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文档简介
吉林大学生命科学学院
2013版本科实践教学大纲
(基础实验部分)
吉林大学国家级生物实验教学示范中心
吉林大学化学-生命科学专业实验教学示范中心
2013年12月
生物学实验原理与技术(343009)教学大纲
01.教学单位名称:生命科学学院
02.实验中心名称:吉林大学国家级生物实验教学示范中心
03.课程名称:生物学实验原理与技术
04.课程代码:343009
05.课程类别:学科基础课
06.课程性质:必修
07.课程学时:64
08.课程学分:2
09.面向专业:生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、唐敖庆班
10.实验课程的教学任务、要求和教学目的
10.1教学任务:
本课程由植物生物学、生理学、微生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、
生物化学和分子生物学等方面相关的实验理论知识、实验技术和实验方法组成,
是一门与实验课相衔接的实验理论讲授课程,各部分内容在实验课开课前统一进
行集中讲授,学生课后预习,为学生进行的实验操作奠定了理论基础。
10.2教学要求:
本课程是各门基础实验课程的前导课,涉及各个实验项目的原理与基本技术
方法。因此,要求学生在实验前认真听教师讲解相关基础知识,积极思考、认真
记录。课后认真复习、认真回答思考题,并参加每次实验前的预习测试。
10.3教学目的:
使实验课程与理论课程合理衔接,加强学生对实验的相关理论知识的理解与
掌握,促进学生充分预习和对即将进行实验的基本技术和基本方法全面的理解。
为学生进行的实验操作奠定理论基础。
11.学生应掌握的实验技术及实验能力
本课程是一门与实验课相衔接的实验理论讲授课,涉及8门生物学基础实验
课程的实验原理、技术和方法。具体内容包括显微镜技术、分离类胡萝卜素和叶
绿素、提取叶绿体色素、观察叶绿素的荧光现象、观察光对叶绿素的破坏作用、
测定种子发芽率、观察呼吸运动的调节、麻醉家兔、气管插管、制备蛙类坐骨神
经腓肠肌标本、证实反射弧的完整性与反射活动的关系、验证心肌有效不应期较
长的特征、观察蛙期前收缩与代偿间歇、钝性分离气管、无菌操作技术、微生物
简单染色方法、血球计数板的使用、灭菌锅的使用方法、微生物分离纯化技术常
规微生物涂片观察技术微生物培养技术、菌种保藏技术、无菌操作技术、微生
物简单染色方法、血球计数板的使用、灭菌锅的使用方法、微生物分离纯化技术、
常规微生物涂片观察技术、微生物培养技术、菌种保藏技术、显微镜技术、观察
胀泡的形成、鉴别纺锤体、鉴别姐妹染色单体、植物染色体制片技术、染色体臂
形成、观察细胞内多糖的分布、观察细胞内DNA的分布、原代细胞培养、传代细
胞培养、细胞的消化分散、观察细胞融合的现象、詹纳斯绿染色、PEG诱导鸡静
脉血的化学融合、植物组织培养技术、制作石蜡切片及HE染色、核酸的乙醇沉
淀、测定RNA含量、测定核酸含量、定磷法测定核酸的含量、地衣酚法测定RNA
含量、预处理组织、匀浆组织、提取核酸、核酸核蛋白(RNP)苯酚分离、剥离
凝胶板、自溶处理、超声破碎、制冰盐浴、目测酶活力、免疫小鼠、颈部皮下注
射抗原、腹腔注射抗原、统计处理数据、梯度稀释血清、离心分离血清、摘眼球
取血、测抗体效价、体外重组DNA、连接DNA片段、凝胶回收DNA、CaCI2法
制备感受态、转化外源DNA、PCR扩增、DNA琼脂糖凝胶电泳、碱裂解法提取质
粒、蓝白斑筛选、限制性内切酶使用等。
本课程还加入了安全环保及习惯教育内容。主要内容包括火灾预防与逃生常识,
触电防护知识,烧烫伤处理方法,实验室有毒废弃物处理常识,实验动物尸体处
理常识,实验习惯教育及实验室环保教育等。
12.开设实验项目
开设实验项目一览表
组
实验项目实验首次开
实验项目名称实验类型实验性质A数
编号学时出年月
34300901安全环保及习惯教育综合性必做31200503
植物生物学实验原理与技
34300902综合性必做51200503
术
34300903生理学实验原理与技术综合性必做51200503
34300904微生物学实验原理与技术综合性必做91200503
细胞生物学实验原理与技
34300905综合性必做91200503
术
34300906遗传学实验原理与技术综合性必做51200503
34300907免疫学实验原理与技术综合性必做51200503
生物化学实验原理与技
34300908I综合性必做91200503
术
生物化学实验原理与技
34300909n综合性必做51200503
术
分子生物学实验原理与技
34300910综合性必做91200503
术
安全环保及习惯教育。主要内容包括火灾预防与逃生常识,触电防护知识,烧烫
伤处理方法,实验室有毒废弃物处理常识,实验动物尸体处理常识,实验习惯教
育及实验室环保教育等。
植物生物学实验原理与技术。主要内容包括显微镜基本技术培训,植物组织
和器官的结构观察,植物理化性质的测定,种子植物标本的采集、制作与保存。
生理学实验原理与技术。主要内容包括实验动物使用与管理技术,生理数据
