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文档简介

第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体基础巩固1.下列关于动物细胞融合的说法,错误的是()A.动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B.动物细胞融合须要用纤维素酶处理C.动物细胞融合时须要人工诱导D.常用的诱导动物细胞融合的因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等答案:B解析:动物细胞无细胞壁,所以诱导融合前不须要用纤维素酶处理。2.下列关于小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的说法,错误的是()A.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞B.参加融合的B淋巴细胞实际是能产生抗体的浆细胞C.通过动物细胞融合技术获得了能产生单克隆抗体的生物新品种D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能答案:C解析:通过动物细胞融合技术形成的是杂交细胞,没有形成生物新品种。3.下图为动物细胞融合技术过程图,下列相关叙述错误的是()A.图中甲为灭活的病毒,此外还可用物理或化学方法诱导融合B.图中①过程发生了细胞膜的融合,体现了细胞膜的选择透过性C.图中②过程表示通过有丝分裂过程产生杂种细胞D.动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体答案:B解析:①过程发生了细胞膜的融合,体现了细胞膜的流淌性。4.利用细胞工程的方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是()A.将核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B.利用该单克隆抗体与抗原特异性结合的方法可诊断出该病毒感染者C.制备出单克隆抗体的过程中须要一次筛选D.体外培育单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体答案:B解析:将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体不是单克隆抗体。利用该单克隆抗体与抗原特异性结合的方法可诊断出病毒感染者。制备出单克隆抗体的过程中须要两次筛选。单个B淋巴细胞有产生抗体的实力,但没有无限增殖的实力,因此,在体外培育的状况下是不行能得到大量的单克隆抗体的。5.胃癌是我国发病率较高的一种恶性疾病,制备抑制癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体的制备过程如下图所示。下列说法正确的是()A.诱导骨髓瘤细胞与甲融合,可用的诱导因素只有灭活的病毒B.乙中的全部细胞经培育后,均可获得大量的抗胃癌单克隆抗体C.丙以前的筛选目的是淘汰未融合的细胞D.培育杂交瘤细胞的培育液中需加入动物血清答案:D解析:诱导骨髓瘤细胞与甲(B淋巴细胞)融合,可用的诱导因素除了灭活的病毒,还有聚乙二醇等。在乙、丙及骨髓瘤细胞中,只有专一抗体检验呈阳性的杂交瘤细胞经培育后,才可获得大量的抗胃癌单克隆抗体。整个过程有两次筛选,第一次是筛选出杂交瘤细胞,淘汰未融合的细胞及同核融合的细胞。单克隆抗体的制备过程利用了动物细胞培育技术,动物细胞培育的培育液中需加入动物血清。6.下列有关制备单克隆抗体的叙述,正确的有()①常从小鼠的肝中获得相应的B淋巴细胞②需经过细胞融合和细胞培育过程后,在体外培育液或小鼠腹水中提取单克隆抗体③单克隆抗体特异性强、灵敏度高,既可单独作药物,也可作诊断试剂和药物载体④单克隆抗体的制备运用了细胞生物学、免疫学的原理或方法A.1项 B.2项C.3项 D.4项答案:C解析:从免疫的小鼠脾中获得B淋巴细胞,①错误。7.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培育基筛选出杂交瘤细胞。在这种培育基上不能存活、增殖的细胞是()①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A.①②③④ B.①③⑤C.②④ D.①③答案:A8.下图表示细胞的融合过程,下列叙述错误的是()A.产生有性杂交后代时,细胞a和细胞b是经减数分裂产生的B.培育体细胞杂交植株时须要利用植株组织培育技术C.生产单克隆抗体时融合的细胞为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞D.上述三个过程都能体现细胞膜的流淌性且都须要人工诱导细胞融合答案:D解析:产生有性杂交后代时,细胞a和细胞b是经减数分裂产生的生殖细胞。杂种细胞须要通过组织培育技术培育为杂种植株。生产单克隆抗体时融合的细胞为B淋巴细胞(浆细胞)和骨髓瘤细胞。精卵结合不须要人工诱导。9.下列有关培育B淋巴细胞、小鼠骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞的叙述,错误的是()A.培育小鼠骨髓瘤细胞一般不会出现接触抑制现象B.单纯的B淋巴细胞在培育液中不能长期生存C.由于杂交瘤细胞同时具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性,因此培育液中不需添加动物血清D.若只考虑细胞的两两融合,杂交瘤细胞内含4个染色体组答案:C解析:小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,不具有接触抑制现象。B淋巴细胞属于高度分化的细胞,不能进行分裂,体外培育条件下,不能长期生存。杂交瘤细胞同时具有两种细胞的特性,既能产生抗体,又能无限增殖,但是它须要的养分物质人们并没有完全弄清晰,因此培育液中还需添加自然成分——动物血清。只考虑细胞的两两融合,杂交瘤细胞的染色体数是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞中染色体数之和,因而杂交瘤细胞内含4个染色体组。10.双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术(免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题。(1)过程①的目的是,制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的动物细胞工程技术有和。(2)过程②诱导融合常用的化学方法是。经过过程③④得到的单克隆杂交瘤细胞应具备的特征是。

