分子生物学实验智慧树知到期末考试答案章节答案2024年山东理工大学

分子生物学实验智慧树知到期末考试答案+章节答案2024年山东理工大学DNA的变性：（）

答案:包括双螺旋的解旋引物长度的增加可以提高扩增特异性

答案:对外源基因只能插到融合蛋白的氨基端进行融合表达

答案:错离子交换分离纯化蛋白是利用了蛋白的（）性质

答案:带电荷不同PCR技术获得了诺贝尔生物学奖

答案:错我们可以设计扩增任意DNA片段的引物

答案:错转化过程中，为确保外源DNA进入细胞，我们需要对细胞进行热激，其热激温度是（）℃

答案:42Westernblot实验时，湿转法不可以一次转两块PAGE胶。

答案:错为了方便后续酶切连接，引物要设计上酶切位点

答案:对Westernblot实验时，NC膜用之前一定要先活化。

答案:错插入到pBV-dps-2x-6his融合表达的外源目的基因5’-端的内切酶应当是

答案:XhoI关于TRIzol法提取细胞总RNA，下列说法正确的是？

答案:氯仿的作用是裂解细胞;氯仿有毒性和腐蚀作用，操作时注意;整个操作过程中，要防止RNase污染;加入TRIzol的量应与细胞的量对应制备感受态细胞的过程中，离心后倒置离心管的作用是（）

答案:清除残留液体SDS分析或鉴定蛋白时分离胶的浓度不可能是

答案:4%关于AMV和MMLV，下列说法正确的是？

答案:AMV比MMLV的RNaseH活性高;AMV比MMLV保温温度高Westernblot实验时，半干法不需要转膜缓冲液。

答案:错下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：

答案:具有自我复制功能采用何种方式进行基因工程蛋白诱导表达与表达的基因有关

答案:错配制400mlLB培养基，为了使培养基中抗生素（Amp）浓度达到50ug/ml，下列说法正确的是

答案:应在培养基灭菌后加入浓度为50mg/ml的Amp储备液400ul诱导大肠杆菌感受态时，下列操作不正确的是

答案:用冷的CaCl2诱导过夜培养的大肠杆菌在配置PAGE凝胶时，不存在的物质是

答案:甘氨酸促进丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺形成聚丙烯酰胺是

答案:TEMED;APWesternblot实验时，关于洗涤，下列说法正确的是？

答案:洗涤的目的是洗去未结合的抗体;每步洗涤，一般洗涤数次;可以用TBST进行洗涤Westernblot实验时，半干法可以一次转两块PAGE胶。

答案:对下列仪器的用途，说法不正确的是

答案:恒温干燥箱用于细菌的固体培养和细胞培养提取质粒时，加入变性溶液后，下列哪些操作容易导致变性过度

答案:旋涡振荡均匀PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是（）

答案:PCR反应过程中必须不断地加入模板和引物扩增产物的大小是引物结合的位置绝对的

答案:对PCR过程中的DNA变性是由于

答案:高温提取RNA时，异丙醇的作用是？

答案:沉淀RNART-PCR的引物有哪些？

答案:随机引物;基因特异性引物;OligodT所获得的RNA其A260/A280的比值通常为?

答案:大于1.8;小于2.0pBV220插入片段必须要有

答案:外源基因;终止密码;酶切位点;起始密码要配置.酚：氯仿：异戊醇（Ｖ:Ｖ:Ｖ=25:24:1）200ul，则在100ul氯仿-异戊醇（24:1）溶液中应加入饱和酚的体积是

