药物分析：第八章 杂环类药物的分析

药物分析：第八章杂环类药物的分析吡啶环的开环反应：适用于吡啶环B或Y位被羧基衍生物所取代的异烟肼和尼克刹米戊烯二醛反应（köning反应）：溴化氰与芳伯按作用于吡啶环，使环上氮原子由3价转变为5价，吡啶环发生水解反应生成戊烯二醛，再与芳伯胺缩合，生成有色的戊烯二醛衍生物，其颜色随所用芳伯胺的不同有所差异二硝基氯苯反应（Vongerichten反应）：在无水的条件下，吡啶及其衍生物与2,4-二硝基氯苯混合共热或加热至熔融，冷却后，加醇制氢氧化钾溶液将残渣溶解，溶液呈紫红色。异烟肼－氧化成羧基；尼克刹米－水解成羧基酰肼基的反应：还原反应：异烟肼与氨制硝酸银试液反应，即生成金属银黑色浑浊和气泡（氮气），并在玻璃试管壁上产生银镜，异烟肼被氧化为异烟酸铵；异烟肼与亚硒酸作用，可将其还原成红色硒的沉淀。缩合反应：异烟肼的酰肼基与芳醛缩合形成腙，其有固定的熔点，可用于鉴别；异烟肼与1,2-萘醌-4-磺酸在碱性介质中可缩合呈红色，凡具有芳香胺基或活性亚甲基者均有此反应。异烟肼中肼的检查1、TLC检查方法：取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含0.20mg（相当于游离肼50μg）的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取供试品溶液10μl与对照溶液2μl，分别点于同一硅胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）上，以异丙醇－丙醇(3:2)为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15分钟后检视。在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。－－限度：0.02%。2、比浊法JP(14)采用样品中加水杨酸的乙醇溶液观察浑浊的方法－专属性差3、差示分光光度法原理：肼－对-二甲氨基苯甲醛→黄色缩合物（对-二甲氨基苯甲醛连氮）465nm波长有最大吸收异烟肼－对-二甲氨基苯甲醛→缩合物（对-二甲氨基苄叉）465nm波长无吸收加入3%丙酮，可使得黄色缩合物（对-二甲氨基苯甲醛连氮）变为无色的二甲基甲酮连氮，继而作为参比，用于测定△A456nm，并以对照品比较法计算游离肼的含量。－－专属、准确、灵敏，最低检测限可达0.1μg/ml。尼克刹米中有关物质的检查TLC无杂质对照品－高低浓度对比法检查方法：取本品，加甲醇制成每1ml中含40mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇分别稀释成每1ml中含0.4mg和40μg的溶液，作为对照溶液(1)和(2)。照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿－丙醇(75:25)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液(2)的主斑点比较，不得更深；如有1点超过时，应不深于对照溶液(1)的主斑点。绿奎宁反应机制：奎宁和奎宁丁为6-位含氧喹啉类衍生物，6-位含氧喹啉，经氯水（或溴水）氧化氯化，再以氨水处理缩合，生成绿色的二醌基亚胺的铵盐；方法：取其水溶液，加溴试液0.2ml和氨试液1ml，即显翠绿色，加酸成中性变成蓝色，成酸性时则为紫红色托烷生物碱的鉴别试验氧化反应：水解生成的莨菪酸，在硫酸和重铬酸钾在加热条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，逸出苦杏仁的臭味。沉淀反应：碱性－生物碱沉淀剂生成沉淀例：阿托品：氯化汞醇试液→黄色沉淀东莨菪碱：氯化汞醇→白色复盐沉淀吩噻嗪类药物：为苯并噻嗪的衍生物，分子结构中均含有硫氮杂蒽母核硫氮杂蒽母核为共轭三环的π系统，紫外区三个吸收峰值，约205nm、254nm、300nm，最强多在254nm附近二价硫可与金属钯离子形成红色的配位化合物，而氧化产物亚砜、砜则无此反应，含量测定非水溶液滴定法（排除干扰法）：适用范围：pKb>8的有机弱碱性药物及其盐类酸根的影响：加入定量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其生成在醋酸中难解离的卤化汞，以消除氢卤酸对滴定的干扰和不良影响。滴定剂的稳定性：醋酸具有挥发性，切膨胀系数大，因此温度和贮存条件影响滴定剂的浓度。终点的指示方法：电位滴定法，指示剂法其他干扰：大都经碱化处理，有机溶剂提取分离游离碱后，再用高氯酸滴定液滴定。氧化还原滴定法—铈量法二氢吡啶类药物：用邻二氮菲指示液指示终点，终点时，微过量的Ce4+将指示液中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙红色配合物离子转化为淡蓝色或无色的配合物离子，以指示终点的到达。吩噻嗪类药物：硫酸铈滴定时，先失去一个电子形成一种红色的自由基离子，达到化学计量点时，溶液中的吩噻嗪类药物均失去两个电子，而红色消退，借以用药物自身颜色变化指示终点。酸性染料比色法原理：在适当的介质中，碱性药物(B)可与氢离子结合成(BH+)，而一些酸性染料可解离为(In-)，两者定量结合成有色络合物(BH+In-)离子对，可被有机溶剂定量提取，在一定波长处测定其吸收，即可算出碱性药物的含量。水相最佳pH的选择：使有机碱药物和酸性染料分别全部以BH+和In-状态存在酸性染料及其浓度：定量结合，离子对溶解性好，且在其最大吸收波长处有较高的吸光度；染料在有机相中不溶或很少溶解有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想水分的影响：影响结果，脱水剂或滤纸除去水分酸性染料中的有色杂质：在加入供试品之前，将缓冲液与酸性染料的混合液先用所选用的有机溶剂萃取弃去。离子对高效液相色谱法：适用范围：解离强度大的酸性或碱性物质的色谱保留原理：在流动相中加入与呈解离状态的待