高中生物重点实验知识总结

实验I高中生物重点实验知识总结!

作者：一气贯长空

101.斐林试剂检测可溶性还原糖屋

原理：还原糖+斐林试剂一砖红色沉淀

注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使

用，而且是现用现配，条件需要水浴加热。

应用：检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中

含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断，如糖尿

病、肾炎。

%2.苏丹m、苏丹w检测脂肪胆

原理：苏丹m+脂肪-橘黄色；

苏丹w+脂肪一红色。

注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察。

应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪。

3.双缩服试剂检测蛋白质

原理：蛋白质+双缩腮试剂一紫色

注意：双缩腺试剂在使用时，先加A液再加B液，反应

条件为常温（不需要加热）。

应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴

定。

鬲4.碘液检测淀粉直

原理：淀粉+碘液-蓝色

注意：这里的碘是单质碘，而不是离子碘。

应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉

刊5.DNA的染色与鉴定温

染色原理：DNA+甲基绿一绿色

应用：可以显示DNA在细胞中的分布。

鉴定原理：DNA+二苯胺一蓝色

应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂。

6.毗罗红使RNA呈现红色

原理：RNA+毗罗红T红色

应用：可以显示RNA在细胞中的分布。

注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基

绿和毗罗红混合染色剂，而不是单独染色。

7.台盼蓝使死细胞染成蓝色

原理：正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性

能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜

不完整的细胞,胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝

色。

应用：区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。

qJ8.线粒体的染色胆

原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可

以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无

色。

应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。

M9.酒精的检测胆

原理：橙色的重锚酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生

化学反应，变成灰绿色。

应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否

产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。

口10.CO2的检测口J

原理：C02可以使澄清的石灰水变混浊，也可使浸麝香

草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。

应用：根据石灰水混浊程度或漠麝香草酚蓝水溶液变黄

的时间长短，可以检测醵母菌培养液中CO2的产生情

况。

11.染色体（或染色质）的染色

原理：染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液或醋酸洋红

溶液）染成深色。

应用：用高倍镜观察细胞的有丝分裂。

12.亚硝酸盐的检测出现玫瑰红

原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发

生重氮化反应后，与N-1.蔡基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰

红色染料。

应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目

测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

%.........................13.麻的的检短口』

原理：细菌合成的腺酶可以将尿素分解成氨，氨会使培

养基的碱性增强，使PH升高，从而使酚红指示剂变红。

应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂，

培养某种细菌后，看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌

能否分解尿素。

%14.伊红美蓝检测大肠杆菌胆

原理：在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的代谢产物（有机

酸）与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色。

应用：用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。

15.刚果红检测纤维素分解

原理：刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多

糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和

葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入

刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合

物。当纤维素被纤维素分解菌分解后，刚果红•纤维素的

复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为

中心的透明圈。

高中考纲规定教材的19个实验可分为:

(1)显微镜观察类实验：一、三、四、六、十、十二;

(2)探究性实验：七、九、十三、十五、十七、十九;

(3)验证性实验：二、A；

(4)模拟实验：五、十一、十六；

(5)调查类实验：十四、十八。

实验一观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)

1、原理、步骤、结论

甲基域+DNAY现燎色

毗多红+RNA理现红色

DNNA

KN在

NA堀

中

施

分

的

布

2、实验注意事项

⑴选材：口腔上皮细胞或洋葱内表皮细胞（无色）【不能

用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞，防止颜色的干扰】

（2）缓水流冲洗目的：防止玻片上的细胞被冲走。

（3）几种试剂在实验中的作用

①0.9%NaCl溶液（生理盐水）：保持口腔上皮细胞正常形态。

②8%盐酸：a.改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞;