采集与分析技术,动物生理机能实验,家兔解剖及形态学观察实验,鲤鱼解剖及
形态学观察实验,反射弧的分析实验,蛙心灌流观察体液因素对心脏活动的影响,
秀丽隐杆线虫(C.elegans)肠道内细菌繁殖对寿命影响,生理机能虚拟实验(仿
真)。
微生物学实验原理与技术。主要内容包括微生物实验中的无菌操作,显微镜
油镜的使用及微生物测微技术,土壤中微生物的分离纯化、培养观察及保藏,从
酸奶中分离、培养产乳链菌肽的乳酸乳球菌及乳链菌肽效价测定,大肠杆菌噬菌
体的分离、纯化及效价测定,纤维素酶产生菌的选育。
细胞生物学实验原理与技术。主要内容包括徒手切片、石蜡切片、冷冻切片
的制作技术,细胞培养无菌操作技术,细胞的冻存及复苏技术,植物组织培养无
菌操作及观察技术,徒手切片、装片、涂片的制作及细胞结构的观察,石蜡切片
的制备及细胞的染色观察,细胞器的荧光标记技术,植物组织培养、细胞悬浮培
养及原生质体的分离培养,电镜制片技术,免疫胶体金技术,动物细胞的融合,
动物细胞传代与原代培养,细胞器的分离与鉴定,细胞生理性质实验,细胞凋亡
过程中DNA及蛋白检测实验,利用RT-PCR技术检测细胞中B-actin的表达,哺
乳动物早熟染色体凝聚诱导。
遗传学实验原理与技术。主要内容包括动植物培养成分配制技术,动植物染
色体观察,果蝇的杂交,链施霉有性杂交的四分子分析,植物多倍体的诱发,群
体等位基因频率估算及遗传平衡分析,CTAB法提取植物基因组DNAo
免疫学实验原理与技术。主要内容包括多克隆抗体的制备,淋巴细胞功能检
测实验,凝集实验,免疫组织化学实验,NK细胞功能检测,补体介导的细胞毒
实验,细胞因子检测技术,酶联免疫吸附实验,免疫沉淀,免疫印迹,单克隆抗
体的制备,免疫共沉淀,淋巴细胞表面标志物分析,酶标仪检测多克隆抗体效价。
生物化学实验I原理与技术。主要内容包括啤酒酵母蔗糖酶的提取、分离纯
化、性质鉴定及反应动力学,亲和层析法纯化胰蛋白酶,酶谱分析技术分析纤维
素酶,大豆蛋白的提取与含量测定,DNS-CI法测定蛋白质及肽的N末端氨基酸,
细胞色素C的制备及测定,氯化钠的称量和乙醇的移取,发酵液的离心分离,格
酸钾溶液吸光度的测定,DEAE52纤维素离子交换柱的制备,G75葡聚糖凝胶柱的
制备,SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备,常用试剂及溶液(缓冲液)的配制,电泳凝
胶的条带分析,测定未知格酸钾溶液的溶度,采用高效液相法测定中药中有效成
分的含量,采用气相色谱法测定中药活性成分的含量,采用红外光谱分析化合物
的组成结构。
生物化学实验II原理与技术。主要内容包括牛肝DNA、RNA的分离及含量测定,
种子萌发前后蛋白质、核酸、糖、脂类含量变化测定,三覆酸循环中间产物对酵
母耗氧率的影响,生化代谢实验基本技术,DNA光损伤因素测定。
分子生物学实验原理与技术。主要内容包括重组人白介素-18(rhlL-18)基因
工程菌的构建,头发中抽提DNA并用PCR-RFLP法鉴定CYP2c9基因型,蛋白质
印迹分析,DNA探针的制备和标记,Southern印迹法,RNA的Northern杂交,
真核生物cDNA文库的构建和分析,电穿孔法转染哺乳动物细胞,聚合酶链式反
应-单链构象多态性检测(PCR-SSCP),PLPR启动子表达载体表达目的基因,微
生物基因组学分析,荧光定量PCR法鉴定CYP2c9基因型,荧光定量PCR检测液
体发酵杂菌污染,琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段,PCR扩增目的DNA片段,蓝白
斑筛选感受态细胞的制备,植物基因组DNA、总RNA的提取及相对分子质量测定,
RNA甲醛变性电泳,RT-PCR扩增目的基因。
13.实验教材或指导书或主要参考资料
1)滕利荣等,生物学基础实验教程I(第三版),科学出版社,2008年
2)滕利荣等,生命科学仪器实用技术教程(第二版),科学出版社,2013
3)蔡冲等,植物生物学实验,北京师范大学出版社,2013年
4)邵小明等,植物生物学实验(第二版),高等教育出版社,2011年
5)沈显生等,植物生物学实验,中国科学技术大学出版社,2010年
6)汪小凡等,植物生物学实验指导,高等教育出版社,2007年
7)王冬梅等,生物化学实验指导,科学出版社,2009年
8)刘志国等,生物化学实验,华中科技大学出版社,2007年
9)王镜岩等,生物化学(第三版),高等教育出版社,2002年
10)张彩莹等,生物化学实验,化学工业出版社,2009年
11)杨荣武等,生物化学原理,高等教育出版社,2006年
12)丛峰松等,生物化学实验,上海交通大学出版社,2005年
13)黄秀梨等,微生物学实验指导,高等教育出版社,1999年
14)范秀容等,微生物学实验,人民教育出版社,1980年
15)沈萍等,微生物学实验,高等教育出版社,2007年
16)杨大翔,遗传学实验,科学出版社,2006年
17)祝水金等,遗传学实验指导,中国农业出版社,2005年
18)郭善利等,遗传学实验教程,科学出版社,2004年
19)王玲等,人体及动物生理学(第二版),高等教育出版社,2001年
