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文档简介
选修1基础知识点背诵
《果酒及果醋及制作》
一,果酒制作
1.原理:菌种,属于核生物,新陈代谢类型___________________,
有氧时,呼吸的反应式为:;无氧时,呼吸的反应式
为:。
2.条件:繁殖最适温度_________,酒精发酵一般限制在。
(传统发酵技术所运用的酵母菌的来源)
现在工厂化生产果酒,为提高果酒的品质,更好地抑制其它微生物的生长,实行的措施
是。
4.试验设计流程图
5.依据教材P4操作提示设计试验步骤及装置。
充气口作用;排气口作
用;
出料口作用。
排气口要通过一个长而弯曲的胶管及瓶身连接,其目的是。
运用该装置制酒时,应当关闭;
制醋时,应将充气口。
6.试验结果分析及评价:可通过嗅觉及品尝初步鉴定,并用检验酒精存在。可视察到的现象
为________________________________________
二,果醋的制作:
1.原理:菌种:,属于核生物,新陈代谢类为
醋酸生成反应式是。
2.条件:最适合温度为,须要足够的。
3.菌种来源:到或购买。
4.设计试验流程及操作步骤:
果酒制成以后,在发酵液中加入或醋曲,然后将装置转移至
℃条件下发酵,适时向发酵液中。假如没有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶盖上纱布,以
减少空气中尘土污染。
三,操作过程应留意的问题
(1)为防止发酵液被污染,发酵瓶要用消毒。
(2)葡萄汁装入发酵瓶时,要留出大约的空间。
(3)制作葡萄酒时将温度严格限制在,时间限制在d左右,可通过对
发酵的状况进行及时的监测。
(4)制葡萄醋的过程中,将温度严格限制在,时间限制在d,并留意适时在
充气。
【疑难点拨】
1、认为应当先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?
应当先冲洗,然后再除去枝梗,以避开除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会。
2、认为应当从哪些方面防止发酵液被污染?
须要从发酵制作的过程进行全面的考虑,因为操作的每一步都可能混入杂菌。例如:榨汁机,发
酵装置要清洗干净;每次排气时只需拧松瓶盖,不要完全揭开瓶盖等。
3.制葡萄酒时,为什么要将温度限制在18〜25℃?制葡萄醋时,为什么要将温度限制在30〜35℃?
答:温度是酵母菌生长及发酵的重要条件。20。左右最适合酵母菌繁殖。因此须要将温度限制在
其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为30〜35℃,因此要将温度限制在30〜
35℃»
4.制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气?
答:醋酸菌是好氧菌,在将酒精变为醋酸时须要氧的参及,因此要适时向发酵液中充气。
《腐乳的制作》
一,腐乳制作的原理
1.腐乳的发酵有多种微生物的协同作用,如,,,
等,其中起主要作用的是。它是一种丝状,常见
于,,,上。新陈代谢类型是。
2.等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的分解成小分子的
及:脂肪酶可以将水解成
及»
3.现代的腐乳生产是在严格的条件下,将优良菌种直接接种在豆
腐上,这样可以避开,保证。
二,腐乳制作的试验流程:
让豆腐长出毛霉一--密封腌制。
三,试验材料
含水量70%的豆腐,粽叶,盘子,盐,黄酒,米酒,糖,香辛料等,广口玻璃瓶,高压锅。
四,试验步骤
1.将豆腐切实3X3X1若干块
2.豆腐块放在铺有干粽叶的盘内,每块豆腐等距离排放,豆腐上再铺干净粽叶,再用保鲜膜包袱。
3.将平盘放在温度为的地方,毛霉渐渐生长,大约5d后,豆腐表面丛生直
立菌丝。
4.当毛霉生长旺盛,呈淡黄色时,去除保鲜膜及粽叶,散热及水分,同时散去霉味约36h。
5.豆腐凉透后,将豆腐间的菌丝拉断,整齐排在容器内,准备腌制。
6.长满毛霉的豆腐块(以下称毛坯)分层摆放,分层加盐,并随层高而增加,
在瓶口表面铺盐__________________,以防止,约腌制8d。
7.将黄酒,米酒及糖,香辛料等混合制成卤汤。卤汤酒精含量限制在为宜。
8.广口玻璃瓶刷洗干净,用高压锅在100℃蒸汽灭菌30,将腐乳成坯摆入瓶中,加入卤汤及辅料后,
将瓶口用酒精灯加热灭菌,用胶条密封,常温下,六个月即可以成熟。
【疑难点拨】
1.王致及为什么要撒很多盐,将长毛的豆腐腌起来?盐在该过程中起什么作用?
