福建省晋江市四校2025届高考生物押题试卷含解析

福建省晋江市四校2025届高考生物押题试卷请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（）A．PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物个体B．使用冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型C．在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性D．用胰蛋白酶处理动物组织后，可用无菌水稀释制成细胞悬浮液2．细胞增殖是生物体内一项重要的生命活动。下图是某高等植物细胞有丝分裂周期图，请据图分析下列说法不正确的是A．DNA数目加倍发生在A中的2时期B．细胞周期中，染色体数目加倍发生在G时期C．在H时期用秋水仙素处理，会出现C过程D．在2时期用射线处理可诱发基因突变3．下列有关国槐和月季的叙述中，不合理的是（）A．分生区细胞分裂时形成纺锤体B．原生质层不含色素的细胞为无色细胞C．花瓣细胞的细胞质基质中分解葡萄糖D．除叶肉细胞以外，其他细胞的生物膜上也可以合成ATP4．“三分法”是一种常见的概念划分方法，可用如图所示表示某些概念之间的相互关系。下列对此叙述，正确的是()A．若A表示免疫系统的构成，骨髓属于B，吞噬细胞属于C，溶菌酶属于DB．若A表示物种形成的三个基本环节，B是基因突变，C是自然选择，D是生殖隔离C．若A表示保护生物多样性的措施，B是保护基因，C是保护物种，D是保护生态系统D．若A表示物质跨膜运输方式,则B表示被动运输，C表示主动运输，D表示胞吞胞吐作用5．某课外小组用传感器测定了不同条件下250ml有鱼和无鱼池塘水的溶解氧变化，获得如下数据。下列说法正确的是编号12345条件26℃光照26℃黑暗26℃光照10℃光照10℃黑暗材料池水池水池水+鱼池水池水+鱼2小时后的溶解氧变化（μg）0.378-0.065-0.758-0.03-0.215A．1号瓶池水中藻类光合作用产生的氧气量为0.378μgB．4号瓶池水中藻类不能进行光合作用C．26℃条件下鱼呼吸作用消耗的氧气量为1.136μgD．池水中藻类光合作用的最适温度为26℃6．2019年诺贝尔生理学或医学奖获得者发现了一种蛋白质——缺氧诱导因子（HIF）在细胞感知和适应氧气供应中的作用。当体内氧含量正常时，细胞中几乎不含HIF；当氧含量减少时，HIF的含量增多。HIF能促进肾脏细胞中促红细胞生成素基因的表达，从而促进红细胞的生成。下列关于细胞感知和适应氧气含量变化机制的叙述错误的是（）A．从进化的角度看是长期自然选择的结果B．从基因表达来看是氧气含量变化调控基因选择性表达，导致细胞中HIF的含量变化C．从细胞内信息传递来看是一系列信号分子进行信号转导调节细胞生理生化的过程D．从组织器官或个体水平来看使人体不仅能适应剧烈运动、胎儿生长发育、癌变组织等代谢旺盛需氧多的情况，还能适应高海拔地区活动、慢性肾衰竭引起的贫血等缺氧情况7．下表中人体不同细胞的寿命和分裂能力不同，以下说法错误的是（）细胞种类小肠上皮细胞癌细胞红细胞白细胞寿命1〜2天不死性120天5〜7天能否分裂能能不能大多数不能A．白细胞的凋亡比红细胞快，这与白细胞吞噬病原体有关B．癌细胞的无限增殖是由正常基因突变为原癌基因引起的C．通常情况下，细胞的分化程度越高，细胞分裂能力越弱D．小肠上皮细胞寿命最短，这与基因控制的凋亡有关8．（10分）研究发现，在线粒体内膜两侧存在H+浓度差。H+顺浓度梯度经ATP合成酶转移至线粒体基质的同时，驱动ATP的合成（如下图）。根据图示得出的下列结论中，错误的是A．ATP合成酶中存在跨膜的H+通道 B．H+可直接穿过内膜磷脂双分子层C．此过程发生在有氧呼吸第三阶段 D．线粒体的内、外膜功能存在差异二、非选择题9．（10分）蛛丝蛋白纤维是目前已知的最坚韧的天然纤维之一，又被称为“生物钢”。为了提高羊毛纤维的拉伸强度，科学家将蜘蛛牵丝蛋白基因整合到羊胎儿成纤维细胞，并用此细胞作为核供体，结合核移植技术，成功获得了能合成蛛丝蛋白的转基因细毛羊。回答下列问题。（1）检测蜘蛛牵丝蛋白基因是否成功导入到羊胎儿成纤维细胞，一般采用的方法是_______，可使用_______作为探针对目的基因检测。（2）将转基因成功的羊胎儿成纤维细胞作为核供体细胞，在对其进行体外培养时，传代一般都控制在10代以内，原因是_______。（3）用细毛羊卵母细胞作为核移植的受体，在核移植之前必须先对卵母细胞进行的操作有_______。（4）为检测出生小羊是否成功表达牵丝蛋白基因，可采用的方法有_______（填序号）。①DNA测序②染色体倍性分析③体细胞结构分析④抗原-抗体杂交⑤对羊毛纤维进行拉伸度测试（5）为了提高已有重组胚胎的利用率，可采用_______技术，但此技术产生同卵多胚的数量是有限的，从后代数量的角度分析，采用羊胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆的优势在于_______。10．（14分）如图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。回答下列问题：（1）进行过程I的前提是要根据干扰素基因的____________设计引物。（2）过程I需加热至90~95℃，然后冷却至55~60℃，如此操作的目的是____________。据图可知欲获得干扰素基因，至少需要复制____________次。（3）图中A的名称是___________，A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为___________。（4）为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录，可用_____________作探针，与从细胞中提取的____________进行分子杂交。11．（14分）用等体积的三个玻璃瓶甲、乙、丙，同时从某池塘水深0.2m处的同一位置取满水样，立即测定甲瓶中的氧气含量，并将乙、丙瓶密封后放回原处。一昼夜后取出玻璃瓶，分别测定两瓶中的氧气含量，结果如下（不考虑化能合成作用），回答下列问题。透光玻璃瓶甲透光玻璃瓶乙不透光玻璃瓶丙1．9mg2．6mg3．8mg（1）丙瓶中浮游植物的叶肉细胞产生[H]的场所是___________。（2）在甲、乙、丙瓶中生产者呼吸作用相同且瓶中只有生产者的条件下，一昼夜后，生产者呼吸消耗的氧气量为_____mg。乙瓶和丙瓶中氧气含量的差值可表示_______。（3）一昼夜后，丙瓶水样的pH值低于乙瓶，其原因是_______。12．真核生物基因中通常含有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。下图表示从基因文库提取胰岛素基因的过程。回答下列问题：（1）从基因结构分析，与基因组文库中的基因相比，cDNA文库中获得的目的基因少了________等结构（至少写两个）。基因文库中cDNA文库与基因组文库相比，前者较小，原因是______。（2）将获得的胰岛素基因导入受体菌内，并在受体菌内维持稳定和表达的过程，在基因工程中称为______。（3）过程⑤需将纤维素膜上的细菌裂解，释放出__________，再用32P标记的__________作为探针进行杂交。依据杂交结果，应选取培养基上____（填字母）菌落继续培养，才能获得含有胰岛素基因的受体菌。（4）经过目的基因的检测和表达，从大肠杆菌中获得的“胰岛素”未能达到期待的生物活性，导致这种差异的原因可能是__________。（5）与从基因组文库获取目的基因相比，图示方法获得的目的基因在受体菌中更容易表达，原因是_____。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【解析】