b.使染色体中DNA与蛋白质分开，有利于染色。

③甲基绿吐罗红染液：混合使用且需现配现用。

实验二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质（必修一

P18）

1、实验原理及步骤

讨某些化学试剂能够使组织中的有

n关有机物发生特定的颜色反应

步骤:选材一制备组织样液~加斐林试剂

一水浴加热煮沸一显色（砖红色沉淀）

步骤:选材一制片一加苏丹m（或苏丹W）

染液染色f漂洗f镜检（橘黄色或红色）

步骤:选材f制备组织样液f加双缩

胭试剂A一摇匀一加双缩胭试剂B

f观察颜色（紫色）

2、实验注意事项

⑴还原糖鉴定实验材料要求：需为白色或浅色，且还原糖

含量高。

【不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰；

不能用马铃薯（含淀粉）、甘蔗、甜菜（含蔗糖）。］

⑵唯一需要加热：还原糖鉴定，且必需水浴加热，不能用

酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。

（3）非还原糖（如蔗糖）十斐林试剂（水浴加热），现象不是

无色而是浅蓝色［Cu（0H）2的颜色］o

（4）唯一需要显微镜一一脂肪鉴定，实验用50%酒精的作用

——洗掉浮色。

⑸斐林试剂：需混合加入，且现配现用；双缩版试剂：需

分别加入（先加A液，后加B液）。

实验三用显微镜观察多种多样的细胞（必修一P7）

使用

微镜的

1、显

显

微

镜

镜观察

用高倍

然后再

察，

镜观

低倍

的先用

使

大观察

需要放

镜下把

用在低倍

央

视野中

移动到

方的部分

法

镜

高倍物

，换上

物镜

低倍

移走

晰

物像清

旋，使

焦螺

细准

调节

缓缓

项：

意事

的注

使用

微镜

2、显

镜。

高倍

镜后

低倍

：先

后高

先低

。

倍数

放大

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镜距

，物

越长

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越短

目镜

系：

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放大

镜头与

。

越大

倍数

放大

近，

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镜的

低倍

镜与

高倍

3、

困

视野范

距离

玻片的

物循与

度

视野高

胞数目

看到细

小

物像大

小

近

暗

少

大

高倍循

小

低倍镜

大

远

高

多

7）

一P4

（必修

绿体

和叶

粒体

察线

四观

实验

验原理

1、实

。

观察

直接

片后

，制

染色

不需

色，

呈绿

绿体

①叶

②线粒体需用健那绿（专一性线粒体的活细胞染料）染成蓝

绿色后制片观察。

2、实验材料：

①观察叶绿体用碎类或菠菜叶片；

②观察线粒体用人的口腔上皮细胞。

3、注意问题

①实验过程中的临时装片要始终保持有水状态。

②选鲜类、黑藻类叶：因为叶子薄而小，叶绿体清楚，可取

小叶直接制片；

实验五通过模拟实验探究膜的透性（必修一P60）

1.渗透系统的组成（如图）及条件

（1）半透膜：可以是具选择透过性膜的生物膜，也可以是物

理性的过滤膜。

⑵膜两侧的溶液具浓度差：是指物质的量浓度，而非质量

浓度。

2、注意事项

①水分子的移动方向：可双向移动，但整体上水分子是从低

浓度f高浓度。

②达到渗透平衡后，只要存在液面差/力，则8溶液的浓度

仍大于S2溶液的浓度。

③若Si为10%蔗糖溶液，S2为10%葡萄糖溶液（若都不能透过

半透膜），则水分子由漏斗进烧杯使漏斗液面下降。

实验六观察植物细胞的质壁分离和复原（必修一P61）

1、原理：成熟的植物细胞构成渗透系统。

失水

离

>壁

外

细

原

界

胞

生

溶

液

质

液

浓

层

浓

度

度A

2、流程

制作洋葱鳞片叶表皮临时装片

(①有一个紫色的中央大液泡

用低倍显微镜观

[②原生质层紧贴细胞壁

瞬显卡噌皿激

吸水纸吸引、清水

[①中央液泡逐渐胀大，颜色变浅

低倍显微镜观察

I②原生质层逐渐贴近细胞壁

3、质壁分离发生的条件：活的植物细胞、大液泡、浓度差

4、质壁分离的原因分析

外因：外界溶液浓度＞细胞液浓度；

内因：原生质层相当于一层半透膜，且细胞壁的伸缩性小于

原生质层；

表现：液泡由大变小，细胞液的颜色由浅变深，原生质层与

细胞壁逐渐分离。

5、特别提醒

(1)必须选择有大液泡并有颜色的植物细胞，便于在显微

镜下观察。

(2)若用50%蔗糖溶液做实验，能发生质壁分离但不能复

原，因为细胞过度失水而死亡。

(3)若用尿素、KN03等溶液会出现自动复原现象。

实验七探究影响酶活性的因素(必修一P78)