盐能防止杂菌污染,避开豆腐腐败。盐能抑制多种微生物的生长。
2.配制卤汤时,一般将酒精含量限制在12%左右,过高过低都不行,为什么?
酒精含量的高低及腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越
大,使腐乳成熟期延长;酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁殖快,豆腐易腐
败,难以成块。
3.豆腐坯用食盐腌制,其作用是什么?
①渗透盐分,析出水分②给腐乳以必要的咸味
③防止毛霉接着生长及污染的杂菌繁殖④浸提毛霉菌丝上的蛋白酶
4.腐乳在酿造后期发酵中添加多量酒液的目的是什么?
①防止杂菌污染以防腐
②及有机酸结合形成酯,由于酒中特殊是黄酒中含有酵母茴,经发酵可产生醇,并及有机酸结合形成
酯,给予腐乳风味
③利于后期发酵
5.卤汤中香辛料的作用是什么?
①调味②促进发酵③杀菌防腐
说明:(香辛料如花椒,大蒜,茴香中含有花椒酰胺,蒜辣素,茴香醴及茴香醛等,有极强的杀菌
力;又有良好的调味功能;香辛料成分参及发酵过程,合成困难的酯类,使腐乳形成特有色,香,
味。)
6.你能利用所学的生物学知识,说明豆腐长白毛是怎么一回事?
答:豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。
7.我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?
答:含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。
8.吃腐乳时,你会发觉腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?
它的作用是什么?
答:“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳的“体”,使腐
乳成形。“皮”对人体无害。
《探讨加酶洗衣粉的洗涤效果》
一,基础知识
3.在本课题中,我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题:一是一般洗衣粉及加酶洗衣粉对衣物污
渍的效果有什么不同;二是在什么温度下运用加酶洗衣粉最好,三是的洗
衣粉,其洗剂效果有哪些区分。
匚,试验操作
1.探究一般洗衣粉及加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果
(1)试验遵循的原则:试验变量为洗涤剂,设计时应遵循原则,原贝h有效地限
制其他变量,如水的用量,污染物的量,所用试验用布的质地大小,两种洗衣粉的用量,搅拌及洗
涤时间。
(2)试验过程
①取两只大烧杯并,用量筒分别量500蒸储水放入其中,放入40℃的水浴锅保温。
②将制好的污染布及洗衣粉(一组为及,另一组为
及)分别放入两只烧杯中。
③用玻璃棒同时充分搅拌时间,一段时间后搅拌可重复进行。
④过相同的时间后视察洗涤效果,探究加酶洗衣粉运用时的最适温度。
2.不同种类的酶洗衣粉对同一污渍的洗涤效果
(1)试验原理:不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有,所以对不同污渍的洗
涤效果不同。
(2)试验过程:依据表格设计试验步骤
污渍洗涤效果
编号
类型蛋白酶脂肪酶淀粉酶复合酶一般洗衣酶
1鸡血
2牛奶
3菜油
4番茄汁
5墨水
6染料
【疑难点拨】
1.一般洗衣粉中包含哪些化学成分?
提示:一般洗衣粉中通常包含有:表面活性剂,水软化剂,碱剂,漂白剂等成分,有的洗衣粉中还
含有增白剂,香精及色素,以及填充剂等。
2.在本课题中你准备运用什么方法及标准推断洗涤效果?
提示:可在洗涤后比较污物的残留状况,如:已消逝,颜色变浅,面积缩小等,
3.含有蛋白酶的洗衣粉的洗剂效果好,可以用丝绸作为试验材料吗?