20)陈守良等,动物生理学(第二版),北京大学出版社,2005年
21)张镜如等,生理学(第四版),人民卫生出版社,1995年
22)黎燕等,分子免疫学实验指南,化学工业出版社,2008年
23)朱立平等,免疫学常用实验方法,人民军医出版社,2000年
24)唐建民等,医学微生物学及免疫学实验指导,人民军医出版社,2004
25)周俊宜等,分子生物学基本技能与策略,科学出版社,2003年
26)魏群等,分子生物学实验指导,高等教育出版社,1999年
27)J.萨姆布鲁克,分子克隆实验指南,科学出版社,2005年
28)郝福英等,分子生物学实验技术,北京大学出版社,2003年
29)梁国栋等,最新分子生物学实验技术,科学出版社,2007年
30)周俊宜等,分子生物学基本技能与策略,科学出版社,2003年
31)朱厚础等译,蛋白质纯化与鉴定实验指南,科学出版社,1999年
32)张龙翔等,生化实验方法和技术,高等教育出版社,1997年
33)汪家政等,蛋白质技术手册,科学出版社,2000年
34)王金发等,细胞生物学实验教程,科学出版社,2005年
35)辛华等,细胞生物学实验,科学出版社,2001年
36)李素文等,细胞生物学实验实验指导,高等教育出版社/施普林格出版,
2001年
14.考核栗求、考核方式及成绩评定标准
14.1考核要求:以培养学生的科学态度、科学思维和实验操作能力为前提,
注重训练学生的独立动手能力、思考能力,发现问题、分析问题和解决问题的能
力,实验设计能力及创新能力,教师应及时、客观、公正、如实评价每名学生实
验情况及评阅试卷、实验报告和设计实验。
14.2考核方式:采取考核与考试相结合的方式综合评定实验成绩,按百分
制方式计分。
14.3成绩评定标准:本门课程结束后进行考试。
15.执笔人
孟庆繁研究员
汤海峰工程师
16.制定日期
20131120
17.审核人
滕利荣教授
18.审核日期
20131120
19.学院审定程序说明
2013年10月10日接到学校通知后成立《生命科学学院实践教学大纲(2013
版)”》修订专项工作组并进行前期筹备工作。2013年10月14日至2013年10
月16日各门课程梯队召开《生命科学学院实践教学大纲(2013版)”》修订工作
会议,分配修订任务。2013年10月21日前各门课程梯队提交《生命科学学院
实践教学大纲(2013版)》修订稿。2013年10月25日生命科学学院教学委员会
召开第一次会议审议《生命科学学院实践教学大纲(2013版)》修订稿并提出整
改意见。2013年10月26日至10月28日各门课程梯队按照“整改意见”进行
整改。2013年10月30日生命科学学院教学委员会召开第二次会议审定通过《生
命科学学院实践教学大纲(2013版)》。
20.学院审定日期
20131130
植物生物学实验(343010)教学大纲
01.教学单位名称:生命科学学院
02.实验中心名称:吉林大学国家级生物实验教学示范中心
03.课程名称:植物生物学实验
04.课程代码:343010
05.课程类别:学科基础课
06.课程性质:选修
07.课程学时:32
08.课程学分:1
09.面向专业:生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、唐敖庆班
10.实验课程的教学任务、要求和教学目的
10.1教学任务
植物生物学实验是我院各个本科专业的学科基础课程。通过植物生物学实
验教学,使学生熟练掌握植物生物学实验的方法和技术,加深理解植物生物学基
础知识,逐步培养独立研究的能力和素质。
10.2教学要求
植物生物学实验是我院大一新生入学后首次进实验室开设的实验课程,要求
学生实验前必须参加安全、环保及实验习惯教育。植物生物学实验中涉及到植物
生物学的基础知识较多,特别是形态结构观察部分,需要学生首先熟练掌握相关
的基础知识,然后才能更有针对性的进行观察,植物生理实验部分也要求学生在
实验前对实验原理有深刻的理解。因此,要求学生在实验前认真听植物生物学实
验原理和技术讲授,并预习实验步骤和注意事项。在实验过程中,要求学生细致
观察、规范操作、积极思考、认真记录。在实验完成后,填写实验报告,回答思
考题,并参加讨论课,对实验中出现的问题进行分析和讨论。
10.3教学目的
通过植物生物学实验,使学生熟练掌握相关的实验原理和技能,巩固相关基
础知识,并进而提高学生的动手能力、观察能力、思考能力、协作能力、创新能
力等一系列素质,为其以后的学习及科学研究工作奠定基础。
11.学生应掌握的实验技术及实验能力
学生应熟练掌握显微镜操作技术、生物绘图技术、植物水势测定技术、植物
呼吸强度测定技术、叶绿素提取技术、种子发芽率快速测定技术、标本采集制作
技术;具有初步的实验方案的设计能力。
13.开设实验项目
开设实验项目一览表
每
实验项目实验实验首次开
人
性
实验项目名称实验类型质
编号学时出年月
34301001显微镜基本技术验证性必做41200109
34301002植物组织和器官的结构观察综合性必做81200109
34301003植物理化性质的测定综合性必做121200109
种子植物标本的采集、制作与
