非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座

肿瘤个体化用药基因检测临床应用江苏省肿瘤分子诊疗工程技术研究中心江苏省恶性肿瘤多学科联合诊治技术服务中心——非小细胞肺癌非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第1页人类基因组计划和国际癌症基因组计划——个体化医疗奠基石于1990年在美国正式开启人类基因组计划,要把人体内约10万个基因密码全部解开,同时绘制出人类基因谱图。年多国联合开启国际癌症基因组计划,是人类基因组计划后又一重大科学研究。揭示更多地与癌症相关突变类型,取得50种肿瘤特定分子异常谱型,探寻DNA变异与肿瘤发生发展机理。非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第2页肿瘤治疗存在关键问题盲目治疗过分治疗个体化治疗非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第3页肺癌传统分类观点小细胞肺癌(SCLC)非小细胞肺癌(NSCLC)

腺癌 鳞癌 大细胞癌腺癌鳞癌大细胞小细胞非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第4页肺腺癌分子亚型KRASEGFRHER2BRAFALKfusionPIK3CAMEK1ROSfusionPDGFRamp肺腺癌分子分类腺癌鳞癌大细胞小细胞肺癌传统分类非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第5页EGFR基因突变检测在临床应用意义IPASS:依据突变状态疗效分析048121620Timefromrandomisation(months)0.00.20.40.60.81.0GefitinibEGFRM+(n=132)

GefitinibEGFRM-(n=91)

Carboplatin/paclitaxelEGFRM+(n=129)Carboplatin/paclitaxelEGFRM-(n=85)GefitinibEGFRM+(n=132)

GefitinibEGFRM-(n=91)

Carboplatin/paclitaxelEGFRM+(n=129)Carboplatin/paclitaxelEGFRM-(n=85)无进展生存率对象有效率不加选择中国患者30％依据临床特征选择优势人群50％依据EGFR敏感基因选择+耐药基因选择70-80%80-95%Mok,Wu,Thomprastetal.NEJM,0.4非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第6页检测EGFR突变主要性医学指南全球三大肿瘤突变会指南均强调检测EGFR突变主要性非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第7页EGFR突变检测应用很好预测TKI药品对NSCLC患者疗效非小细胞肺癌外显子19缺失；外显子21点突变；外显子18点突变；肿瘤对TKI敏感，患者使用TKI治疗外显子20未发生突变，继续使用TKI治疗外显子20突变，提示TKI治疗产生耐药，转为非TKI治疗没有发现外显子18、19、21突变肿瘤对TKI不敏感，患者使用非TKI治疗HRM血浆突变检测非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第8页EML4-ALK融合基因ALK最早是在间变性大细胞淋巴瘤（ALCL)一个亚型中被发觉，所以定名为间变性淋巴瘤激酶（anaplasticlymphomakinase，ALK）。靶向药:XALKORI®胶囊（克唑替尼），辉瑞企业。NCCN与ESMO推荐ALK阳性NSCLC一线治疗首选克唑替尼。总体突变率:11.4%腺癌突变率:16.1%鳞癌突变率:0.7%优势人群:轻微/从未吸烟；与EGFR突变人群相比，ALK融合人群年纪更轻；腺癌；EGFR/KRAS野生型；病理学特（含印戒细胞黏液型或实性腺癌中，ALK融合基因发生率高于其它类型肺腺癌(46．2％VS.8.0％）非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第9页EML4-ALK融合检测意义无进展生存期概率(%)100806040200 0 5 10 15 20 25时间(月)