不能。因为丝绸的主要成分是蛋白质,它会被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,损坏衣物。
【典例解析】
下列不属于酶制剂的是
A.蛋白酶B.脂肪酶C.淀粉酶D.麦芽糖酶
解析:目前常用的酶制剂有四大类:蛋白酶,脂肪酶,淀粉酶及纤维素酶。其中,应用最广泛,效
果最明显的是碱性蛋白酶及碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍,奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可
溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶,淀粉酶及纤维素酶也能分别将大分子的
脂肪,淀粉及纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更强的去污实力。
《酵母细胞的固定化》
一,基础知识
▼酶:优点:催化效率高,低耗能,低污染,大规模地应用于食品,化工等各个领域。
实际问题:对环境条件敏感,易失活;溶液中的酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本;反
应后的酶会混合在产物中,如不除去,会影响产品质量。
设想:________________________________________
▼固定化酶:优点_____________________________________________________________
实际问题:一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都是通过一
系列的酶促反应才能得到的
设想:___________________________________________________________
固定化细胞:优点____________________________
二,固定化酶的应用实例
高果糖浆是指___________________________________
能将葡萄糖转化为果糖的酶是。运用固定化酶技术,将这种酶固定在一种
上,
再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着很多小孔的—。酶颗粒无法通过筛板的小
K,而反应溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注
入,使葡萄糖溶液流过反应柱,及接触,转化成果糖,从反应
柱的下端流出。反应柱能连续运用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产
量及质量。
三,固定化细胞技术
固定化酶及固定化细胞是利用或
方法将酶或细胞固定在肯定空间内的技术,包括,及法。
一般来说,酶更适合采纳及法固定,而细胞多采纳法固定化。这是因为细
胞个大,而酶分子很小;个大的细胞难以被或,而个小的酶简单从中漏出。
包埋法法固定化细胞即将微生物细胞包埋在不溶于水的中。常用的载体
有>,,及等。
四,试验操作
(一)制备固定化酵母细胞
制备固定化酵母细胞须要的材料是,,,,
___________,____________,___________,__________,_________及__________
1.酵母菌的活「
活化就是处于状态的微生物重新复原正常的生活状态。
2.配制物质的量尝试为0.05的2溶液
3.配制海藻酸钠溶液
加热溶化海藻酸钠时要留意:__________________________________________________
4.海藻酸钠溶液及酵母菌细胞混合
5.固定化酵母细胞
以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的溶液中,并浸泡
(时间)。
(二)用固定化酵母细胞发酵
1.将固定好的酵母细胞用冲洗2-3次。
2.发酵时的温度就为,时间。
五,结果分析及评价
(一)视察凝胶珠的颜色及形态
假如制作的凝胶珠颜色过浅,呈白色,说明;假如形成
的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明,制作失败,须要再作尝试。
(二)视察发酵的葡萄糖溶液
利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多,同时会闻到
补充:直接运用酶,固定化酶及固定化细胞催化的优缺点:
类型优点不足
对环境条件特别敏感,简单失活;溶液中的酶很难
直接运用酶催化效率高,低耗能,低污染等。回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后
酶会混在产物中,可能影响产品质量。
酶既能及反应物接触,又能及产物分一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,
固定化酶另IJ,同时,固定在载体上的酶还可以很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到
被反复利用。的。
的士g堀桂宙曲的固定后的酶或细胞及反应物不简单接近,可能导致
固定化细胞成本低,操作更简单。反应效果下降等。
【疑难点拨】
1.细胞的活化。
提示:在缺水的状态下,微生物会处于休眠状
态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新复
原正常的生活状态。酵母细胞所须要的活化时
间较短,一般须要0.5~1小时。
直接使用的固定化酶固定化细胞2.如何检验凝胶珠的质量是否合格。
提示:检验凝胶珠的质量是否合格,可以采纳
化学结合法
固定化、物包埋法固以下方法。一是用镣子夹起一个凝胶珠放在试
制作方法
理吸附法固定化验桌上用手挤压,假如凝胶珠不裂开,没有液
定化体流出,就表明凝胶珠的制作胜利。二是在试
验桌上用力摔打凝胶珠,假如凝胶珠很简单弹
是否需要营
否否是
养物质起,也表明制备的凝胶珠是胜利的。
3.酶及细胞分别适应哪种固定方法?
催化反应单一或多种单一一系列提示:一般来说,酶更适合采纳化学结合及物
各种物质各种物质理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法固定化。
反应底物(大分子、小(大分子、小小分子物质这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难
分子)分子)以被吸附或结合,而个小的酶简单从包埋材料
中漏出。
①对环境条
反应物不易【典例解析】
件非常敏
不利于催化与酶接近,酶及细胞分别适应哪种固定方法?
