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第1节重组DNA技术的基本工具题组一基因工程的概念和工具酶1.玉米的PEPC酶固定CO2的能力较水稻的强60倍。我国科学家正致力于将玉米的PEPC基因导入水稻中,以提高水稻产量。下列有关该应用技术的叙述,不正确的是()A.该技术是在DNA水平上进行设计和施工的B.该技术的操作环境是生物体内C.该技术的原理是基因重组D.该技术的优点是定向产生人类需要的生物类型2.科学家把兔子血红蛋白基因导入大肠杆菌细胞中,在大肠杆菌细胞中合成了兔子的血红蛋白。下列关于这一先进技术的理论依据,不正确的是()A.所有生物共用一套遗传密码B.基因能控制蛋白质的合成C.兔子血红蛋白基因与大肠杆菌的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成,都遵循相同的碱基互补配对原则D.兔子与大肠杆菌有共同的原始祖先3.据图所示,有关工具酶功能的叙述不正确的是()A.限制性内切核酸酶可以切断a处B.DNA聚合酶可以连接a处C.解旋酶可以使b处解开D.DNA连接酶可以连接c处4.限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶,下列有关说法正确的是()A.DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键B.限制酶只能切割双链DNA片段,不能切割烟草花叶病毒的核酸C.E.coliDNA连接酶既能连接黏性末端,也能连接平末端D.限制酶主要从原核生物中分离纯化而来,所以也能剪切自身的DNA5.限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的脱氧核苷酸序列。如图所示为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的识别序列,箭头表示每一种限制酶的特定切割位点,切割出来的DNA片段末端可以互补黏合的是__________(限制酶),其正确的末端互补序列应该为()A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列为AATT—B.BamHⅠ和HindⅢ;末端互补序列为GATC—C.EcoRⅠ和HindⅢ;末端互补序列为AATT—D.BamHⅠ和BglⅡ;末端互补序列为GATC—6.(2023·江苏南京高二期中)下列关于如图所示黏性末端的说法,错误的是()A.DNA连接酶能催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键B.甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的C.切割甲的限制酶也能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子D.甲、乙黏性末端可形成重组DNA分子题组二“分子运输车”——载体7.质粒是基因工程中常用的载体。下列有关质粒的说法,正确的是()A.质粒上的基因表达不遵循中心法则,所以可用作外源DNA分子的载体B.具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件C.质粒上的抗生素合成基因可作为标记基因D.作为外源DNA分子的载体,质粒需具有限制酶能够切割的位点8.(2023·河北秦皇岛高二期末)下列有关基因工程中载体的说法,正确的是()A.基因工程中使用的载体只有质粒B.质粒是细胞质中能够自我复制的环状DNA分子C.噬菌体可以作为动物基因工程的载体D.天然质粒均可以直接作为载体将目的基因送入受体细胞9.如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点(箭头表示相关酶的切割位点)。如图是酶切后产生的几种末端。下列有关说法正确的是()A.BamHⅠ切割的是氢键,AluⅠ切割的是磷酸二酯键B.Sau3AⅠ和BamHⅠ切割的序列产生的片段能够相连,连接后的片段还能被Sau3AⅠ切割C.DNA连接酶能连接②⑤,不能连接②④D.E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接①③,且连接效率低10.某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关叙述不正确的是()a酶切割产物(bp)b酶再次切割产物(bp)2100;1400;1000;5001900;200;800;600;1000;500A.a酶与b酶切断的化学键相同B.a酶与b酶切出的黏性末端能相互连接C.a酶与b酶切割该DNA分子位点分别有3个和5个D.限制酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子11.下列有关限制性内切核酸酶的叙述,正确的是()A.用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有2个磷酸二酯键被断开B.限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的概率就越大C.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接D.只有用相同的限制酶处理含目的基因的片段和质粒,才能形成重组质粒12.(2023·福建泉州高二期末)如表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点,由此推断以下说法,正确的是()限制酶名称识别序列和切割位点限制酶名称识别序列和切割位点BamHⅠKpnⅠEcoRⅠSau3AⅠHindⅡSmaⅠ注:Y=C或T,R=A或G。A.限制酶SmaⅠ切割后形成的末端可用E.coliDNA连接酶连接B.Sau3AⅠ限制酶的切割位点在识别序列的外部C.BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶切割后形成不同的黏性末端D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列13.根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)限制酶切割DNA分子后产生的DNA片段,其末端类型通常有________________________和__________________。(2)质粒载体用限制酶X(识别的序列由6个核苷酸组成)切割后产生的片段如下:eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(AATTC……G,G……CTTAA))该酶识别的序列为__________________,切割的部位是________________________________。(3)为使切割后的载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外,还可用限制酶Y切割,两种酶共同的特点是______________________________________________________________________________________________________________________________。(4)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即________DNA连接酶和________DNA连接酶,其中后者只能连接一种末端。(5)基因工程中除质粒外,______________和______________也可作为载体。14.(2021·全国乙,38节选)用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中要使用多种工具酶,其中4种限制性内切核酸酶的切割位点如图所示。回答下列问题:(1)常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,题图中__________________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA连接酶连接,题图中________________________切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是__________________。(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征,如质粒DNA分子上有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中______________;质粒DNA分子上有_____________________________,便于外源DNA的插入;质粒DNA分子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因),利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞,方法是_____________________________________
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