醚菊酯液相色谱分析 液相色谱如何做好保养

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仪器与试剂

高效液相仪：具备紫外检测器；

色谱柱：ODS

15*4.6ID；

乙腈：色谱纯；

甲醇：色谱纯；水

：二次蒸馏水；nbs

一.

仪器与试剂高效液相仪：具备紫外检测器；色谱柱：ODS

15*4.6ID；乙腈：色谱纯；甲醇：色谱纯；水

：二次蒸馏水；流动相的黏度要小，以保证合适的柱降压；流动相的沸点要低，以利于制备分别时样品的回收；流动相的PH值一般应在2～7.5；使用期限不得超过2天，否则产生细菌污染管路。

（2）流动相的过滤

流动相在使用前都必需经过滤，以除去杂质微粒。同时要定期清洗吸滤头，以防杂质通过其进入流动相。应依据其是否是水溶性选择水膜或有机膜（0.45μm或0.22μm），使用溶剂过滤装置，通过真空泵抽气过滤。

（3）流动相的脱气

流动相必需预先脱气，否则易产生气泡，影响泵的工作。此外，溶解在流动相中的氧能与某些有机溶剂形成有紫外吸取的络合物，提高背景吸取，会在梯度洗脱时造成基线漂移或形成鬼峰。

常有的脱气方法有在线真空脱气法、超声波脱气法、抽真空脱气法三种。

3.色谱柱的维护及使用注意事项

全部分析样品zui好把pH值调整到适合色谱柱的pH值范围内。进样要避开超负荷，这是保持色谱柱性能长期良好的紧要方法之一、

手动进样器进样的话，进样时动作要快速精准。分析物成分多而杂时，要在色谱柱前加色谱保护柱以保护色谱柱。

每次分析工作开始时，要对色谱柱进行平衡，用含10%流动相中的有机溶剂的水溶液进行排气和冲洗色谱柱和管路，冲洗30分钟左右，将色谱柱中的纯有机溶剂替换掉，然后再用至少10倍柱体积的流动相平衡色谱柱，直至基线平衡后方可进样。

每次分析工作结束后，确定要立刻用确定量的水溶液彻底冲洗色谱柱中的缓冲盐液，再用对被测物洗脱本领强的溶剂来冲洗色谱柱，冲洗时间不能小于1小时，洗脱溶剂的用量至少为柱体积的20倍。

若不适时冲洗色谱柱，杂质长时间积累在其中，易堵塞色谱柱，降低柱效性能。

长期这样，会加速削减色谱柱使用寿命。色谱柱4天以上不使用，应从仪器上取下，用封头螺帽把两头紧紧密封。色谱柱保存时注意不要猛烈震动、碰撞。

4.高压输液泵的维护及使用注意事项

每次分析工作结束后，都应适时清洗泵。当有缓冲盐做流动相时，缓冲盐与有机溶剂相互交换前确定要用5%的甲醇水溶液清洗泵，防止盐在有机相中结晶损坏泵中各组件。

缓冲盐溶液的浓度不要过高，要掌控在5%以下，否则高浓度的缓冲盐会磨损密封垫和活塞，降低其使用寿命。长时间使用高浓度的缓冲盐，必需用10%的异丙醇色谱级溶液清洗泵，从而保护柱塞和密封垫。

输液泵工作前要设置工作压力范围，正常工作压力一般不要超过30Mpa，否则常常高压会使密封环变形，产生漏液。平常分析工作要养成记录压力的好习惯，这样假如工作压力超过平常正常压力的10%～15%，就应适时查找原因。

5.紫外检测器的维护及使用注意事项

紫外检测器有确定的使用寿命，所以平常应尽量削减氘灯的使用时间，在柱平衡进行一大半之后，在走基线之前，打开检测器光源；分析结束后即可关闭检测器光源。

要保持检测器四周环境清洁，试验室尽量少开窗户，定期地面进行吸尘工作，防止检测器工作时由于静电吸附灰尘颗粒覆盖在光学元件上。

检测器池内存在气泡就会产生噪音，噪音会干扰定量分析，所以流动相须充分脱气后再使用。

应定期清洗流通池。如察看到流通池内部无