本题主要动物细胞的组织培养及细胞融合。细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成个体的潜能。动物细胞的培育过程是用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织细胞一段时间，使组织分散成单个细胞，再用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液进行培养，由于动物细胞结构和功能复杂，目前仅证实动物细胞核具有全能性，动物体细胞的全能性还有待技术发展。【详解】目前为止，人们还没有成功将单个分化的动物体细胞培养成个体，动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂种细胞不能培育成动物，A错误；目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型，B正确；基因突变是碱基对增添、缺失或替换，碱基对的改变在光学显微镜下无法观察到，C错误；用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织会使组织就会分散成单个细胞，再用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，而不是无菌水，D错误。故选B。【点睛】注意在光学显微镜，能看到染色体变异，不能看到基因突变；动物细胞培养应用培养稀释单个细胞。熟记相关知识点，注意动物细胞全能性等是解决本题的关键。2、C【解析】试题分析：图中A是间期，2是S期，是DNA复制的时期，A正确；B是分裂期，G是后期，着丝点分裂导致染色体数目加倍，B正确；E是分裂前期，若用秋水仙素处理，会抑制纺锤体的形成，形成多倍体细胞或多核细胞，C错误；DNA复制时结构不稳定，若用射线处理可诱发基因突变，D正确。考点：本题考查有丝分裂的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。3、B【解析】

