【某医院近年来的副溶血弧菌食源性疾病情况实践调研报告5400字（论文）】

某医院近年来的副溶血弧菌食源性疾病情况调研分析报告TOC\o"1-2"\h\u15454前言 1228631材料 279261.1研究对象 2180471.2本研究主要仪器与试剂 2155092方法 3209132.1采样方法 3132982.2实验方法 3208302.3数据处理 6291173结果 659333.1不同年份副溶血弧菌阳性检出情况 64883.2不同季度副溶血性弧菌阳性检出差异 693473.3不同性别及年龄检出差异 7308483.4摄入可疑食物检出差异 7236944分析与讨论 956345结论 10前言食源性疾病[1]是指各种致病因素通过食物进入人体而引起的有毒或传染性疾病。认知疾病有200多种，包括胃肠道疾病、神经免疫疾病、多器官功能衰竭甚至癌症，这些疾病可能发生在“从农场到餐桌”的每一个环节。常见的致病因素包括各种致病微生物、真菌及其毒素、天然毒素、寄生虫和有毒化学物质。食源性疾病是一个日益严重的全球公共卫生问题。在发达国家，每年有超过30%的人口患有食源性疾病。我国每年27.94%的急性胃肠炎病例为食源性疾病。虽然大多数食源性疾病是轻微的自愈性疾病，但严重的感染和严重的并发症，包括死亡，也会发生[3]。食源性疾病最常见的临床表现是胃肠道症状。然而，这些疾病也可能有神经、妇科、免疫学和其他症状。摄入受污染的食物会导致多个器官衰竭，甚至可能导致癌症，这造成了相当大的残疾和死亡率负担。大多数食源性疾病的临床表现是轻度的自愈性疾病。由于这类疾病发病率高，涉及人数多，是全球重要的公共卫生问题，也是我国最大的食品安全问题[4]。国内外信息显示[5]，微生物污染是引起食源性疾病的主要原因，细菌性食源性疾病无论从发生的事件起数和发病人数都是占第1位的，根据国家食品评价中心食源性疾病监测，根据2011-2013年我国食源性暴发的数据显示，疫情逐年增加，截至2014年，共发生1480起疫情，其中由微生物引起的占比最大(43%)，排在前三位的是副溶血性弧菌(14.5%)、沙门氏菌(6.5%)、葡萄球其毒素（5.1%）[6,7]，副溶血性弧菌逐渐超过沙门氏菌成为主要的食源性致病菌[8]，也被视为世界范围内导致腹泻类疾病的最为主要因素之一[9]。副溶血弧菌首次发现[10,11]是1950年在日本发生的一次严重的食物中毒事件。所分离的致病菌在Wagatsuma琼脂培养基上能产生溶血，这种现象称为神奈川现象。副溶血性弧菌食物中毒最早见于1962年的《中华医学杂志》，并经分离鉴定。副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性嗜盐菌，是一种人源性疾病，可通过伤口感染人体，引起蜂窝组织炎、游泳性中耳炎甚至败血症等肠道外感染。该病原体是沿海地区夏秋节日引起食物中毒的常见病原体之一。进食被该病原体污染的食物后，人体在8-30小时内出现腹部绞痛、腹泻、发热、呕吐、寒战等反应[12,13]，可导致死亡，严重度甚至出现急性胃肠炎和原发性败血症[14]。近年来食品安全问题层出不穷，副溶血性弧菌引起的食物中毒事件居高不下。而我国对致病微生物引起的食源性食品安全问题重视尚不足，并随着海产品的热潮的出现，我国食品中副溶血性弧菌的防控形势十分严峻，防治工作面临诸多新的问题和挑战。本研究拟对湘西州某医院2017-2019年副溶血弧菌食源性疾病进行调查，了解致病性弧菌污染的水平，为食源性疾病防控和水/海产品食用风险评估提供基础数据，引起当地相关部门重视。材料研究对象采集湘西州某医院2017-2019年食源性疾病病例的粪便或肛拭子401份，对采集粪便或肛拭子标本中副溶血弧菌进行检测。本研究主要仪器与试剂表1.1仪器仪器生产公司生物安全柜济南鑫贝西生物技术有限公司高压灭菌锅菲尔实验设备有限公司细菌培养箱博科表1.2试剂仪器生产公司氯化钠碱性蛋白胨水Cary-Blair运送培养基科玛嘉弧菌显色培养基3%氯化钠甘露醇试验培养基3%氯化钠赖氨酸脱酶试验培养基3%氯化钠MR-VP培养基及试剂北京海富达科技有限公司氧化酶试剂三糖铁ONPG试剂SS琼脂平板我葁血琼脂平板3%氯化钠胰蛋白陈大豆琼脂平板硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）北京陆桥上海艾妍生物科技有限公司方法2.1采样方法由于病人摄入食物（甲鱼，大/小田螺，基围虾，牛蛙等）所导致的食源性疾病，所以采集病人粪便或肛拭子。收集含水样或絮凝物的液体粪便2~5ml，成形粪便取至少一块蚕豆大小的粪便(约5克)，放入灭菌容器中。如无法获得粪便，可将用保鲜液或增菌液浸湿的棉签，插入肛门4

