液相色谱仪漏液原因分析 液相色谱解决方案

第第页液相色谱仪漏液原因分析液相色谱解决方案聚四氟乙烯膜(一般用于有机相)几乎可以和所有的溶剂、酸和碱相容。尼龙66膜(一般用于有机相)可以和大多数溶剂、有机物和水相容，建议不要用于强酸、二氯甲烷和DMF。纤维素硝酸酯(一般用于水相)主要用于过滤器,可以和多数水性和非水性溶剂相溶,但不是所有的水性和非水性溶剂。再生纤维素膜一般用于HPLC生物样品和有机溶剂的制备和过滤,是通用型HPLC过滤器,具有广泛的溶剂相溶性,与蛋白质键合作用低,非常低的可萃取性.在样品溶液中有颗粒存在会造成故障时要用膜进行过滤。“漏”分两种：漏液和漏气。漏液：液相色谱仪从流动相瓶到废液瓶之间的流路是一个全封闭体系，内部压力很高，但外部却能保证一滴不漏。如果某个部件发生漏液，那就是故障所在。漏液的原因分两种：接触硬件不当：在更换零件如流路管或换柱时，换的接头接口不匹配，造成漏液。要注意不同公司的柱子接头很多是不同的，甚至同一家公司在不同时期生产的液相柱接头也有很大区别。当然选项用PEEK接头是一较好是一个较好的解决方法，不仅通用性好，而且靠手拧就能保证不漏液。即使是接口本身是匹配的，但是如果操作不当也会漏液，一种不当就是力度把握不好，拧得太紧或太松；另一种不当就是致命的错误：滑丝，这往往是动手能力不太强，螺丝钉很少拧的工犯的错误，滑丝的后果不仅是漏液那么简单，常造成重要部件的报废。解决这个问题只能靠恶补基本功来实验，那就是拧螺丝。使用仪器不当：只要互相有10%比例就不会出现这个问题。另一原因是在用缓冲液盐溶液(不论甲醇含量有多少)作流动相时，实验结束后没有换甲醇水冲洗，使得微渗的流动相干燥形成晶体造成。不过，输送泵漏液并不是非得马上修不可，冲洗干净并在以后的使用中多加小心一般都可以正常使用。检测器漏液是个很麻烦的事，一般都是吸收池的问题，更换的费用相当高。但是并不是说一定要马上更换，还可以从实际实验效果看能否凑合使用。漏气：漏液是从内部向外漏，而漏气则是外部了的气体进入液相色谱仪的流路内部形成气泡。下面按流路的方向逐个部件分析产生气泡的原因和相应解决方法。2.1过滤头：油液时，在流路管中有不规则但持续的小气泡产生，这时考虑的是流动相有没有脱气(需要特别提醒即使是有了真空脱气机也是要先超声脱气的，起码可以减少脱气机的工作压力并提高工作效率)，如果已经脱砂压力了气，则要注意过滤头的污染也会造成这种现象。处理方法比较简单，拧下过滤头在稀硝酸中浸泡，超声半小时，洗净后装回去即可。2.2透明流路管：指的是在过滤头和输送泵之间的那一段管路。这一个部分往往不是有点气泡，而经常是整个管中全是空气而操作人员却浑然不知，以致输送泵工作了半天才发现流动相瓶里的液体一点也没少。这也是我们常说的液相色谱仪至少一周要开机一次的原因(我们做液相一定要有“微渗”的概论)。如果长时间不用，这一段管路的液体会彻底干掉，而充满空气的管路和充满液体的管路不仔细看是分辨不出来的。这种情况对于输送泵很危险，因为泵从设计来说是输送液体而不是输送气体，内部的液体对于活塞来说起到了机油的作用，如果活塞杆还残存了一些缓冲盐，则极易拉伤，造成不可逆转的影响。对于这种情况，要突出“预防为主”如：液相色谱使用人员要相对固定和稳定，工作中合理搭配资源，每台机一周至少一次实验，如长期不用起码每周要冲流动相2小时。养成良好的工作习惯很重要。如果流路管中真漏气了怎么办？我的建议是用外力使管路中充满液体。具体如下：1、找到流路管进入输送泵的接头。2、拧下来。3、用一干净洗耳球的尖端对准管路的平整切口。4、吸液体，看液面从流动相瓶里上升，至离洗耳球5cm左右时停止该动作。5、快速把接头拧回输送泵上(这个过程可能会有少许流动相外泄，这是正常现象)。6、开机，打开排液阀门，启动输送泵。7、等排液管中流出的溶液没有气泡时，再关闭排液阀，仪器正常工作。2.3输送泵和柱子：这些部分进了气泡一般不怕，冲掉就行。2.4检测器：应该说整个流路中只要有一个气泡都会在检测器上得到强烈的信号反映，检测器内部的气泡一般都能被冲走，但也有很难冲掉的残留气泡的情况。如果检测器内有残留气泡，会有特别明显的表现形式，就是在走基线时会时不时间隔出现直上直下信号很大的信号峰。这时先看普通流量能否冲走，如果冲不走，那唯①的办法就是拆柱，把检测器直接连接到输送泵的出口，加大几部流量冲洗，则肯定能冲走气泡。责任编辑：瑞利祥合--分析仪器采购顾问版权所有(瑞利祥合)转载请注明出处关于液相色谱的定性分析

1、一般定性

用已知物和直接对照法定性，这是一种相对可靠的方法，主要可以分为以下四种：

1）保留时间和保留体积

2）相对保留值

3）已知物增加峰高法

4）双柱货双体系

实验表明，各类同系物在两根不同柱上的Vg值有如下关系：式中：VgI表示在柱I上的比保留体积；VGII表示在柱II上的比保留体积；A1与C1为常数。

从上式可以看出，同系物在两个性质不同的色谱柱上，比保留体积Vg的对数有线性关系，下图就是根据某些化合物和领苯二甲酸二异葵酯柱上的比保留体积的对数制作出的。

经过领苯二甲酸二异葵酯柱分离后，在lgvgII为1.8的位置上有一个未知峰，由图可看出有两种可能性，即酮与伯醇；此时，将样品在柱上I上进行分离，得到lgVgII为1.62的色谱峰，从而可确定该峰是酮而不是醇。

在液相色谱中，可用双体系定性，通过改变流动相和固定相，从而改善分离的选择性，通常改用与原色谱体系有较大差别的其他色谱体系来实现分离。

2、保留值分随份子结构或性质变化的规律

1）GC中的碳数规律：同系物间，在一定温度下，保留值变化遵循如下规律：2）GC中的沸点规律：同族具有相同碳原子数目的同分异构体间存在如下关系：3)LC中的保留值规则：对于份子中存在不同数目的重复官能团的化合物，有如下的经验公式：3、反向液谱的定性

在气谱中广泛使用的Kovats指数定性，在夜谱中，由于组分的保留行为不仅与固定相有关，还与流动相的种类及浓度有关，所以不能直接用同系物间，在一定温度下，保留值变化遵循如下规律指数定性。

4、计算机检索

计算机不