各种细胞器的结构、功能细胞器分布形态结构功

能线粒体动植物细胞双层膜结构有氧呼吸的主要场所

细胞的“动力车间”叶绿体植物叶肉细胞

双层膜结构植物细胞进行光合作用的场所；植物细胞的“养料制造车间”和“能量转换站”。内质网动植物细胞

单层膜形成的网状结构细胞内蛋白质的合成和加工，以及脂质合成的“车间”高尔

基体动植物细胞

单层膜构成的囊状结构对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装的“车间”及“发送站”（动物细胞高尔基体与分泌有关；植物则参与细胞壁形成）核糖体动植物细胞无膜结构，有的附着在内质网上，有的游离在细胞质中合成蛋白质的场所

“生产蛋白质的机器”溶酶体动植物细胞

单层膜形成的泡状结构“消化车间”，内含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并且杀死侵入细胞的病毒和细菌。液泡成熟植物细胞单层膜形成的泡状结构；内含细胞液（有机酸、糖类、无机盐、色素和蛋白质等）调节植物细胞内的环境，充盈的液泡使植物细胞保持坚挺中心体动物或某些低等植物细胞无膜结构；由两个互相垂直的中心粒及其周围物质组成与细胞的有丝分裂有关【详解】A、分生区细胞分裂时，细胞两极发出纺锤丝形成纺锤体，A正确；

B、原生质层是指细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质，原生质层不含色素的细胞不一定为无色细胞，如洋葱鳞片叶有紫色的大液泡，液泡中含色素，B错误；

C、花瓣细胞的细胞质基质中分解葡萄糖，形成丙酮酸，C正确；

D、除叶肉细胞以外，其他细胞如根尖分生区的线粒体内膜上也可以通过有氧呼吸合成ATP，D正确。

故选B。4、A【解析】

1、免疫系统的组成：免疫器官：脾脏、胸腺、骨髓、扁桃体等；免疫细胞：吞噬细胞、淋巴细胞（T、B）；免疫活性物质：抗体、细胞因子和补体。2、突变和基因重组、自然选择及隔离是物种形成过程的三个基本环节，通过它们的综合作用，种群产生分化，最终导致新物种的形成。3、小分子物质的跨膜运输方式包括自由扩散、协助扩散和主动运输，大分子物质的进出细胞的方式为胞吞和胞吐。【详解】A、免疫系统包括免疫器官、免疫细胞和免疫活性物质，吞噬细胞属于免疫细胞，溶菌酶属于免疫活性物质，骨髓属于免疫器官，A正确；B、物种形成的三个基本环节是突变和基因重组、自然选择和隔离，B错误；C、保护生物多样性的措施包括就地保护、迁地保护和加强法律法规意识，C错误；D、物质的跨膜运输方式包括自由扩散、协助扩散和主动运输，不包含胞吞和胞吐作用，D错误。故选A。5、C【解析】

26℃黑暗和10℃黑暗溶氧量的变化表示呼吸消耗量；26℃光照和10℃光照下氧气的变化量表示氧气的释放量。【详解】1号瓶池水中藻类光合作用产生的氧气量为0.378μg+0.065μg=0.443μg，A错误；4号瓶有光照，池水中藻类可以进行光合作用，B错误；26℃条件下鱼呼吸作用消耗的氧气量为0.378μg+0.758μg=1.136μg，C正确；题目中只有10度和26度，无法确定池水中藻类光合作用的最适温度，D错误。故选C。6、D【解析】