答案:100uldPCR能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。

答案:对pBV220表达载体是原核表达系统只能表达原核基因

答案:错质粒和目的基因的酶切过程中，所需的水浴温度是（）℃，所需时间是（）h

答案:374提质粒时，溶液I中含EDTA的作用是

答案:螯合金属离子，使DNA酶失活琼脂糖凝胶电泳时电压越大越好

答案:错提取质粒时，溶液III的主要成分是

答案:醋酸钾-醋酸插入表达载体的目的基因不能含有多克隆位点上所用内切酶切点的序列

答案:错本实验中，诱导表达外源蛋白的诱导温度是

答案:42℃下列关于大肠杆菌DH5α说法错误的是

答案:是野生型大肠杆菌关于微量移液器的使用，下列操作不正确的是

答案:移液器不用时调至最小刻度就分于结构而论，质粒是（）

答案:环状双链DNA分子凝胶成像系统观察核酸电泳的光源

答案:紫外灯光关于Dps蛋白，下列说法错误的是

答案:是真核生物蛋白若要移取1ul酶，最大量程分别如下的移液器应选哪个

答案:1uldps基因末端添加的6his作用是

答案:用于蛋白亲和层析纯化关于pBV220载体，下列说法不正确的是

答案:是克隆载体构建pBV-dps-2x-6his进行了几轮PCR扩增？

答案:三轮外源目的基因应插入到表达载体的（）：

答案:MCS进行融合蛋白的表达一般不会影响目的蛋白的生物学活性。

答案:错如果要获得单独的目的蛋白，应在目的蛋白和融合蛋白之间设计蛋白酶酶切位点。

答案:对与pBV-dps-2x-6his进行重组，构建融合表达载体时，外源目的基因上下游必须设计上XhoI和XbaI酶切位点。

答案:对影响RT-PCR

结果的因素有哪些?