34301004综合性必做61201409
保存
34301005植物的无土栽培设计性选做21200109
34301006环境因素对植物生长发育设计性选做21200109
的影响
注:设计实验中,可任选其一
显微镜基本技术。内容包括了解显微镜的类型和特点;掌握显微镜的结构;
掌握显微镜的使用方法;掌握显微镜的注意事项。
植物组织、器官的结构观察。内容包括植物组织的结构观察;被子植物根、
茎、叶等营养器官的结构观察;被子植物花、花药、子房、果实、种子等繁殖器
官的结构观察。
植物理化性质的测定。内容包括植物组织水势的测定;植物呼吸强度的测定;
叶绿素的提取及性质测定;种子发芽率的快速测定。
种子植物标本的采集、制作与保存。内容包括标本的采集、标本的制作、标
本的保存。
植物的无土栽培。内容包括用人工配制的营养液与对照组土壤培养的植物对
比,比较无土栽培和常规方法对植物生长的影响。
环境因素对植物生长发育的影响。内容包括研究在外界环境因素的影响下,
植物种子发芽率和生长情况。
13.实验教材或指导书或主要参考资料
1)滕利荣等,生物学基础实验教程I(第三版),科学出版社,2008年
2)蔡冲主编,植物生物学实验,北京师范大学出版社,2013年
3)邵小明等主编,植物生物学实验(第二版),高等教育出版社,2011年
4)沈显生主编,植物生物学实验,中国科学技术大学出版社,2010年
5)汪小凡主编,植物生物学实验指导,高教出版社,2007年
14.考核要求、考核方式及成绩评定标准
14.1考核要求
以培养学生的科学态度、科学思维和实验操作能力为前提,注重训练学生的
独立动手能力、思考能力,发现问题、分析问题和解决问题的能力,实验设计能
力及创新能力,教师应及时、客观、公正、如实评价每名学生实验情况及评阅试
卷、实验报告和设计实验。
14.2考核方式
采取考核与考试相结合的方式综合评定实验成绩,按百分制方式计分。
14.3成绩评定标准
根据生物基础实验教学中心制定的《学生实验成绩考评方法》进行评定。实
验习惯成绩,10%;预习考试成绩,10%;实验操作成绩,40%;实验报告成绩,
20%;设计实验成绩,20%o
15.执笔人
许月副教授
刘小波讲师
16.制定日期
20131015
17.审核人
滕利荣教授
18.审核日期
20131020
19.学院审定程序说明
2013年10月10日接到学校通知后成立《生命科学学院实践教学大纲(2013
版)》修订专项工作组并进行前期筹备工作。2013年10月14日至2013年10月
16日各门课程梯队召开《生命科学学院实践教学大纲(2013版)》修订工作会议,
分配修订任务。2013年10月21日前各门课程梯队提交《生命科学学院实践教
学大纲(2013版)》修订稿。2013年10月25日生命科学学院教学委员会召开第
一次会议审议《生命科学学院实践教学大纲(2013版)》修订稿并提出整改意见。
2013年10月26日至10月28日各门课程梯队按照“整改意见”进行整改。2013
年10月30日生命科学学院教学委员会召开第二次会议审定通过《生命科学学院
实践教学大纲(2013版)》。
20.学院审定日期
20131030
生理学实验(343001)教学大纲
01.教学单位名称:生命科学学院
02.实验中心名称:吉林大学国家级生物实验教学示范中心
03.课程名称:生理学实验
04.课程代码:343001
05.课程类别:学科基础课
06.课程性质:必修
07.课程学时:32学时
08.课程学分:1
09.面向专业:生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、唐敖庆班
10.实验课程的教学任务、要求和教学目的
10.1教学任务
通过课程教学,使学生了解和掌握生理科学实验的基本方法和技术,了解进
行生理科学研究的基本程序,具备初步的知识应用和科学研究能力。
10.2教学要求
本课程实验仪器设备操作比较复杂,实验动物的手术,标本制备难度较大,
实验时间较长,处理因素多,实验涉及多个学科知识。因此课前充分的准备工作
是实验顺利进行和获得真实实验结果的重要保证。这就要求学生在课前必须按照
实验预习要求认真预习和准备。在实验过程当中应遵守实验室规章制度,有序进
行实验,人道对待动物,严格按照规定程序操作,全面观察,准确如实记录实验
数据。实验结束后,做好善后工作,处理实验动物,清洁整理实验器具并清点归
还,经指导教师检查无误后方可离开实验室。实验后应及时整理实验记录和数据,
按要求认真独立完成实验报告或论文,并按时提交。
10.3教学目的
通过生理学实验,使学生熟练掌握实验动物解剖技术及生理实验技能,锻炼
学生的动手能力和分析问题解决问题的能力,培养学生合作精神,为其以后的专
业课学习及毕业论文的顺利开展奠定基础。
11.学生应掌握的实验技术及实验能力
通过生理科学实验教学,使学生初步掌握动物解剖、动物模型制备等生理学
基本实验方法和技术,掌握实验数据记录、测量、数据统计处理、实验报告撰写
等基本技能。
12.开设实验项目
开设实验项目一览表
实验项目实验实验每组首次开
实验项目名称实验类型
编号性质学时人数出年月