根据题干信息，当氧含量减少时，HIF的含量增多，HIF能促进肾脏细胞中促红细胞生成素基因的表达，从而促进造血干细胞形成红细胞，缓解缺氧症状。【详解】A、根据题干信息，当体内氧含量正常时，细胞中几乎不含HIF；当氧含量减少时，HIF的含量增多，HIF能促进肾脏细胞中促红细胞生成素基因的表达，从而促进造血干细胞形成红细胞，缓解缺氧症状，这体现了生物对环境的适应性，是长期自然选择的结果，A正确；B、根据题干信息“当体内氧含量正常时，细胞中几乎不含HIF；当氧含量减少时，HIF的含量增多”，说明体内氧含量的变化是影响缺氧诱导因子基因表达的关键因素，B正确；C、根据题干信息，“当体内氧含量正常时，细胞中几乎不含HIF；当氧含量减少时，HIF的含量增多，HIF能促进肾脏细胞中促红细胞生成素基因的表达，从而促进造血干细胞形成红细胞，缓解缺氧症状。”从细胞内信息传递来看是一系列信号分子进行信号转导调节细胞生理生化的过程，C正确；D、根据题干信息，HIF能促进肾脏细胞中促红细胞生成素基因的表达，从而促进红细胞的生成，缓解缺氧症状。因此对于慢性肾衰竭引起的贫血缺氧情况无缓解效果，D错误。故选D。7、B【解析】

细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，实质是基因的选择性表达，最终形成形态和功能不同的组织和细胞。【详解】A、白细胞没有细胞核，功能主要是吞噬病原体，因此更新速度快，A正确；B、癌细胞的无限增殖是由于原癌基因突变为癌基因，以及抑癌基因突变失去功能导致的，B错误；C、通常情况下，细胞的分化程度越高，其全能性就越低，细胞分裂能力就越弱，C正确；D、人体不同组织的细胞寿命不同，是由遗传物质决定，与基因控制的衰老和凋亡有关，D正确。故选B。【点睛】原癌基因主要负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的进程；抑癌基因主要阻止细胞不正常的增殖。细胞癌变的内因是原癌基因和抑癌基因发生突变，导致正常细胞的生长和分裂失控，使得正常细胞变成不受控制、恶性增殖的癌细胞。8、B【解析】

分析题图可知：线粒体内膜的外侧H+浓度高于内侧，H+顺浓度梯度经ATP合成酶转移至线粒体基质，同时ADP合成ATP。而线粒体内膜上进行的生理过程是有氧呼吸的第三阶段。【详解】A、分析题图可知，ATP合成酶中存在跨膜的H+通道，A正确；B、H+顺浓度梯度的跨膜运输属于协助扩散，需要跨膜的H+通道协助，不能直接穿过内膜磷脂双分子层，B错误；C、有氧呼吸第三阶段是[H]与O2反应生成水，并伴随大量能量的释放，其中有一部分能量用于合成ATP，可知图示过程发生在有氧呼吸第三阶段，C正确；D、线粒体的内、外膜上蛋白质的种类和含量不同，所以功能存在差异，D正确。故选B。二、非选择题9、DNA分子杂交放射性同位素标记（或荧光标记）的蛛丝蛋白基因10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型培养至减数第二次分裂中期，去核④⑤胚胎分割可以获得大量遗传物质相同的后代【解析】

1、基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。（1）基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体（常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒）。（2）基因工程四步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。（3）将目的基因导入受体细胞：①将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；②将目的基因导入动物细胞的方法：显微注射技术；③将目的基因导人微生物细胞的方法：用Ca2+处理细胞→感受态细胞。（4）目的基因的检测与鉴定：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原−抗体杂交技术。2、动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物，克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞。核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，因为体细胞的全能性低于胚胎细胞。3、对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发展。【详解】（1）检测蜘蛛牵丝蛋白基因是否成功导入到羊胎儿成纤维细胞，可采用DNA分子杂交技术检测，其原理是碱基互补配对。所用探针为放射性同位素标记（或荧光标记）的蜘蛛牵丝蛋白基因对目的基因进行分子水平上的检测。（2）供体细胞采用的是羊胎儿成纤维细胞，而不是成年个体成纤维细胞的原因是胎儿成纤维细胞分裂次数少。用于核移植的供体细胞，一般都选用传代10代以内的细胞，原因是该种细胞代谢旺盛、分裂能力强，且遗传物质没有发生改变，能保持正常的二倍体核型。（3）核移植的受体细胞常选用去核卵母细胞的原因：卵母细胞大，容易操作；卵母细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。核移植的受体应选用处于MⅡ中期的卵母细胞。在核移植之前，需将卵母细胞培养至减数第二次分裂中期，去掉卵母细胞的细胞核，目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞。（4）目的基因是否表达出相应的蛋白质，除了通过检测羊毛纤维的拉伸强度来确定外，还可以通过抗原−抗体杂交技术反应来判断，故选④⑤。（5）为了提高重组胚胎的利用率，可采用胚胎分割移植技术。用于分割的胚胎应是桑椹胚或囊胚阶段的胚胎。采用胎儿成纤维进行转基因体细胞克隆，属于无性生殖，因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养，从数量上看可以获得大量遗传物质相同的后代。【点睛】解答本题的关键是掌握转基因技术、核移植技术、胚胎移植等过程，能够弄清楚题图中供体、受体的选择和特征，明确核移植时的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期，并能够选择正确的方法检测目的基因是否表达。10、核苷酸序列使DNA解链，然后使引物结合到互补DNA链上3重组质粒启动子放射性同位素、生物素或荧光染料等标记的干扰素（目的）基因mRNA【解析】

