(高清版)GB∕T 38163-2019 常见过敏蛋白的测定 液相色谱-串联质谱法

常见过敏蛋白的测定国家市场监督管理总局中国国家标准化管理委员会I1下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引GB/T6682分析实验室用水规格25.14Tris-HCl溶液(40mmol/L):称取2.42gTris,溶解于800mL水中，用10%盐酸调节pH至溶液于-20℃可保存6个月。3于水浴锅60℃加热振荡提取3h。提取液以13800g高速离心5min,上清液过低蛋白质吸附的420mLTris-HCl溶液，振荡均匀使试样完全溶解，置于水浴锅60℃加热振荡提取3h。提取液以见表1;时间/min5表1(续)时间/min偏差在±2.5%之内；且样品中所选择的肽段定性离子均出现(附录A中表A.1),各组分定性离子的相士25进行定量，平行测定3次。标准工作液和样液中待测物的响应值均应在仪器线性响应范围内。标准品提取离子色谱图(XIC)参见附录B中图B.1～图B.14。6检出限为2.5mg/kg,定量限为10mg/kg。不同基质中的定量标准曲线及线性范围参见附录C中表C.1。714种过敏蛋白特征肽段及其主要参考质谱参数参见表A.1。过敏原过敏蛋白子离子m/z保留时间V920.5(十)692.9(2十)991.5(十)598.3(3十)911.5*(十)701.4(十)415.7(2十)400.2(十)415.7(2十)660.3(十)829.5(十)1121.5*(十)1007.5(十)713.4(2十)501.3(十)1001.6*(十)704.3(2十)1193.5(十)646.4(十)1127.6(十)692.3(2十)870.5(十)686.4(十)564.8(2十)557.4(十)748.4*(十)601.3(十)576.3(2十)852.4(十)689.4*(十)571.8(2十)858.4(十)571.8(2十)497.3*(十)562.8(2十)514.3(十)562.8(2十)628.3(十)544(3十)742.4*(十)671.4(十)井定性时，每种过敏原的所有特征肽段同时出现视为“检出8B.1牛奶四种主要过敏原特征肽段定性检测XIC图(见图B.1～图B.4)■XICof+MRM(28pairs):692.900/991.500aruExpectedR...Max.1.7e6eps.XICof+MFM(28palrs):6Milk-aSl-casein-FFVAPFPEVFGK-692.9-991.54.0o6Milk-aSl-casein-FFVAPFPEYFGK-6924.0e5.2.0e5-框55保留时间/min保留时间/minXICof+MRM(28pairs):598.300/701.400auExpectadR...Max.8.965cps.■xICof+MEN(28pairs):598.300/911.500anuExpectedR...Mi1k-aS2-casein-NAVPITP保留时间/minMilk-aS2-casein-NAVPI保留时间/min图B.2aS2-casein蛋白定性检测XIC图at+5M(r8patrs):41670/62346amEapctadk:5.7D:aplP0266CNSEBNINNFFPE+26.1iahtfronsaple6服..Ma9xICof+IM(158pairs):415.70/40020smmEpetedMT:5.7ID:splP0066ICAS8BOMINAFTPQ+23.lishtfxIcofMBM(158pair):60.702/829.478muExpactadRT:10.9ID:sp|PO26E|CASK_OTINSPAQLQMQMLNTYPX.43alight.Manlk=g-cssn图B.4K-casein蛋白定性检测XIC图口XICof+MRN(28pairs):713.400/1001.600amuExpected.Max.1.7e65G1-VLIVPQNEVVAAR-713.4-115□xICof+MM(28paira):692.300/1127.600ammErpected..Max.9627.0cps.□xIcof+MRM(28palrs):02.300/870.500sauExpected...QQQEEQPLEVR-692.3-1口口Soybean-B-c-a²-chain-TISSEDEPFNLR-7042□xIcof+yXM(28palrs):564.800/636.400gmuExpectedR..Max.1.206aps.□xIcof+MM(28pairs):564.800/557.400anuEzpectadR..Peanut-Arah1-GTCNLELVAVR-564.8-9.6efPeanut-Arah1-GTGNLELVAVR-56图B.8Arah1蛋白定性检测XIC图离子相对丰度/eps离子相对丰度/epsXICof+MRV(28pairs):684.40B.4榛子主要过敏原特征肽段定性检测XIC图(见图B.10)□xicof+WGN(28patrs):576.300/852.400ammExpectedR...Wax.3.006eps.□xICof+MRM(28pairs):576.300/689.400amuExpectedR...2.5e6-图B.10Cora9蛋白定性检测XIC图B.5杏仁两种主要过敏原特征肽段定性检测XIC图(见图B.11～图B.12)6.0e50.0离子相对丰度/eps离子相对丰度/epsB.6核桃主要过敏原特征肽段定性检测XIC图(见图B.13)4.0e4-离子相对丰度/cps离子相对丰度/cpsWalnut-Jugr2-VFSNDILVALNTPR-544-6保留时间/minB.7鸡蛋主要过敏原特征肽段定性检测XIC图(见图B.14)xICof+MBM(28pairas)