TBPMA 20-2024 蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67.050CCSX04BPMA北 京 预 防 医 学 会 团 体 标 准T/BPMA20—2024蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留量的测定液相色谱-串联质谱法Determinationofchloramphenicolandmetronidazoleresiduesinhoneybyliquidchromatography-tandemmassspectrometrymethod2024-04-23发布 2024-04-23实施北京预防医学会 发布T/BPMA20—2024T/BPMA20—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前 言 II范围 1规性用件 1术和义 1原理 1试和料 1仪设备 2试的备 2测步骤 2结计算 3法测灵度确度精度 4附录 A （料）甲硝、霉及标中英通名、学子和CAS号 5附录 B （料）标准液空基加样品甲唑氯素特征子量谱图 6前 言本文件按GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第部分：标准化文件的和起草规则》的起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由北京市通州区疾病预防控制中心提出。本文件由北京预防医学会归口。T/BPMA20—2024T/BPMA20—2024PAGEPAGE2蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留量的测定液相色谱-串联质谱法范围本文件描述了蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留量的液相色谱-串联质谱测定的方法。本文件适用于蜂蜜中氯霉素和甲硝唑残留量的测定。（GB/T6682GB/T27404本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样用乙腈提取后经C18-氨基复合固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱法检测，内标法定量。GB/T6682乙腈-水溶液（1：9，V/V）。5mmol/L乙酸铵溶液：准确称取0.385g乙酸铵，用水溶解并稀释至1L。氯霉素、甲硝唑、氯霉素-D5、甲硝唑-D4标准品，纯度≥98%，具体见附录A。或经国家认证并授予标准物质证书的一定浓度的标准溶液。100mg/L的氯霉0℃~56-D5-D4100mg/L的氯霉素-D5的内标储备液和甲硝唑-D4内标储备液。0℃~5℃保存，有效期6个月。1.00mg/L100mg/L100mg/L0.50mL50mL1.00mg/L0℃~51.00mg/L100mg/L-D5100mg/L唑-D40.50mL50mL1.00mg/L0℃~5℃保3100μg/L1.00mg/L5.00mL50mL容量瓶中，100μg/L100μg/L1.00mg/L5.00mL50mL容量瓶中，100μg/L混合标准系列溶液：分别准确吸取一定量的混合标准使用液和混合内标使用液，用乙腈0.20.51.0μg/L2.05.0μg/L10.0、20.0μg/L、50.0μg/L的混合标准系列溶液，混合内标浓度为2.0μg/L。临用现配。有机相微孔滤膜：0.22μm。C18-氨基复合固相萃取柱，1.75g/12mL，或相当者。液相色谱-三重四极杆质谱仪：配有电喷雾离子源。分析天平：感量0.01mg和0.01g。（C18，100mm，1.7μm）冷冻离心机：转速10000r/min。按照GB/T27404实验室质量控制规范食品理化检测附录E食品样品的抽取、制备和保存进行。提取5001于040L100g（.，加水5102min，3030min，410000r/min离心8min净化准确移取5mL上清液直接上样于C18-氨基复合小柱，使样品自然通过，接收全部流出样液，将样液在40℃水浴条件下氮气吹至近干，用乙腈水溶液（5.3）定容至1mL，过0.22μm滤膜，上机测定。液相色谱-质谱参考条件C181001.7μmA=5mmol/LB=1；c)柱温：40℃；流速：0.3mL/min；5。表1 流动梯程序时间（min)A%B%095.05.00.595.05.03.001004.001005.095.05.0（ESI+）；3kV；5001000L/h；150L/h；700kpa；（MRM）。（ESI-）；2.8kV；5001000L/h；150L/h；700kpa；（MRM）。表2 MRM化合物模式母离子（m/z）子离子（m/z）锥孔电压（V）碰撞电压（V）氯霉素ESI-321.0152.0*4020321.0257.04015氯霉素-D5ESI-326.1157.0*4020326.1262.14015甲硝唑ESI+172.1128.1*2020172.182.12015甲硝唑-D4ESI+176.182.12020176.1128.1*2015注：*为定量离子3表3相对离子丰度（%）≤10＞10～20＞20～50＞50允许相对偏差（%）±50±30±25±20在液相色谱(（5.12），B。结果按式（1）计算：式中：

𝑋=(1)𝑚×𝑉2×1000X ——μg/kg；C ——μg/L；——（10mL），——（5mL），——（1mL），1000——换算系数；m ——g。灵敏度取样量按5.00g计算，方法检出限为：氯霉素0.10μg/kg，甲硝唑0.10μg/kg。方法定量限为：氯霉素0.30μg/kg，甲硝唑0.30μg/kg。准确度0.30μg/kg~5.0μg/kg71.0%~119%。精密度本方法批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤30%。附录A（资料性）甲硝唑、氯霉素及内标的中英文通用名称、化学分子式和CAS号甲硝唑、氯霉素及内标的中英文通用名称、化学分子式和CAS号见表A.1。表A.1甲硝唑、氯霉素及内标的中英文通用名称、化学分子式和CAS号中文通用名称英文通用名称化学分子式CAS号甲硝唑MetronidazoleC6H9N3O3443-48-1甲硝唑-D4Metronidazole--D4（ethyleneD4）C6H5D4N3O31261392-47-5氯霉素ChloramphenicolC11H12Cl2N2O556-75-7氯霉素-D5Chloramphenicol-D5（RingD4，BenzylD）C11D5H7Cl2N2O5202480-68-0附录B（资料性）标准溶液和空白基质加标样品中甲硝唑和氯霉素的特征离子质量色谱图A.1A