(3)获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培育或,均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。

(4)与干脆运用长春碱相比,将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药,对人体的副作用更小,缘由是

。答案:(1)使小鼠产生能分泌针对癌胚抗原的抗体的B淋巴细胞动物细胞融合动物细胞培育(2)聚乙二醇(PEG)诱导法既能快速大量繁殖,又能产生专一的抗体(3)注射到小鼠腹腔内增殖(4)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物(长春碱)定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞。这样既不损伤正常细胞,又削减了用药剂量解析:(1)过程①表示给小鼠注射抗原,目的是刺激小鼠产生能分泌针对癌胚抗原的抗体的B淋巴细胞;依据单克隆抗体制备流程可知,该过程涉及的技术有动物细胞融合技术、动物细胞培育技术。(2)过程②诱导融合常用的方法是聚乙二醇融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等;经过过程③④得到的单克隆杂交瘤细胞的特征是既能快速大量繁殖,又能产生专一的抗体。(3)获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培育或注射到小鼠腹腔内增殖,均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。(4)干脆运用长春碱不仅会杀死癌细胞,还会杀死正常细胞;而双特异性单克隆抗体能将抗癌药物(长春碱)定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞。这样既不损伤正常细胞,又削减了用药剂量。11.阅读下列《抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)说明书》部分内容,请据此回答下列问题。抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体说明书)[组成与性状]本品系用产生抗A、抗B抗体的杂交瘤细胞培育的上清液配制而成,专供鉴定人ABO血型用。[运用方法]将本品与受检红细胞盐水混合,依据有无凝集判定结果。抗A试剂能和A型血、AB型血凝集,抗B试剂能和B型血、AB型血凝集……(略)[留意事项](略)[保存及年限]有效期一年,保存于2~8℃。(1)该定型试剂(单克隆抗体)是通过细胞工程的技术制备的。

(2)制备过程中,首先要提取人的的红细胞注射到试验动物体内,须要多次注射的目的是。

(3)一段时间后,用从试验动物体内提取的特定的B淋巴细胞,诱导其与骨髓瘤细胞融合,通常采纳的生物诱导剂是,之后还须要通过至少两次筛选和培育,才能获得用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞,可采纳(方法)鉴定是否产生了所需抗体。