1、酶的高效性一一比较过氧化氢在不同条件下的分解

(1)实验过程分析

~~［无机催化剂(FeCh)和过氧化氢篇一］

(KSS)-［♦物(HQJ的分解速)可用产生的气泡的数目多森司

^曲」加入的量；实验室的温度；FeCh和肝脏研磨液的］

新鲜程度

(2)实验注意事项

实验时必须用新鲜的肝脏作实验材料，若不新鲜细胞内的过

氧化氢酶等有机物可能在细菌的作用失活。

2、酶的专一性

该实验探究中的自变量可以是反应物不同，也可是酶种类不

同；因变量是反应物是否被分解。

(1)方案一：用同一种酶催化两种不同物质

J淀粉(非还原糖)粉醯-麦芽糖(还原糖)

I蔗糖(非还原糖)淀粉酶•蔗糖

②用淀粉酶分别作用于淀粉和蔗糖后，再用斐林试剂鉴

定，根据是否有砖红色沉淀生成来判断淀粉酶是否对二

者都有催化作用，从而探究酶的专一性。

方案二：用两种不同酶催化同一种物质

①J淀粉（非还原糖）淀粉酶•麦芽糖（还原糖）

,淀粉（非还原糖）^淀粉

②再用斐林试剂鉴定，从而探究酶的专一性。

3、探究温度对酶活性的影响

淀粉分解量的多少（用碘液检测

是否出现蓝色及蓝色深浅表示）

（1）实验过程分析

（2）实验注意事项

①由于过氧化氢酶受热会分解，所以不能用过氧化氢为底

物。

②由于斐林试剂在使用时需加热，所以应用碘液检测因变

量。

4、探究pH对酶活性的影响

思考：为什么不能用淀粉酶为底物探究pH的实验？

答：因为淀粉在酸性条件下会分解，这对于判断淀粉酶

能否使得淀粉水解出现干扰。故不能使用。

实验八叶绿体色素的提取和分离（必修一P97）

1、提取色素原理：色素能溶解在无水乙醇等有机溶剂中。

2、分离色素原理：各色素随层析液在滤纸上扩散速度不

同，从而分离色素。

【溶解度大，扩散速度快；溶解度小，扩散速度慢。】

3、各物质作用：

无水乙醇：溶解并提取色素；

层析液：分离色素；

二氧化硅：使研磨得充分；

碳酸钙：中和液泡破损时释放的有机酸，防止色素分子被破

坏。

4、分离结果：滤纸条从上到下依次是“胡黄ab”。【色素

带的宽窄与色素含量相关】

实验九探究酵母菌的呼吸方式（必修一P91）

1、原理：

有氧条件：CBH1206+602+6H206fC02+12乩0+能量

无氧条件：CfiH12O6-2C2H50H+2C02+少量能量

2、检测：

（1）检测CO?的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溟麝香草

酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。

（2）检测酒精的产生：橙色的重倍酸钾溶液，在酸性条件

下与酒精发生反应，变成灰绿色。

实验十观察细胞的有丝分裂（必修一P115）

1、材料：洋葱根尖（或葱，蒜）2、步骤：

（1）洋葱根尖的培养（2）装片的制作流程：解离（解离

液）一漂洗（清水洗3min）-染色（龙胆紫或醋酸洋红）一

制片

3、观察：

（1）先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，

排列紧密，有的细胞正在分裂。

（2）换高倍镜下观察：处于分裂间期的细胞数目最多。注

意问题：

（1）为何每条根只能用根尖？取根尖的最佳时间是何时？

为何？答：因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；上午10

时到下午2时；因为此时细胞分裂活跃。

（2）解离和压片的目的分别是什么？压片时为何要再加一

块载玻片？

答：解离和压片的目的都是为了使细胞相互分离开