SN∕T 4586-2016 出口食品中噻苯隆残留量的检测方法 高效液相色谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准出口食品中噻苯隆残留量的检测方法高效液相色谱法I125.1高效液相色谱仪，配紫外检测器。5.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。5.3离心机：转速不低于4000r/min。5.4组织捣碎机5.5均质机。5.6超声波清洗器。5.7旋转蒸发仪。5.8固相萃取装置。5.9氮吹仪。5.10旋涡混匀器6样品制备与保存取代表性样品部分约500g,将其切碎后(鸡蛋去壳),用均质机将样品加工成浆状，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样袋内，密闭并标明标记，于-18℃以下冷冻保存。6.2苹果和大白菜取代表性样品约500g,将其可食部分先切碎，用均质机将样品加工成浆状，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样袋内，密闭并标明标记于-18C以下令冻保存。取代表性样品约500g,用粉粹机粉碎，混匀，装入洁净的容器内，密封，标明标记，于0℃~4℃取有代表性样品约500mL。混匀后装入洁净容器作为试样，密封并标明标记。于-18℃下冷冻6.5蜂蜜取有代表性样品约500g。对于无结晶的样品将其搅拌均匀；对于有结晶析出的样品，在密闭情况下，将样品置于不超过60℃的水浴中温热，待样品全部融化后搅拌均匀，迅速冷却至室温。在融化时必须注意防止水分挥发。装入洁净容器作为试样，密封并标明标记。37.1提取于45℃中旋转蒸发至近1mL待净化。5min,以4000r/min离心提取10min,分别再用5mL、2mL乙腈(4.1)重复提取残渣两次，合并3次提取液于15mL离心管中再以4000r/min离心10min过滤，取上清液于15mL离心管中，加入无水硫酸钠脱水后，于45℃水浴下氮吹浓缩至近1mL,待净化。47.3.2定量测定根据试样中噻苯隆含量情况，选定峰面积相近的标准工作液，标准工作液和待测样液中噻苯隆的响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，噻苯隆的保留时间约为9.4min,其高效液相色谱谱图参见图A.1。7.3.3定性测定按照液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准品一致，定性离子对的相对丰度，是用相对于最强离子丰度的强度百分比表示，应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表1规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。在上述LC-MS/MS条件下，噻苯隆的参考质谱参数参见表B.1,噻苯隆标准品MRM图参见表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差允许的相对偏差7.4空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。8结果计算和表述用色谱数据处理机或按式(1)分别计算试样中待测物的含量，计算结果应扣除空白值。X——试样中噻苯隆的残留量，单位为毫克每千克(mg/kg);.A——样液中噻苯隆的峰面积；c——标准工作液中噻苯隆的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);V——样液最终定容体积，单位为毫升(mL);A,——标准工作液中噻苯隆的峰面积；m——最终样液代表的试样质量，单位为克(g)。9方法的测定低限和回收率9.1测定低限9.2回收率验，噻苯隆的添加回收率参见表C.1。56(资料性附录)质谱/质谱仪参数1质谱/质谱仪参数如下：a)离子化模式：电喷雾电离负离子模式(ESI-);b)质谱扫描方式：多反应监测(MRM);c)分辨率：单位质量分辨率；d)离子源喷雾电压(IS):-4500e)雾化温度(TEM):550℃;f)气帘气压力(CUR):0.24MPa35psi);g)雾化气压力(GAS1):0.48MPa(70psi);h)加热辅助气(GAS2):0.41MPa(60psi);i)碰撞气流速比(CAD):5;j)其他参考质谱条件参见表B.1;k)噻苯隆标准品MRM图参见图B.1。保留时间去簇电压碰撞室出口电压(CXP)/V噻苯隆图B.1噻苯隆标准品LC-MS/MS-MRM色谱图7回收率范围%猪肉蜂蜜8forCertificationandAccreditation.fSongQing,SongYepi9ThefollowingdocumentsfortheapplicationofthistextarenecessoryTheresiduesofthidiazuroninthetestsampleareexUnlessspecified,allreagentsshouldbeofanalyticalgrade;waterus4.8Acetonitrile4.10Acetonitrile+water(4.11Standardchemicals(thidiazuronC₉H₈N₃OS,CASNo4.12Standardstocksolution:Accuratelyweigh10mgmethanol,transferredtoa4.13Standardworkingsolution:according5.1Highperform5.2Analyticalbalance,sensitivity:0.1mgSN/T4586—2016blender.PutinsuitableTakeabout500grepresentativTakeapproximately500greprTakeapproximately500grepresentativesamples.Mixthoroughsampleintowaterparingsample,pleaseaCertainmeasuresshouldbetakentopreAccuratelyweigh2.0gofthetestsample(accuratAccuratelyweigh2.0gofthetestAccuratelyweigh2.0thesupernatantiscollectedinagwithproperamountLCoperatingconditid)Injectionvolumf)DetectionwaveAccordingtotheapproximateconcentrationoftworkingsolutionwithsimilarpeakheighttothatofthesainjectionsofsamplesolutionofequalvolume.UndertheabovetwoselectedionpairsoftofsamplechromatogrampeakTable1—MaximumpermittedtolerancesforrelativerwithoutadditionoftestsThecalculationofthidiazuroncontentinX—theresiduecontentofanalytc—theconcentrationofanalyteinstandaV—thefinalvolumeofsamplesolution,mL;9.1Limitofquantia)lonSource:ESI,Nb)Mon