感,易失活
缺点一系列醐促尤其是大分提示:一般来说,酶更适合采纳化学结合及物
②难回收,
反应子物质,反理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法
成本高,即
应效率下降固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;
响产品质量
个大的难以被吸附或结合,而个小的酶简单从
①既能与反包埋材料中漏出。
应物接触.《的粗提取及鉴定》
催化效率
又能与产物成本低、操
优点高、耗能低、一,提取的方法
分离作容易
低污染提取生物大分子的基本思路
②可以重复是________________________________________
利用。对于的粗提取而言,就是要利
用.等在物理及
化学性质方面的差异,提取,去除其他成分。
1)的溶解性及蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同,利用这一特点,选择
适当的盐浓度就能使充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分别目的。
此外,不溶于溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将及蛋
白质进一步的分别。
2)对酶,高温及洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解,但是对没有影响。大多数
蛋白质不能忍受60-80的高温,而在以上才会变性。洗涤剂能够瓦解,但对没有影
响。
3)的鉴定在条件下,遇会被染成色,因此二苯胺可以作为鉴
定的试剂。
二,试验设计
1)试验材料的选取凡是含有的生物材料都可以考虑,但是运用的生物组
织,胜利的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的试验材料:
鱼卵,猪肝,菜花(花椰菜),香蕉,鸡血,哺乳动物的红细胞,骄猴桃,洋葱,豌豆,
菠菜,在液体培育基的大肠杆菌
2)裂开细胞,获得含的滤液动物细胞的裂开比较简单,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入
肯定量的,同时用搅拌,过滤后收集滤液即可。假如试验材料是植物细胞,须要先用
溶解细胞膜。例如,提取洋葱的时,在切碎的洋葱中加入肯定的及,进行充分的搅
拌及研磨,过滤后收集研磨液。
3)去除滤液中的杂质
4)的析出及鉴定
将处理后的溶液过滤,加入及滤液体积,冷却的____,静置_________,溶液中会出
现,这就是粗提取的。用玻璃棒搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水
分。
取两支20的试管,各加入物质的量浓度为的溶液5,将丝状物放入其中一支试管中,
用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4的—
。混合匀称后,将试管置于中加热5,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的
变化,看看溶解有的溶液是否变。
三,操作提示
以血液为试验材料时,每100血液中须要加入3g,防止。
加入洗涤剂后,动作要,,否则简单产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操
作。加入酒精及用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致分子不能形成絮状沉
淀。
二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。
四,结果分析及评价
【疑难点拨】
1.为什么加入蒸锵水能使鸡血细胞裂开?
答:蒸储水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅
拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的裂开(细胞膜及核膜的裂开),从而释放出。
2.加入洗涤剂及食盐的作用分别是什么?
答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于的释放;食盐的主要成分是,有利于的溶解。
3.假如研磨不充分,会对试验结果产生怎样的影响?
答:研磨不充分会使细胞核内的释放不完全,提取的量变少,影响试验结果,导致看不到丝状沉淀物,
用二苯胺鉴定不显示蓝色等。
4.此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?
答:可能含有核蛋白,多糖及等杂质。
5.为什么反复地溶解及析出,能够去除杂质?
答:用高盐浓度的溶液溶解,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使析出,能除去溶解在低盐
溶液中的杂质。因此,通过反复溶解及析出,就能够除去及溶解度不同的多种杂质。
6.方案二及方案三的原理有什么不同?
