全面详解EDTA依赖假性血小板减少症产生与预防

2/2全面详解EDTA依赖假性血小板减少症产生与预防

EDTA是一种可按1:1进行螯合钙离子和其他多价金属离子的多聚酸，该化合物的钠盐和钾盐被广泛应用于检验科标本处理过程中，常见的有Na2EDTA,K2EDTA

和

K3EDTA。国际血液学标准化委员会（ICSH）也提倡使用的K2EDTA抗凝血样进行血液学分析，该建议已被大多数欧洲国家和日本所接受，但K3EDTA仍然在英国和美国广泛使用。使用K2EDTA较K3EDTA的一个附加优点是喷雾干燥形式的实用性，还降低了因稀释和血细胞渗透压变化的影响。

EDTA作为抗凝剂广泛应用于实验室检测中，EDTA依赖假性血小板减少症（EDTA-PTCP）是罕见现象（一般人群发生率大约0.1%）。这种现象的发生多因体内存在最适反应温度为0-4℃的抗血小板抗体，在EDTA存在时，该抗体通过识别血小板粘附受体gpⅡb-Ⅲa并触发络氨酸激酶途径，活化血小板，在体外表现为表现为血小板聚集,最终导致血小板计数的假性减低。及时准确地鉴别这种假象是非常重要的，因为其很容易与其他威胁生命的真性血小板减少相混淆。

在1973年，Shreiner和Bell发表论文第一次描述了一种新型的血小板凝集素，通过观察6例患者（3例合并动脉粥样硬化心血管疾病，2例合并肝脏疾病和1例急性自身免疫性血小板减少性紫癜）发现了该异常现象。这种聚集现象可发生在37℃和室温，同时伴随EDTA存在。标本内大部分血小板在接触到EDTA后30min内聚集完成，在随后的2h内聚集血小板数量逐渐增加，凝集活性与γ-球蛋白含量相关。部患者该类血小板聚集可被抗-IgG和抗Ig-M抗血清所抑制。该现象与年龄和性别无关，也很少与各种疾病有相关，比如烧伤，创伤，败血症，感染人类免疫缺陷病毒（HIV），风疹，巨细胞病毒，自身免疫性疾病，恶性肿瘤，心脏手术，药物及心脑血管相关血栓性疾病。有文献报道，母体血清因子可经胎盘传给新生儿导致一过性血小板减少。一些患者存在典型的IgM抗体与柠檬酸钠抗凝血37℃出现血小板聚集相关。通常来讲，血涂片中血小板聚集体的大小和数量与血常规中血小板结果减低密切相关，但涂片内可不存在血小板卫星现象及巨大血小板。伴随HIT或DIC时血小板变化是疾病影响所致，并不引起血小板激活或功能障碍。

准确及时的识别血小板减少是真性血小板减少还是EDTA-PTCP是十分重要的，不仅因为严重血小板减少可引起大出血风险，假性血小板减少可导致临床医生作出一些不恰当的临床决策，比如血小板输注，脾切除，取消或延迟外科有创操作，避免麻醉，造成需要使用抗血小板或抗凝药物患者延期治疗以及实施更深一步过度检查，最后最重要的是因其患者情绪焦虑。

根据当前的科学文献的数据，为提高EDTA-PTCP的临床检出率应履行：“五条基本原则”。

“五条基本原则”

1.PLT计数异常，特别是<100×109/L；

2.发生在室温下EDTA抗凝血样的血小板减少者，将该标本至于37℃温育后再检测血小板降低程度较前者小或使用其他抗凝剂的血标本检测结果降低程度较低；

3.EDTA抗凝血样的血小板计数结果呈时间依赖性的降低；

4.通过血细胞分析仪或显微镜检测的证据证明在EDTA抗凝血样中存在血小板凝集或凝块；5.没有血小板减少的临床体征和临床表现。

对于如何预防这种假象发生，已经提出几种补救措施，比如：将标本在37℃下温育，使用添加剂，或为预防血小板聚集设计的特殊抗凝剂配方。这些特殊添加剂包括缓冲的柠檬酸盐，肝素，草酸铵，β-hydroxyethyltheophylline，氟化钠，CPT(柠檬酸三钠，5'-磷酸吡哆醛和Tris),抗血小板药物如乙酰水杨酸（ASA），前列腺素

E1，三磷酸腺苷双磷酸酶或用于识别纤维蛋白原和vW因子的结合位点的单克隆抗体，叠氮化钾，丁胺卡那霉素，卡那霉素或其他氨基糖苷类。然而值得注意的是，尽管将标本在37℃下温育同时添加枸橼酸钠，硼化钠或肝素对预防EDTA-PTCP患者的血小板聚集绝大多数情况是有效的。这些补救措施对一些患者可能仍然无效（比例高达15%-20%）。

目前，血液学检查在医生制定临床治疗决策中起着十分重要的作用。然而，实验室诊断并没有像期待的那样安全可靠。在整个测试过程中，发生错误的概率仍然是高的令人无法接受。可靠的证据表明大部分实验室错误产生于分析前及分析后阶段，尤其是标本采集和处理过程。EDTA-PTCP患者本身并没有相关疾病，但是该现象可导致医生错误诊断，尤其干扰严重血小板减少疾病的诊断如DIC或HIT。在一些血液分析仪上，表现为全血细胞计数时导致假性白细胞增多。Chae等的研究认为提高血液分析过程的有效性可降低由EDTA-PTCP引起结果错误风险方面具有一定价值。对于大部分实验室