(4)杂交瘤细胞常用的培育方法是在培育液中培育和;在体外培育时加入血清的目的是;定期更换培育液的目的是。

(5)假如某人的血液与抗A血型定型试剂和抗B血型定型试剂都不发生凝集反应,则此人的血型是型。

(6)该试剂的保存温度条件苛刻,主要是避开

答案:(1)动物细胞融合(2)A型血的红细胞或者B型血产生更多的具有相应免疫实力的B淋巴细胞(能产生抗A或抗B抗体的B淋巴细胞)(3)灭活的病毒抗原—抗体特异性结合(4)注射到小鼠腹腔中进行体内培育保证细胞顺当生长和增殖防止细胞代谢物积累对细胞自身造成损害(5)O(6)因温度过高导致蛋白质分子变性失活解析:(1)抗A和抗B血型定型试剂是单克隆抗体,制备单克隆抗体是动物细胞融合技术的应用之一。(2)在制备过程中须要将抗原(A型血的红细胞或者B型血的红细胞)首先注入生物体内,使其产生具有相应免疫实力的B淋巴细胞(能产生抗A或抗B抗体的B淋巴细胞),须要多次注射的目的是产生更多的具有相应免疫实力的B淋巴细胞(能产生抗A或抗B抗体的B淋巴细胞)。(3)可以用灭活病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞。鉴定是否产生了所需抗体,可采纳抗原—抗体分子特异性结合的方法。(4)杂交瘤细胞常用的培育方法是在体外用培育液培育或注射到小鼠腹腔中进行体内培育。培育动物细胞时通常要加入血清,缘由是血清中含有动物细胞生长所须要的未知因子,可以保证细胞顺当生长和增殖。在培育过程中,应定期更换培育液,其目的是防止细胞代谢物积累对细胞自身造成损害。(5)由题干信息可知,抗A试剂能和A型血、AB型血凝集;抗B试剂能和B型血、AB型血凝集,某人的血液与抗A血型定型试剂和抗B血型定型试剂都不发生凝集反应,由此推断此人的血型是O型。(6)该试剂的化学本质是蛋白质,高温可以破坏蛋白质的空间结构,从而使该试剂失去药效,因此保存温度条件苛刻。实力提升1.下列生物工程的应用,不须要进行检测和筛选的是()A.制备单克隆抗体的过程B.对植物的茎尖进行组织培育,大规模培育优良品种C.利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝”D.从土壤中分别分解尿素的细菌进而生产脲酶的过程答案:B解析:将小鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,须要用选择培育基筛选出杂交瘤细胞,还需进行抗体阳性检测,得到能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。植物组织培育属于无性生殖,对植物的离体组织进行培育,大规模培育优良品种不须要进行检测与筛选。利用植物细胞工程技术培育“白菜—甘蓝”时,须要筛选出白菜—甘蓝杂种细胞进行培育。从土壤中分别分解尿素的细菌须要选择培育,抑制其他细菌的繁殖,利于分解尿素的细菌的繁殖,之后还要进行纯化并进行产脲酶鉴定试验。2.动物细胞培育中存在“接触抑制”现象,假如清除一部分贴壁细胞,邻近细胞又快速分裂重新填满这一区域,然后再次停止分裂。据此作出的下列假设,不合理的是()A.清除部分细胞,邻近细胞释放某种信号分子重新启动细胞周期B.细胞接触后,为动物细胞停止分裂离开细胞周期供应了信号C.细胞周期是有其内在节律性的,不受环境因素的影响D.细胞膜表面上可能存在接受邻近细胞信号的受体答案:C解析:动物细胞分裂时,当细胞间相互接触时细胞分裂停止,说明细胞分裂受基因限制,同时也受四周环境的影响。3.(不定项选择题)下图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),在HAT筛选培育液中不能正常合成DNA,无法生长。下列叙述正确的是()A.可用灭活的病毒诱导细胞融合B.两两融合的细胞都能在HAT培育液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的流淌性是细胞融合的基础答案:ACD解析:两两融合的细胞包括B淋巴细胞与B淋巴细胞融合形成的具有同种核的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合形成的具有同种核的细胞、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞。骨髓瘤细胞虽然能无限增殖,但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶,B淋巴细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶,但不具有无限增殖的本事,所以在HAT筛选培育液中,两两融合的具有同种核的细胞都无法生长,只有杂交瘤细胞才能生长。4.下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解。据图分析,下列叙述错误的是()A.单克隆抗体制备过程的依次为B.图D所示的杂交瘤细胞即为产生单克隆抗体的细胞群C.图B的操作目的是保证图A中有所须要的B淋巴细胞D.试验室制备单克隆抗体可用图E或图I所示的培育方法答案:B解析:图D表示杂交瘤细胞,具备融合前两种细胞的优点,既能无限繁殖,又能产生抗体,但是还须要进一步筛选,才能获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。5.请阅读下列材料并回答问题。材料一由于细胞的密度不同,在地面上受重力影响,细胞的融合特别困难,在太空进行此试验比在地面进行细胞融合率大大提高。“神舟”六号飞船上进行了B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合、黄花烟草原生质体和“革新”一号烟草原生质体的融合两个科学试验。在电融合仪内经过160min后,细胞融合最终获得胜利。材料二下图为哺乳动物生殖过程及相关细胞工程的示意图,其中b为卵细胞,c、d为体细胞。(1)与传统的有性杂交相比,细胞融合技术的优越性体现在。在太空进行细胞融合与在地面进行细胞融合相比,前者的优越性体现在。(2)利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造开拓了新的途径。

(3)动物个体甲和植物个体丙的产生分别属于生殖和生殖。

(4)在“神舟”六号飞船上实行的“太空融合”,与上图中的方法的原理相同。

(5)人工诱导动物细胞融合与诱导植物

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