34300101实验动物使用与管理技术验证性必做42201009
34300102生理数据采集与分析技术睑证性必做42201009
34300103动物生理机能实验综合性必做122198803
34300104家兔解剖及形态学观察实验综合性选做42199003
34300105鲤鱼解剖及形态学观察实验综合性选做42199003
34300106反射弧的分析实验综合性选做22199003
34300107挂心灌流观察体液因素对心脏活动综合性选做42199003
的影响
秀丽隐杆线虫(C.elegans)肠道内
34300108综合性选做81201409
细菌繁殖对寿命影响
34300109生理机能虚拟实验(仿真)综合性选做22201409
34300110药物对家兔动脉血压的作用设计性选做21201510
刺激迷走神经对家兔呼吸及心率的
34300111设计性选做21201510
影响
药物对神经-肌肉接头处兴奋传递的
34300112设计性选做21201510
影响
注:设计性实验中,学生可任选其一。
实验动物使用与管理技术。主要内容包括有关实验动物学基础知识;实验动
物质量控制与生物安全以及实验动物的基本操作技术等方面知识和技能。
生理数据采集与分析技术。主要内容包括生理数据采集与分析系统的结构特
点;生理数据采集与分析系统的操作规程及参数设置;生理数据采集与分析系统
的使用注意事项及基本操作技术。
动物机能实验。主栗内容包括呼吸运动调节;心搏的观察、描记及期前收缩
和代偿间歇;坐骨神经-腓肠肌标本的制备及骨骼肌收缩性质的观察;蛙心室细
胞动作电位以及心电与心肌收缩的时相关系;神经干的动作电位;小脑受伤动物
运动功能障碍的观察;大脑皮层运动机能定位;血压调节;去大脑僵直;离体蛙
心灌流的方法及观察内环境变化对离体蛙心功能的影响。
家兔解剖及形态学观察实验。主要内容包括家兔的外形观察和内部解剖。
鲤鱼解剖及形态学观察实验。主要内容包括鲤鱼的外形观察和内部解剖。
反射弧的分析。主要内容包括反射弧完整性观察;反射弧的完整性与反射活
动的关系等。
蛙心灌流观察体液因素对心脏活动的影响。主要内容包括离体蛙心制备;仪
器装置及调试;描记正常蛙心收缩曲线;观察条件改变蛙心收缩曲线的变化(离
子的影响、递质的作用、温度的影响、酸碱的影响)。
秀丽隐杆线虫(C.elegans)肠道内细菌繁殖对寿命影响。主要内容包括以
绿色荧光蛋白为报告物,通过对C.elegans喂食不同的食物,在显微镜下观察其
肠道前后部细菌增殖情况,研究C.elegans的寿命与肠道感染之间的关系。
生理机能虚拟实验(仿真)。主要内容包括刺激强度与肌肉收缩的反应关系;
刺激频率与肌肉收缩之间的关系;神经干动作电位的引导实验;神经兴奋传输速
度的测定;神经干不应期的测定;减压神经放电;膈神经放电;大脑皮层诱发点
位;离体蛙心灌流;期前收缩与代偿间歇;心肌细胞动作电位;家兔血压调节;
家兔呼吸运动调节;尿生成的影响因素;消化道平滑肌生理特性:家兔呼吸运动
调节;影响尿生成的因素及利尿药物;神经体液因素及药物对心血管活动的影响。
药物对家兔动脉血压的作用。主要内容包括设计不同的药物,如黄苓、蟾酥、
去甲肾上腺素、乙酰胆碱等作用于家兔,检测不同剂量的药物对家兔动脉血压的
作用效果,筛选并设计最佳的药物及使用剂量。
刺激迷走神经对家兔呼吸及心率的影响。主要内容包括学生根据生理实验课
所学实验操作技能和基本知识,自主设计实验方法处理迷走神经,观察家兔呼吸
及心率的变化影响。
药物对神经-肌肉接头处兴奋传递的影响。主要内容包括自主设计选用不同
药物(如乙酰胆碱,肉毒素等),观察不同药物对神经肌肉兴奋传递的影响。
13.实验教材或指导书或主要参考资料
1)滕利荣等,生物学基础实验教程I(第三版),科学出版社,2008年
2)王玲等,人体及动物生理学(第二版),高等教育出版社,2001年
3)陈守良,动物生理学(第二版),北京大学出版社,2005年
4)张镜如等,生理学(第四版),人民卫生出版社,1995年
14.考核要求、考核方式及成绩评定标准
14.1考核栗求:以培养学生的科学态度、科学思维和实验操作能力为前提,
注重训练学生的独立动手能力、思考能力,发现问题、分析问题和解决问题的能
力,实验设计能力及创新能力,教师应及时、客观、公正、如实评价每名学生实
验情况及评阅试卷、实验报告和设计实验。
14.2考核方式:采取考核与考试结合的方式综合评定实验成绩,按百分制
方式计分。
14.3成绩评定标准:根据生物基础实验教学中心制定的《学生实验成绩考
评方法》进行评定。实验习惯成绩,10%;预习考试成绩,10%;实验操作成绩,
40%:实验报告成绩,20%;设计实验成绩,20%o
15.执笔人
李婉南副教授
关树文副教授
韩璐讲师
16.制定日期
20131016
17.审核人
陈霞教授
18.审核日期
20131022
19.学院审定程序说明
2013年10月10日接到学校通知后成立《生命科学学院实践教学大纲(2013
版)》修订专项工作组并进行前期筹备工作。2013年10月14日至2013年10月
16日各门课程梯队召开《生命科学学院实践教学大纲(2013版)》修订工作会议,
分配修订任务。2013年10月21日前各门课程梯队提交《生命科学学院实践教