克唑替尼(n=173)化疗(n=174)事件,n(%)100(58)127(73)中位数,个月7.73.0HR(95%CI)0.49(0.37-0.64)P<0.0001Shawetal.,ESMO;AbstractLBA1_PRNEnglJMed;368:2385-94非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第10页NCCN指南推荐非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第11页靶向药品检测项目汇总药品基因癌种样本判断标准主要程度吉非替尼/厄洛替尼/埃克替尼EGFR非小细胞肺癌组织标本、血浆、体液标本突变敏感必检KRAS突变耐药推荐克唑替尼EML4-ALK组织标本融合敏感必检ROS1组织标本融合敏感推荐非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第12页铂类药品与ERCC1mRNA表示LordRVNetal,ClinCancerRes,,8:2286-91背景ERCC1（ExcisionRepairCrossComplementGroup1）是核酸外切修复家族中主要组员,参加DNA链切割和损伤识别。ERCC1表示量直接影响DNA修复生理过程,DNA修复是铂类化疗耐药性产生主要机制之一。非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第13页吉西他滨与RRM1mRNA表示背景吉西他滨是脱氧胞嘧啶核苷同系物,属细胞周期特异性抗代谢类化疗药,主要作用于DNA合成期（S期）肿瘤细胞,同时也阻断细胞增殖由G1向S期过渡进程。临床研究显示低RRM1mRNA水平肺癌患者对吉西他滨敏感性相对较高,药品疗效很好,中位生存期延长。而且,教授提议RRM1高表示患者应防止使用吉西他滨。RafaelRosell1.Oncogene()22,3548–3553非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第14页抗微管类药品与TUBB3mRNA表示背景抗微管类化疗药是作用于细胞微管,经过影响纺锤体形成,从而抑制细胞有丝分裂一类广谱化疗药。在各种临床研究中,TUBB3mRNA表示水平与抗微管类化疗疗效亲密相关。低TUBB3表示水平肿瘤患者接收紫杉醇类或长春碱类化疗效果很好,中位生存期较长。反之,TUBB3高表示患者抗微管类化疗疗效较差。RafaelRosell1.Oncogene()22,3548–3553非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第15页氟类药品与TYMSmRNA表示背景TYMS基因编码胸苷酸合成酶（TS）是嘧啶核苷酸合成限速酶,是肿瘤生长主要因子。5-FU代谢物5-FdUMP与TS结合,妨碍TS正常功效,从而抑制DNA合成。临床研究表明,低TYMSmRNA水平肿瘤患者接收氟类化疗效果很好,中位生存期较长。反之,TYMS高表示患者对氟类疗效较差。研究也发觉培美曲赛疗效与TYMSmRNA表示水平呈负相关。ByYoshinoriShirota,JournalofClinicalOncology,,19:4298-4304非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第16页化疗药品检测项目（mRNA表示）类型药品基因样本评价mRNA表示卡铂、顺铂奥沙利铂ERCC1石蜡切片新鲜组织低表示敏感抗微管药品TUBB3低表示敏感吉西他滨RRM1低表示敏感氟尿嘧啶培美曲赛TYMS低表示敏感非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第17页样本要求石蜡包埋肿瘤组织块普通组织块大于5×5×5（mm），组织包于蜡块正中央，处理完可偿还蜡块（推荐）。送检保留:常温保留、运输。新鲜肿瘤组织块要求提供50mg左右样本，取癌组织中心位置组织块，5×5mm（绿豆大）以上，以PBS或生理盐水清洗洁净，15分钟内放入RNAlater保留液或液氮中保留。送检保留:常温保留、运输，取样后24小时内送检。全血标本使用枸橼酸钠（1:9）或EDTA-Na2抗凝采血管，血液样本2ml以上。禁忌:切勿使用肝素抗凝剂；切勿重复冻融。送检保留:4℃冰箱保留，切不可置于-20℃中（血细胞在融解时候易发生溶血）；当日送检，冰上运输。非小细胞肺癌基因检测专业知识讲座第18页案例分析姓名:王女士年纪:46诊疗:非小细胞肺癌样品种类:穿刺组织检测项目:EGFR突变检测；EML4-ALK基因融合检测；ERCC1表示量；TYMS表示量；RRM1表示量；TUBB3表示量检测项目检测结果临床意义EGFR突变1