答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的及蛋白质分开;方案三利用的是及蛋白质对高温
耐受性的不同,从而使蛋白质变性,及分别。
7.的溶解度及溶液浓度的关系:
当溶液浓度低于0.14时,随浓度的上升,的溶解度降低;当溶液浓度高于0.14时,随浓度上升,的溶
解度上升。
8.制备鸡血细胞液时,要在簇新的鸡血中加入柠檬酸钠的缘由
制备鸡血细胞液时,要在簇新的鸡血中加入抗凝剂一一柠檬酸钠,防止血液凝固。其原理是柠檬酸钠能
及血浆中介发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的"大大减少,血液便不会凝固,因为鸡血红
细胞,白细胞都有细胞核,主要存在于细胞核中,所以在离心或静置沉淀后,要弃出上层清液一一血
浆。
9.提取的第一步是材料的选取,其目的是肯定要选取含量较高的生物材料,否则会由于试验过程中或
多或少的损失而造成检测的困难;第二步是的释放及溶解,这一步是试验胜利及否的关键,要尽可能使
细胞内的全部溶解;第三步是的纯化,即依据的溶解特性,对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大
限度地将及杂质分开;最终一步是对进行鉴定,这是对整个试验的结果的检测。
10.在的析出的步骤中用到玻璃棒搅拌时,留意动作要轻缓,以免加剧分子的断裂,导致分子不能形成
絮状沉淀。
11.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞裂开以后释放出的,简单被玻璃容器吸附,由
于细胞内的含量原来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的就会更少。因此,试验过程中最
好运用塑料的烧杯及试管,这样可以减少提取过程的的损失。
[典例解析]
本试验中有二次过滤:
⑴过滤用蒸储水稀释过的鸡血细胞液
⑵过滤含粘稠物的0.14溶液
⑶过滤溶解有的2溶液
以上三次过滤分别为了获得()
A含核物质的滤液,纱布上的粘稠物,含的滤液
B含核物质的滤液,滤液中粘稠物,含的滤液
C含核物质的滤液,滤液中粘稠物,纱布上的
D含较纯的滤液,纱布上的粘稠物,含的滤液
答案:A
解析:用蒸镭水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜,核膜裂开,释放出核物质,此时过滤只能得到含
及其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必需经过试验中其他步骤得相继处理,方能得到较纯的。在0.13
溶液中溶解度最低,成丝状粘稠物,可经过滤留在纱布上。
《血红蛋白的提取及分别》
基础知识
1.凝胶色谱法
凝胶色谱法也称做,是依据分别蛋白质的有效方法。凝胶事实
上是一些由构成的多孔球体,在小球体内部有很多贯穿的通道,相对分子质量不同的蛋
白质分子通过凝胶时速度不同,相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道,路
程,移动速度;而相对分子质量________的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在
移动,路程,移动速度。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分别。
2.缓冲溶液
缓冲溶液的作用是。缓冲溶液通常由
溶解于水中配制而成的。生物体内进行的各种生物化学反应都是在肯定的下进行的,例如:血浆的
是,要在试验条件下精确模拟生物体内的过程,必需保持体外的及体内的基本一样。
3.电泳
电泳是指。很多重要的生物大分子,如多肽,
核酸等都具有可解离的基团,在肯定的下,这些基团会带上。在电场的作用下,这些带电
分子会向着及其所带电荷的电极移动。电泳利用了待分别样品中各分子以及
分子本身的,的不同,使带电分子产生不同的,从而实现样品中各种分
子的分别。
两种常用的电泳方法是及,在测定蛋白质分子量时通常运
用。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于
以及等因素。
4.蛋白质的提取及分别
蛋白质的提取及分别一般分为四步:,,及。
5.样品处理
血液由及组成,其中红细胞最多。红细胞具有
的特点。红细胞中有一种特别重要的蛋白质,其作用是
,血红蛋白有一个肽链组成,包括,其中每条肽链环绕一
个,磁基团可携带O血红蛋白因含有呈现红色。
红细胞的洗涤洗涤红细胞的目的是,采集的血样要