学大纲(2013版)》修订稿。2013年10月25日生命科学学院教学委员会召开第
一次会议审议《生命科学学院实践教学大纲(2013版)》修订稿并提出整改意见。
2013年10月26日至10月28日各门课程梯队按照“整改意见”进行整改。2013
年10月30日生命科学学院教学委员会召开第二次会议审定通过《生命科学学院
实践教学大纲(2013版)》。
20.学院审定日期
20131130
生物化学实验I(343002)教学大纲
01.教学单位名称:生命科学学院
02.实验中心名称:吉林大学国家级生物实验教学示范中心
03.课程名称:生物化学实验I
04.课程代码:343002
05.课程类别:学科基础课程
06.课程性质:必修
07.课程学时:64
08.课程学分:2
09.面向专业:生物科学、生物技术、药物制剂、制药工程、唐敖庆班
10.实验课程的教学任务、要求和教学目的
10.1教学任务
生物化学是研究生命的化学,是生物学科的重要专业基础课,生物化学实验
在整个生物化学教学中占有十分重要的地位。通过实验课程教学,使学生了解和
掌握生物化学实验的基本方法和技术,了解生物大分子(蛋白质、糖、核酸等)
的分离、制备、纯化、分析和鉴定等技术,具备初步的知识应用和科学研究能力。
10.2教学要求
从培养学生综合实验技能的角度考虑,将本实验设定成综合性大实验,由于
涉及的学科知识比较广泛,所需实验仪器比较复杂,实验时间较长,处理因素多,
因此课前充分的准备工作是实验顺利进行和获得真实实验结果的重要保证。这就
要求学生在课前必须按照实验预习要求认真预习和准备,实验过程中认真掌握所
需仪器的使用、所需实验技术的操作原理和方法。在实验过程当中应遵守实验室
规章制度,有序进行实验,严格按照规定程序操作,全面观察,准确如实记录实
验数据。实验结束后,做好善后工作,清洁整理实验器具并清点归还,经指导教
师检查无误后方可离开实验室;及时整理实验记录和数据,按要求认真独立完成
实验报告,并按时提交;积极参加课后讨论。
10.3教学目的
生物化学实验技术作为生命科学研究的主要方法和技术,为其它学科的学习
打下坚实基础,同时在生命科学研究和生产实践方面也有较大的应用价值。为此,
加强综合型实验的比例,减少了一般型(验证型)实验,按常规生化仪器的使用、
生物活性物质的测定、生物大分子分离制备技术、层析技术、电泳技术、分光光
度技术和生化分析技术等几大系列进行优化和整合,使学生掌握组织制备、离心、
层析、电泳和分光光度法等基本生化技术,掌握氨基酸、蛋白质、核酸、酶、定
量分析及分离提纯方法。强化学生基本实验技能的训练,强化综合能力的培养。
通过生物化学实验,使学生熟练掌握所需仪器的使用、所需实验技术的操作原理
和方法,锻炼学生的动手能力和分析问题解决问题的能力,培养学生合作精神,
有利于对学生实践能力、综合素质和创新能力的培养。
11.学生应掌握的实验技术及实验能力
通过本课程的学习,使学生进一步了解生物化学实验的基本原理,掌握生物
化学实验的基本技能和方法,使学生熟练掌握掌握酶的分离、制备、纯化、分析
鉴定方法;通过蛋白质的提取、含量测定及氨基酸组成分析,掌握蛋白质分级、
透析等技术;掌握Folin一酚法测蛋白浓度和柱层析(离子交换层析和分子筛层
析)法纯化蛋白质等技术;掌握蛋白电泳技术;学会相关仪器设备的操作,培养
学生动手能力和科学的思维能力,提高学生的创新意识、合作精神和解决实际问
题的能力。培养学生学会正确地观察实验现象、记录实验结果、分析实验数据、
撰写实验报告的能力。在提高学生动手能力的同时,培养学生具有初步解决问题
的能力。
12.开设实验项目
开设实验项目一览表
验
实验
每
实验项目实验实首次开
学时
人
实验项目名称性质
编号类型出年月
啤酒酵母蔗糖晦的提取、分离纯化、性
34300201综合性必做512200603
质鉴定及反应动力学
34300202亲和层析法纯化胰蛋白酶综合性选做82199903
34300203酶谱分析技术分析纤维素酶综合性选做82200303
34300204大豆蛋白的提取与含量测定综合性选做82201003
DNS-C1法测定蛋白质及肽的
34300205综合性选做82200503
N末端氨基酸
34300206细胞色素C的制备及测定综合性选做82200903
34300207氯化钠的称量和乙醇的移取验证性必做11201204
34300208发酵液的离心分离验证性必做11201204
34300209铝酸钾溶液吸光度的测定验证性必做11201204
34300210DEAE52纤维素离子交换柱的制备验证性选做32201204
34300211G75葡聚糖凝胶柱的制备验证性选做32201204
34300212SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备验证性选做22201204
34300213常用试剂及溶液(缓冲液)的配制验证性选做11201204
34300214电泳凝胶的条带分析验证性选做14201204
34300215测定未知辂酸钾溶液的溶度验证性选做11201204
34300216高效液相法测定中药中有效成分的含量验证性选做24201204
