产生。

TGF-刺激心肌纤维母细胞，诱导胶原产生增多的同时，也可导致miR-29表达下调。这些发现提示miR-29家族成员表达下调可促进胶原及细胞外基质基因的表达，进而促进心肌纤维化的发生。5.5microRNA与心肌细胞凋亡研究发现miR-1在H9C2细胞中过表达可促进细胞凋亡的发生，在此基础上用miR-133处理后，可使凋亡细胞逐渐减少，这发现提示miR-1与miR-133在细胞凋亡发生发展中具有相反的作用。HSP60和HSP70是miR-1的靶基因，而caspase-9是miR-133的靶基因。

miR-21是一个抗凋亡miRNAs。抗凋亡基因Bcl-2是miR-21的一个间接靶分子。miR-1miR-133与心血管疾病标记物miRNA具有组织细胞特异性。一些miRNA只有在某些组织/细胞中表达。例如在心肌中含量最丰富的有miR-1，let-7，miR-133，miR-126-3P，miR-30c，和miR–26a。

miRNA在疾病中的表达谱也可能是特异性的。某一病理过程或疾病表达某一特定群体的miRNA。这miRNA的表达谱可以帮助疾病的诊断及对其预后的判断。7.microRNA与心血管疾病的治疗对于那些由于microRNAs表达上调所导致的心血管疾病，减少microRNAs的表达将是一个很好的治疗措施。1.miRNA在心血管疾病中的作用机制；2.寻找心肌特异性的miRNAs及其相应的靶基因；3.寻找某一种或几种miRNA表达谱作为心血管疾病的诊断标志物；4.寻找器官和/或细胞特异性的没有严重副作用或毒性的miRNA调节器，以达到治疗心血管疾病的目的。尚待解决的问题心肌损伤与保护

MyocardialInjuryandProtection热点之五：MyocardialinjuryIschemiaincoronaryheartdisease

Ischemia-reperfusioninjuryMyocardialtoxicosis

Cardiacoverload

Nutritionalfactors(VitB1deficiency)Infection

ArrhythmiasNecrosisandapoptosisCardiacremodeling

HeartfailureIschemiaMechanismsofmyocardialinjury1.Acuteinjury(Example:Ischemia)

(1)ATP

deficiency(2)Calciumoverload-inducedhypercontraction(3)Rapidgenerationofreactiveoxygenspecies(4)Inflammation(5)Openingofthemitochondrialpermeabilitytransitionpore(mPTP)JohansenJV,etal.BasicResCardiol,100:295–310,20052.Chronicinjury(Cardiacremodeling)

ionic/electricalremodelingYasuiK.JPharmacolSci99,205–210,2005SchwartzRJ.Cell125,427-429,2006NRSF神经元限制性沉默因子(neuron-restrictivesilencerfactor,NRSF)MyocardialProtection细胞保护心肌保护：外源性保护内源性保护：缺血预适应热休克蛋白1、心肌保护概念的形成2、内源性心肌保护（Endogenousmyocardialprotection)内源性心肌保护概念的提出：

1986，Murry发现缺血预适应（ischemicpreconditioning）；

1988，Currie发现经热休克预处理后，大鼠心肌缺血-再灌注损伤减轻。1)Heatshockfactor(HSF1)andheatshockproteins(HSPs)KregelKC.JApplPhysiol92:2177–2186,2002;BenjaminIJ.CirRes,83;117-132;1998McMillanDR,XiaoX,JBiolChem.1998,273(13):7523-8

XiaoX.EMBOJ.1999,18(21):5943-52YanLJ,XiaoX,EMBOJ.2002,21(19):5164-72,HSP70iHSC70HS27HSF1genotypeHS(430C,1h)+/++/--/-18SCasp.3SmacGarridoC.BBRC,286,433–442.2001BeereHM,TICB.11(1):6-10,2001

C23cleavageHSP70HSP70JiangBM,FreeRadBioMed.39:658-667.2005LiuS,BBRC,2007(1)(inpress)

JiangBM,CellStressChaperon.10(3):252-262,2005αBCBaxP53αBC+AuthorsHSPs/HSF1PublishedFanGCHSP20Circulation.2005,12;111(14):1792-9.HollanderJM

HSP27Circulation.2004,7;110(23):3544-52.RadfordNB

HSP70

ProcNatlAcadSciUSA.1996,19;93(6):2339-42.