及时采纳分别红细胞,然后用胶头吸管吸出上层透亮的,将下层暗红色的
倒入烧杯,再加入,缓慢搅拌,低速短时间离心,如此重复洗涤三次,直
至,表明红细胞已洗涤干净。
血红蛋白的释放在及作用下,红细胞裂开释放出血红蛋白。
分别血红蛋白溶液将搅拌好的混合溶液离心后,试管中的溶液分为4层。第一层为无色透亮
的,第2层为白色薄层固体,是,第3层是红色透亮液体,这
是,第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤,除去之溶性沉淀
层,于分液漏斗中静置片刻后,分出下层的红色透亮液体。
透析取1的血红蛋白溶液装入中,将透析袋放入盛有300的物质的量的浓度为20的
中,透析12h。透析可以去除样品中的杂质,或用于更换样品的。
6.凝胶色谱操作
第一步要制作,第二步要,因为所以装柱前须要依
据色谱柱的内体积计算所须要的凝胶量。在装填凝胶柱时,不得有存在。因为气泡
会,降低分别效果。第三步是一
[疑难点拨]
1.凝胶色谱法分别蛋白质的原理
凝胶色谱法也称为安排色谱法,它是依据分子量的大小分别蛋白质的方法之一,所用的凝胶事实上是一
些微小的多孔球体,这些小球体大多数是由多糖类化合物构成,小球体内部有很多贯穿的通道,当一个
含有各种分子的样品溶液缓慢流经时,各分子在色谱柱内进行两种不同的运动,即垂直向下的运动及无
规则的扩散运动,相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部,只能分布在颗粒之间,通过
的路程较短,移动速度较快;相对分子质量较小的蛋白质分子比较简单进入凝胶内的通道,通过的路程
较长,移动速度较慢。因此,样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出,相对分子质量中等的分子后流
出,相对分子质量最小的分子最终流出,这种现象又叫分子筛现象。此外,凝胶本身具有三维网状结
构,相对分子质量大的分子通过这种网状结构上的空袭时阻力大,而相对分子质量小的分子通过时阻力
小,因此不同分子量的蛋白质分子可以获得分别。
2.及其他真核细胞相比,红细胞的特点及这一特点对进行蛋白质的分别的意义
哺乳动物及人的成熟的红细胞是双面凹圆饼状,没有细胞核及细胞器。其含有的血红蛋白是有色蛋白,
因此在凝胶色谱分别时可以通过视察颜色来推断什么时候应当收集脱液。这使血红蛋白的分别过程特别
直观,大大简化了试验操作。
3.电泳的作用及其原理
电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。很多重要的生物大分子,如氨基酸,多肽,蛋白
质,核甘酸,核酸等都具有可解离基团,它们在某个特定的下会带上正电或负电;在电场的作用下,
这些带电分子会向着及其所带电荷相反的电极方向移动。电泳技术就是在电场的作用下,利用待分别样
品中各种分子带电性质以及分子本身大小,形态等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从
而达到对样品进行分别,鉴定或提纯的目的。
4.你能从凝胶色谱的分别原理分析为什么凝胶的装填要紧密,匀称吗?
答:凝胶事实上是一些微小的多孔球体,小球体内部有很多贯穿的通道。相对分子质量较大的蛋白质分
子不能进入凝胶颗粒内部,只能分布在颗粒之间,通过的路程较短,移动速度较快;相对分子质量较小
的蛋白质分子比较简单进入凝胶内的通道,通过的路程较长,移动速度较慢。因此,样品中相对分子质
量较大的蛋白质先流出,相对分子质量中等的分子后流出,相对分子质量最小的分子最终流出,从而使
各种相对分子质量不同的分子得以分别。假如凝胶装填得不够紧密,匀称,就会在色谱柱内形成无效
的空隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流淌次序,影响分别的效
果。
[典例解析]
用凝胶色谱法分别蛋白质时,分子量大的蛋白质(D)
A路程较长,移动速度较慢B路程较长,移动速度较快
C路程较短,移动速度较慢D路程较短,移动速度较快
解析:在小球体内部有很多贯穿的通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小
的蛋白质简单进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入
凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。
国典例题醯
例题1,关于果酒制作过程中的叙述正确的是(B)
A先去烂子粒及枝梗,再用清水冲洗污物B发酵的温度维持在20C最好