答案:mRNA的质量;引物的质量;反转录酶的质量关于利用Phusion酶进行PCR反应，下列说法正确的是？

答案:退火温度与引物有关;延伸时间与DNA聚合酶有关;所用缓冲液与GC含量有关;变性时间与模板有关反转录反应的模板可以是总RNA，也可以是mRNA

答案:对qPCR能够实时测定特异性产物的量，并推断目的基因的初始量，并且不需要取出PCR产物进行分离，就能得到数据。

答案:对关于Phusion高保真酶，下列说法正确的是

答案:与普通的Taq酶相比，能大大降低出错的可能性;具有5'-3'和3'-5'核酸外切酶的活性;其产物是平末端TRIzol含有哪些成分？

答案:8-羟基喹啉;异硫氰酸胍;β-巯基乙醇;苯酚用NanoDrop测样品时，仅需0.5-2

µL

样品。

答案:对提取RNA时，75%乙醇的作用是？

答案:洗涤RNA中的盐离子通常来说，含有ploy（A）尾巴的是？

答案:真核生物mRNA提取总RNA的方法有哪些？

答案:胍盐法;苯酚法;氯化锂沉淀法检验DNA分子是否降解采用的是SDS电泳

答案:错对Dps蛋白功能描述不正确的表述是：

答案:活性Dps内形成Fe3O4沉淀Fenton反应能产生超氧自由基

答案:错DNA分子在Fenton试剂作用下被降解

答案:对细菌更容易吸收的铁元素形式是：

答案:Fe2+6个组氨酸标签（6His）连接在DPS蛋白的（）

答案:中间位置用工程菌进行诱导表达蛋白时

答案:接种培养到对数期浓度时诱导凝胶过滤依据分子量大小分离蛋白，小分子量的先洗脱出来，大分子量后洗脱出来。

答案:错包涵体是指没有正确折叠的目的蛋白。

答案:错纯化蛋白时可以通过煮沸破碎菌体细胞壁

答案:错HRP标记的二抗的显色试剂是NBT/BCIP

答案:错Western

blot时，半干转膜法电压不能超过25V

答案:对半干转膜仪正极在上，负极在下。

答案:错关于湿法转膜法操作，下列说法正确的是？

答案:阳极一侧放PVDF膜;阴极一侧放凝胶进行免疫学检测时，关于二抗，下列说法正确的是？

答案:在一段时间内二抗可以重复利用;二抗需要进行适度稀释;二抗可以与Anti-His结合表达载体与克隆载体不同，pBV220载体中不属于基因表达元件的是

答案:ori分离胶倒入胶板后要立即加一层双蒸水，下列说法错误的是

答案:加浓缩胶时不必将水层倒出大肠杆菌原核表达载体一般不具备的特点是

答案:可以进行蛋白糖基化等翻译后加工若电泳过程中溴酚蓝指示剂不向负极移动，不可能的原因有

答案:凝胶中有小气泡分离胶缓冲液的pH是

答案:8.8进行菌落PCR时，能扩增出与目的序列大小相当的特异片段的转化子为（）

答案:假阳性重组子不必提取质粒DNA进行酶切鉴定，而是直接以菌体热解后的DNA为模板进行PCR扩增的鉴定阳性克隆的方法是（）

答案:菌落pcr法下列外源DNA导入宿主细胞的方法中，不是依据转化方式原理而进行的方法是(

)。

答案:外源DNA被包装成λ噬菌体颗粒+宿主细胞最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是

答案:抗药性筛选大肠埃希菌转化实验中，出现假阳性克隆的原因可能有(

)。

答案:琼脂平板上的抗生素失活或含量过低;载体DNA与插入片段的分子比率过高;载体自身环化效率过高进行构建重组质粒时选择的内切酶，其酶切位点序列不能与目的基因中的序列一致。

答案:对目的基因上下游是否需要设计起始密码子和终止密码子需要根据表达载体的不同而确定。

答案:对DPS表达蛋白C-端连上6个组氨酸（6His）的作用

答案:方便目的蛋白的纯化pBV220表达载体用于抗性筛选的基因是

答案:AmpDNA标准分子量DL2000共有六条条带，其中分子量大小排在第三大的是500bp条带。

答案:错将目的基因导入微生物细胞的最常用方法是（）

答案:感受态细胞法在制备大肠杆菌感受态细胞时应取用(

)的大肠杆菌。

答案:对数期细菌处于容易吸收（）的状态叫感受态。

答案:外源DNA制备感受态细胞时，要用低渗CaCl2溶液在（）℃时处理快速生长的对数期细菌

答案:0对感受态细胞进行热激处理时，所使用的温度是()℃

答案:42在蓝白斑筛选实验中，转化了重组质粒的细菌长出的菌落为（）

答案:白色设计适用于蓝白斑筛选的基因工程菌为（）菌株。

答案:β-半乳糖苷酶缺陷型对感受态细胞进行热激处理时，所使用的温度是（）℃

答案:42在蓝白斑筛选实验中，转化了空载体的细菌长出的菌落为（）

答案:蓝色异丙基硫代半乳糖苷作为一种很强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，它可诱导LacZ的表达。它的缩写是（）

答案:IPTG关于DNA

Marker的使用，下列说法正确的是

答案:DNA

Marker可以指示样品DNA的大小标准分子量DNA（DNA

Marker）的主要作用是

答案:对照样品DNA制胶板和梳子的使用，说法正确的是

答案:根据样品的体积来选择;根据样品的数量来确定关于琼脂糖凝胶电泳下面正确的说法是

答案:可以检测DNA和RNA配置琼脂糖凝胶时，下面正确的做法是

答案:检测不同长度DNA需要配置不同浓度的琼脂糖凝PCR的反应体系要具有以下条件：

答案:dNTP;作为模板的目的DNA序列;具有热稳定性的DNA聚合酶;被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的DNA引物在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的增多

答案:Taq

DNA聚合酶加量过多和引物加量过多使用Taq

DNA聚合酶应注意

答案:-20℃现用现取;使用时应使用冰盒决定扩增产物片段长度的主要因素是

答案:引物在模板DNA是结合的位PCR产物短期存放可在什么温度下保存

答案:4℃抽提质粒时，加入溶液II可使溶液pH达到

答案:12.0～12.5质粒提取过程中，加入下列哪种试剂使DNA变性

答案:溶液IIDNA变性时被破坏的是

答案:氢键碱法抽提质粒DNA的原理中，下列说法正确的是

答案:抽提过程中基因组DNA和质粒DNA均变性微量移液器移液时，下列说法正确的是

答案:放出溶液时先将排放按钮按至第一停点，略停后，再按至第二停点下列不是LB培养基成分的是

答案:牛肉膏打开高压蒸汽灭菌器取出灭菌物品的时间是

答案:锅内压力降到0时制作固体培养基时，琼脂