34300217气相色谱法测定中药活性成分的含量验证性选做24201204
34300218红外光谱分析化合物的组成结构验证性选做24201204
34300219酶与辅酶的纯化与鉴定设计性选做21201303
34300220蛋白质类的纯化与鉴定设计性选做21201303
注:设计性实验项目中,学生可以任选其一。
啤酒酵母蔗糖酶的提取、分离纯化、性质鉴定及反应动力学。主要实验内容
包括啤酒酵母蔗糖酶的提取及分离纯化,考马斯亮蓝法测定蛋白浓度,紫外分光
光度法测定蛋白浓度,蔗糖酶活力测定,SDS-PAGE电泳法测定蔗糖酶纯度和相
对分子质量,用正交试验法测定几种因素对蔗糖酶活性的影响,蔗糖酶米氏常数
(、最大反应速度V皿和抑制剂常数小的测定,测定并计算不同底物浓度时的反
应速率,反应速率对底物浓度作图,再用7/V对7/6作图,计算出
亲和层析法纯化胰蛋白酶。主要实验内容为从猪胰脏的粗提液中分离纯化胰
蛋白酶。采用鸡卵类黏蛋白作为配基合成亲和吸附剂,从猪胰脏的粗提液中,通
过亲和层析直接获得纯度很高的猪胰蛋白酶。
酶谱分析技术分析纤维素酶。酶谱技术是把纤维素酶的底物与丙烯酰胺共凝
聚,经过SDS电泳或者非变性PAGE电泳后,将凝胶放于酶作用的缓冲液之
中,通过酶对凝胶中底物的催化反应,从而检测出样品中的酶的催化作用,酶系、
同工酶的分布、相对分子质量、亚基的数量等技术指标。
大豆蛋白的提取与含量测定。主要实验内容为对大豆粉进行水、碱两步提取;
分别采用Folin-酚法、微量凯氏定氮法、双缩腺法测定两步提取液提取的蛋白
浓度;双向纸层析法分析大豆蛋白的氨基酸组成。
DNS-CI法测定蛋白质及肽的N末端氨基酸。主要实验内容为水解氨基酸,
采用荧光试剂二甲氨基蔡磺酰氯(DNS—CI)在碱性条件下与氨基酸(肽或蛋白质)
的氨基结合成带有荧光的DNS一氨基酸(DNS一肽或DNS—蛋白质),DNS一肽或
DNS一蛋白质进行测定。采用聚酰胺薄膜层析法进行分离和鉴定后,进行定性及
定量测定,识别蛋白质的自由N末端氨基酸。
细胞色素C的制备及测定。主要实验内容为以新鲜猪心为原料,经过酸溶液
抽取,人造沸石吸附及三氯乙酸沉淀得到细胞色素C粗品,然后再用离子交换层
析法将粗品纯化。采用分光光度法测定细胞色素C含量,用测压法测定其生物活
性。
氯化钠的称量和乙醇的移取。主要内容为学习并了解称量和微量移液技术的
基本原理,掌握相关仪器设备的使用方法,掌握固体称量与液体量取的要点和方
法。
发酵液的离心分离。主要内容为学习并了解离心技术的基本原理,掌握相关
仪器设备的使用方法,学会液体离心的注意事项和操作方法。
络酸钾溶液吸光度的测定。主要内容为学习并了解光谱技术(Uvmini-1240
紫外可见分光光度计)的基本原理,掌握相关仪器设备的使用方法,学会测定样
品吸光度的操作方法。
DEAE52纤维素离子交换柱的制备。主要内容为学习并了解离子交换层析技
术的基本原理,掌握相关仪器设备的使用方法,掌握如何制备DEAE52纤维素离
子交换柱。
G75葡聚糖凝胶柱的制备。主要内容为学习并了解凝胶过滤层析技术的基本
原理,掌握相关仪器设备的使用方法,掌握如何制备G75葡聚糖凝胶柱。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备。主栗内容为学习并了解SDS-聚丙烯酰胺凝胶
电泳技术的基本原理,掌握相关仪器设备的使用方法,学会制备SDS-聚丙烯酰
胺凝胶。
常用试剂及溶液(缓冲液)的配制。主要内容为学习并了解常用试剂及溶液
(缓冲液)的配制方法,能够熟练配置各种试剂。
电泳凝胶的条带分析。主要内容为学习并了解凝胶成像技术的基本原理,掌
握相关仪器设备的使用方法,学会对电泳凝胶进行分析。
测定未知格酸钾溶液的溶度。主要内容为学习并掌握标准曲线制作技术,掌
握未知浓度样品的测定方法。
高效液相法测定中药中有效成分的含量。主要内容为学习并了解高效液相色
谱技术的基本原理,掌握相关仪器设备的使用方法,学会测定中药有效成分含量
的方法。
气相色谱法测定中药活性成分的含量。主要内容为学习并了解气相色谱技术
的基本原理,掌握相关仪器设备的使用方法,学会测定中药活性成分含量的方法。
红外光谱分析化合物的组成结构。主要内容为学习并了解红外光谱技术的基
本原理,掌握相关仪器设备的使用方法,掌握通过红外谱图分析化合物的结构。
酶与辅酶的纯化与鉴定。主要内容为通过利用已学过的理论、方法(含查资
料获得的新知识),以动植物组织、发酵菌体等为原料,分离纯化酶与辅酶,并
进行性质鉴定。
蛋白质类的纯化与鉴定。主要内容为结合已学过的知识,根据蛋白质的酸碱
性质、分子大小与形状、溶解性质及其与配体亲和性等特性,分离纯化某一特定
蛋白质,并对其性质进行分析鉴定。
13.实验教材或指导书或主要参考资料
1)滕利荣等,生物学基础实验教程II(第三版),科学出版社,2008年
2)滕利荣等,生命科学仪器实用技术教程,科学出版社,2008年
3)周俊宜等,分子生物学基本技能与策略,科学出版社,2003年
4)王镜岩等,生物化学(第三版),高等教育出版社,2003年
5)朱厚础等译,蛋白质纯化与鉴定实验指南,科学出版社,1999年