C发酵过程中须要适时打开瓶盖放气,以防发酵瓶裂开D须要不断的充入氧气
解析:为防杂菌污染,烂子粒应当冲洗之前去除,而去枝梗应在冲洗之后;酵母菌酒精发酵需在无氧条
件下进行,通气时只能拧松瓶盖不可打开瓶盖;最相宜温度为20℃。
例题2,关于果醋制作过程中的叙述正确的是(C)
A打开发酵瓶是因为全过程须要通入氧气,排出二氧化碳
B醋酸菌在糖源及氧气足够时,能将葡萄糖分解成醋酸及二氧化碳
C当糖源不足时,醋酸菌可将酒精分解成醋酸
D要使果酒变成果醋只需通入氧气,加入醋酸菌就可以了
解析:醋酸菌及酵母菌发酵的区分在于前者需氧,不产生二氧化碳,而且发酵的最适温度也不同。
例题3,腐乳制作过程中影响其风味及品质的因素有哪些?(A)
①盐的用量②酒的种类及用量③发酵温度④发酵时间⑤辛香料的用量
A①②③④⑤B①②③C①②⑤D③④
解析:盐,酒,辛香料不仅用来调味,还可抑菌,防腐乳变质。相宜的盐的用量及酒的浓度还影响发
酵中蛋白酶的作用发挥;发酵时间及温度都会影响腐乳的风味。
例题4,将10毫升酵母菌液放在相宜的温度下培育,并且于不同时间内等量匀称取样4次,分别测定
样品中酵母菌的数量及,结果如下表。请分析回答:
样品酵母菌的数量(个
112104.8
28205.4
312103.7
410005.0
①表中样品取样先后次序是
②对酵母菌而言,10毫升该培育液的环境负荷量为个。
③若第五次匀称取样时,样品中的酵母菌数量为760(个,),产生这一结果的缘由
是d
解析:(1)由于酵母菌进行有氧呼吸及无氧呼吸都产生二氧化碳,使发酵液的酸性增加。依据样品大
小,越早取样越大,由此取样顺序为2,4,1,3o
(2)经过培育10培育液中有菌数1210个3,环境负荷量应为1.21X107。
(3)培育液中的养分物质不断被消耗,值减小,部分酵母菌因养分缺乏不适应而死亡并解体。
答案:2,4,1,3;1.21X107;培育液中的养分物质不断被消耗,值减小,部分酵母菌因养分缺乏
不适应而死亡并解体。
例题5,水果罐头盖上印有“如发觉盖子鼓起,请勿选购”的字样,引起盖子鼓起的最可能缘由是
(B)
A,好氧型细菌呼吸,产生2及H20B,酵母菌呼吸,产生2及C2H5
C,乳酸菌呼吸,产生2及C3H603D,酵母菌呼吸,产生2及H20
[解析]罐头是密封,杀菌的,但不解除有微生物的抱子等存活下来,只有进行无氧呼吸的微生物可以
生存;罐头鼓胀是过期后微生物生活产气的结果,乳酸菌无氧呼吸产生乳酸,无气体产生;酵母菌既可
以在有氧条件下生活,也可以在无氧条件下发酵产生酒精及二氧化碳。
例题6,有人测定了A,B,C,D四种植物体内多种酶的活性及温度的关系,结果如下图所示。依据
图中的信息,你认为在25摄氏度条件下,竞争实力最强的生物及对温度适应范围最广的生物分别是
(A)
AB及DBB及CCB及ADA及C
例题7,(05年杭州高三第一次检测)下图是人体内某个化学反应的示意图,图中代表酶的英文字母
是(A)
[解析]酶是起催化作用的,它在反应前后的性质保持不变,据图可以说明A所代表的物质是酶。所以
在特定条件及肯定的时间内,酶的催化作用可以始终保持。
例题8,(04年北京东城区综合检测)试验探讨对酶活性的影响,准备5支含有等量胃蛋白酶溶液但
各不相同的试管,每支试管加1块13的正方体凝固蛋白块,试管均置于25c室温条件下,将各试管
蛋白块消逝的时间记录于下表:
酶溶液的蛋白块消逝的时间()
113
29
311
445
5>60
(1)酶活性最强时的是。
(2)蛋白块消逝的时间及酶活性强弱的关系是。
(3)请以2种方法改进试验,使试验在更短的时间内完成。
(4)在人体消化道中,能分泌本试验中酶的部位是。
(5)为确认蛋白块的消逝是由于酶的作用,还应对试验进行什么设计
[答案]⑴2
(2)酶活性越大,蛋白质分解越快,蛋白块消逝的时间越短
(3)方法I:将题给温度由25c提高至大约37℃o方法H:将原题中正方体蛋白块处理得更小
(如切成0.5X0.5X0.5=0.1253),这相当于消化道内进行的物理性消化
(4)胃(答小肠不给分,因及题意不符)
(5)另增加一个试管,放入等量的蛋白块并将调得适当,但不加酶溶液
例题9,现有相同容积的玻璃缸几只,利用自然的清水,同龄且发育状态相同的小蝌蚪60只,饲喂
蝌蚪的饲料,未经处理的具有生物活性的甲状腺激素,并把具有生物活性的甲状腺激素放在50℃的温
水中处理10o依据这些现有的条件,请你设计一个试验,验证甲状腺激素经过处理以后,是否还有生
物活性。
(1)试验方案的设计
第一步,取玻璃缸3只,分别标记为甲,乙,丙;
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