1.基因工程的基本操作程序：第一步：目的基因的获取；第二步：基因表达载体的构建；第三步：将目的基因导入受体细胞；第四步：目的基因的检测和表达。2.PCR的过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。3.题图分析：Ⅰ是利用PCR技术扩增目的基因，Ⅱ是构建基因表达载体，Ⅲ是将重组质粒导入到酵母菌细胞中。【详解】（1）PCR的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物，因此进行过程Ⅰ的前提是要根据干扰素基因的核苷酸序列设计引物。（2）PCR过程中需加热至90〜95℃，然后冷却至55〜60℃，如此操作的目的是使DNA解旋，然后使引物结合到互补DNA链上。根据PCR复制的特点，结合图示可知，图示中干扰素基因的两条链应是第二次复制才能形成的子链，所以至少需要复制三次才能形成图中的干扰素基因。（3）图中A是干扰素基因和质粒连接形成的重组质粒（基因表达载体），A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为启动子。（4）基因转录的产物为mRNA，由于转录过程中遵循碱基互补配对原则，所以为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录，可用放射性同位素、生物素或荧光染料等标记的干扰素（目的）基因作探针，与从细胞中提取的mRNA进行分子杂交。【点睛】本题结合利用转基因技术生产干扰素的简化流程，考查基因工程的技术及原理、应用，要求考生识记基因工程的原理及技术，能准确判断图中各过程的名称，能运用所学的知识结合图中信息准确判断各题。11、细胞质基质和线粒体基质1.1总光合作用产生的氧气含量乙瓶中的总光合速率大于呼吸速率，CO2浓度降低；而丙瓶中只进行呼吸作用，CO2浓度升高；丙瓶中的CO2浓度高于乙瓶【解析】

该实验中甲为对照组，乙和丙为实验组。本实验中甲瓶氧气含量－丙瓶氧气含量＝1.1mg，可表示一昼夜丙瓶中生物细胞呼吸消耗氧气量；乙瓶氧气含量－甲瓶氧气含量＝0.7mg，可表示一昼夜乙瓶中生物净光合释放的氧气量；乙瓶中生产者实际光合作用产生的氧气量为1.1＋0.7＝1.8mg。【详解】（1）丙瓶不透光，浮游植物的叶肉细胞只进行呼吸作用，有氧呼吸的第一阶段和第二阶段均产生[H]，场所分别为细胞质基质和线粒体基质。（2）在甲、乙、丙瓶中生产者呼吸作用相同且瓶中只有生产者的条件下，一昼夜后，生产者呼吸消耗的氧气量为甲瓶中的氧气含量与丙瓶氧气量的差值1.1mg。乙瓶和丙瓶中氧气含量的差值表示为=净光合量+呼吸消耗量=总光合作用产生氧气的量。（3）由表中数据分析可知，在一昼夜中，乙瓶植物总光合作用速率大于呼吸速率，CO2浓度降低，pH值上升；丙瓶植物只进行呼吸作用释放CO2，pH值降低，故丙瓶中的pH低于乙瓶。【点睛】本题利用一组对照实验考查了光合作用和呼吸作用的相关知识，意在考查理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。12、启动子、终止子、内含子cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的，在这个时期并不是每个基因都进行转录，而基因组文库包含该生物所有的基因转化DNA目的基因（或胰岛素基因）a受体菌中基因表达获得的蛋白质未加工（或大肠杆菌中没有内质网、高尔基体等细胞器，无法对核糖体合成的肽链进行有效的折叠、加工）cDNA中不含有内含子，转录出的RNA不需要经过加工，可直接作为合成蛋白质的模板【解析】

1.基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止