6)张龙翔等,生化实验方法和技术,高等教育出版社,1997年
7)汪家政等,蛋白质技术手册,科学出版社,2000年
14.考核要求、考核方式及成绩评定标准
14.1考核栗求:以培养学生的科学态度、科学思维和实验操作能力为前提,
注重训练学生的独立动手能力、思考能力,发现问题、分析问题和解决问题的能
力,实验设计能力及创新能力,教师应及时、客观、公正、如实评价每名学生实
验情况及评阅试卷、实验报告和设计实验。
14.2考核方式:采取考核与考试相结合的方式综合评定实验成绩,按百分
制方式计分。
14.3成绩评定标准:根据生物基础实验教学中心制定的《学生实验成绩考
评方法》进行评定。实验习惯成绩,10%;预习考试成绩,10%;实验操作成绩,
40%:实验报告成绩,20%;设计实验成绩,20%o
15.执笔人
郑良玉教授
吕绍武副教授
王磊副教授
闫国栋工程师
16.制定日期
20131020
17.审核人
滕利荣教授
18.审核日期
20131120
19.学院审定程序说明
2013年10月10日接到学校通知后成立《生命科学学院实践教学大纲(2013
版)”》修订专项工作组并进行前期筹备工作。2013年10月14日至2013年10
月16日各门课程梯队召开《生命科学学院实践教学大纲(2013版)”》修订工作
会议,分配修订任务。2013年10月21日前各门课程梯队提交《生命科学学院
实践教学大纲(2013版)》修订稿。2013年10月25日生命科学学院教学委员会
召开第一次会议审议《生命科学学院实践教学大纲(2013版)》修订稿并提出整
改意见。2013年10月26日至10月28日各门课程梯队按照“整改意见”进行
整改。2013年10月30日生命科学学院教学委员会召开第二次会议审定通过《生
命科学学院实践教学大纲(2013版)》。
20.学院审定日期
20131130
生物化学实验II(343003)教学大纲
01.教学单位名称:生命科学学院
02.实验中心名称:吉林大学国家级生物实验教学示范中心
03.课程名称:生物化学实验II
04.课程代码:343003
05.课程类别:学科基础课
06.课程性质:必修
07.课程学时:32
08.课程学分:1
09.面向专业:生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、唐敖庆班
10.实验课程的教学任务、要求和教学目的
10.1教学任务
生物化学实验是一门专业基础实验的必修课,本教学大纲是根据生物科学、
生物技术、生物药学、药物制剂等专业人才的培养目标所需要的基本理论和基本
技能的要求制定的。本课程的任务是通过教学过程,使学生掌握常规生物化学实
验的基本技术和方法,培养学生的实际操作能力、分析解决问题的能力、开拓创
新思维的能力、实验设计的思维方法、以及规范书写实验报告等知识。为学生进
一步学习,掌握复杂的综合性的生物化学技术,毕业论文的撰写、从事生物化学
和相关学科的教学、研究与生产奠定基础。
10.2教学要求
通过教学过程加深学生对生物化学基本原理的理解,要求同学熟悉并掌握基
本生化技术,掌握生物大分子的分离纯化、性质表征、代谢调控等相关的实验技
术。在实验过程当中应遵守实验室规章制度,有序进行实验,严格按照规定程序
操作,全面观察,准确如实记录实验数据。实验结束后,做好善后工作,清洁整
理实验器具并清点归还,经指导教师检查无误后方可离开实验室;及时整理实验
记录和数据,按要求认真独立完成实验报告,并按时提交;积极参加课后讨论。
10.3教学目的
使学生了解并掌握生物大分子的分离和纯化的相关知识和技能,为专业课的
学习和专业技能的培训奠定良好的基础,并通过严格的实验要求和管理,培养学
生具有初步的科学实验能力及严格的科研作风,同时验证生化的某些基本理论知
识,加深感性认识。另外,进行一定比例的综合性、设计性实验,将实验理论和
实验技能融为一体,从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合
应用能力;引导学生将所学的知识和技能用于今后的社会实践,培养学生严谨求
实的态度、创新的思维方法及团结合作精神,使学生成为求是、务实、创新的专
门人才。
11.学生应掌握的实验技术及实验能力
11.1熟练掌握以下各项生物化学实验的基本技能
各种常用玻璃仪器的洗涤和使用;湎管、移液管、微量加样器的使用;离
心机、分光光度计、紫外检测系统、层析系统、恒温水浴、梯度发生器、电泳仪
系统、瓦氏呼吸仪等的使用。
11.2掌握以下各项生物化学实验技术
核酸的颜色反应,地衣酚比色分析法测定RNA的含量以及二苯胺比色分析
法测定DNA含量;RF-5301荧光分光光度计的使用,应用荧光法定量测定维生素
B2和维生素C;离子交换柱层析分离pl值具有显著差别的核苔酸;瓦氏呼吸仪
的使用,用该呼吸仪观察柠檬酸、琥珀酸等中间产物对酵母三竣酸循的促进作用;
应用纸层析技术定性鉴定体外氨基转换反应。
12.开设实验项目
开设实验项目一览表
验
实验
每
实
实验项目组首次开
人
性质
学时
实验项
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