TrostSUiHSP70JClinInvest.1998,15;101(4):855-62.LauSSHSP70AmJPhysiolHeartCircPhysiol.2000,278(5):H1439-45.KimYKHSP70knockoutCirculation.2006,6;113(22):2589-97.YanLJ

HSF1knockoutEMBOJ.2002Oct1;21(19):5164-72.CardiacprotectionusingHSPs/HSF1Transgenicanimalsorknockoutmouse2).Ischemicpreconditioning(IPC)

指经过一次或多次短暂缺血及再灌注后，心肌对随后更长时间的缺血损伤及再灌注损伤产生耐受的现象。OverviewofProposedSignallingPathwaysinIschemicpreconditioning(IPC)(-)mPTP3)

remoteIPC

PrzyklenkK,BasicResCardiol98:149–157(2003)4)

Ischemicpost-conditioning

ZhaoZQ.AmJPhysiol;285:579–88.2003ZhaoZQ.CardiovascularResearch70:200–211,2006SunHY.AmJPhysiol288:H1900–1908.2005PreconditioningversusPost-conditioning5)PharmacologicPreconditioningAdenosine,Sevoflurane,IsofluraneRossA.JAmCollCardiol,2002，39(2)：338-340.WillemsL.CardiovascularResearch,2005,66:245–255心血管病的功能基因组学研究热点之六：

InApril2003,thesequencingofHumanGenomeProjectwascompleted.Introduction

FunctionalGenomicsStructuralgenomics基因芯片抑制消减杂交蛋白质组分析生物信息学转基因及基因敲除动物模型常用技术动脉硬化相关基因在人类染色体上的分布

(LopesN:ProgressCardiovascDis44(5):330,2002)心血管疾病基因表达谱的研究心血管疾病表达谱分析方法参考文献动脉硬化DNAarrayMcCaffreyYA:JCI,105,2000SAGEdeWalkV:Gene,226,1999DNAarrayShiffmanD:JBC,275,2000DNAarrayBuechlerC:Blood,97,2001再狭窄DNAarrayFengY:CircRes,85,1999SSHZibaraK:ArteriosThromVascBiol,19,1999DNAarrayZohlnhoferD:Circulation103,2001心肌梗塞SSHDepreC:PNAS,98,2001DNAarrayStantonLW:CircRes,86,2000DNAarrayJinH:Circulation103,2001DNAarraySehlPD:Circulation101,2000心力衰竭DNAarrayYangJ:Circulation102,2000心肌肥大DNAarrayFrriddleCJ:PNAS,97,2000

心肌内源性保护的功能基因组学研究Transientmyocardialischemia/reperfusionStunningPreconditioningGlobalAnalysisofGeneExpressioninRatHeartRespondingtoTransientschemia/reperfusionUsingcDNAMicroarrayandClusterAnalysis.UsingcDNAmicroarraytoanalyzethegeneexpressionprofileoftransientmyocardialischemia/reperfusion.10novelgeneswereclonedandloginedinGenBank,oneofthemisatanscriptionalfactor,andwasnamedMIPU1.TGTCTTATCGAAJiangL.BBRC,2007,acceptedIdentificationofIPC-mediateddifferentialproteinby2-DEandMSinratsIdentificationofIPC-mediateddifferentialproteinby2-DEandMSinrats.Table3.identificationofdifferentialproteinspotsbyMS核仁素（Nucleolin）与心肌保护

Nucleolinisamultifunctionalshuttleprotein.Majorfunctions:BindingandtransportingrRNAs;Regulatingtheassemblyofribosomes;Regulatingthegrowthandproliferationofcells;

Virusinfection;

Tumorformation.1.Nucleolinplayedimportantrolesinoxidativestressinducedcellularinjuries;2.Heatshockandheatshockprotein70couldinhibitthedownregulationofnucleolinexpression.Ourstudies:

Theseresultssuggestthatnucleolinmaybeanimportantinjury-protectingfactor.However,whethernucleolinhaseffectsonIPandwhattheeffectsare,remainunclear.Fig1.5.Theprotectiveeffectofmyocardialischemiapreconditioning(IP)againstthecleavageanddown-regulationofnucleolininducedbyischemia/reperfusioninjury.

Fig1.4.Theexpressionofnucleolininratmyocardialischemiapreconditioning(IP).A:Western-blotexperiments.B:RatioofdensityofnucleolinbandstoGAPDHbands(*P<0.01vsShamgroup,n=3).Fig2.9.Effectof100uMH2O2preconditioningonthelocationofnucleolinprotein.

Fig2.10.ImmunofluorescenceanalysisdemonstratingtheeffectofH2O2preconditioningonthelocationofnucleolinincardiomyocytes.

CtrlH2O2-PC12hFig3.10.Percentageofapoptoticcellsanalysisdemonstratingtheeffect