~

5cm深(小儿2~3cm)，轻轻旋转一圈。取出直肠表面黏液后，盛入保存液中送检。实验方法2.2.1增菌方法新鲜粪便:用无菌棉签收集少量粪便，将棉签放入3%氯化钠碱性蛋白胨水中，轻轻拧管帽，表面有一层标本即可。过量的标本不宜置于3%氯化钠碱性蛋白胨水中。肛拭子:将粪便拭子转移至Cary-Blair运送培养基中，轻轻搅拌混合后的标本，将拭子放入3%氯化钠碱性蛋白水中，轻轻盖紧。注意:拭子表面只需要一层标本。过量的标本不宜置于3%氯化钠碱性蛋白胨水中。3%氯化钠碱性蛋白胨水在36℃±1℃条件下培养8h~16h。2.2.2分离培养增菌液分别划线接种TCBS琼脂平板、SS琼脂平板和科玛嘉弧菌显色培养基，在35℃培养箱培养18-24小时，观察典型菌落特征。副溶血性弧菌在TCBS生长为圆形、半透明、光滑的绿色菌落，直径为2-3mm，用接种环轻轻接触时，其质地类似于口香糖;在SS琼脂平板上，副溶血性弧菌生长为扁平、无色、半透明菌落，直径1~2mm，菌落中央呈一点凸起，因宛如蜡滴，所以菌落往往不容易挑起，有辛辣味;在科玛嘉弧菌显示培养基上菌落呈圆形、半透明、表面光滑的粉紫色，直径2-3mm。2.2.3纯培养从上述分离平板上挑取可疑菌落，接种划线于3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板，在35℃培养箱中培养18-24小时。2.2.4形态和生化鉴定（1）初步鉴定革兰染色：菌落大小约为0.3~2μm，革兰氏阴性，在不同培养基下，细菌形态为多形性弧菌或微弯曲弧菌，还有弧形、椭圆形、杆状等形态。细菌的一端有鞭毛，运动活泼，无芽胞和荚膜。氧化酶(OX)试验：用无菌滤纸条取3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板上待测菌落少许，加氧化酶试剂1滴，阳性者立即呈现粉红色或红色。三糖铁实验：从纯培养中挑取单个可疑菌落，斜面并穿刺于3%

氯化钠三糖铁琼并穿刺底部。在36℃±1℃条件下培养24h，观察结果。在3%三糖铁钠琼脂中，底层变黄而不变黑，无气泡，斜面颜色不变或红色加深。嗜盐性实验：挑取纯培养的单个可疑菌落，分别接种于氯化钠浓度为0%、6%、8%和10%的胰胨水，在36℃±1℃培养24h，观察液体混浊情况。（2）确定鉴定甘露醇发酵：挑取纯培养的单个菌落接种于含3%氯化钠的甘露醇试验培养基，在35℃培养箱培养24-48小时，观察结果。赖氨酸脱梭酶试验：将纯培养物单菌落分别接种3%氯化钠赖氨酸降纤酶培养基和对照培养基，35℃培养24-

48h。如果检测培养基由黄色变为紫色，而对照培养基仍然是黄色，则认为是阳性。V-P试验：取纯培养单菌落接种3%氯化钠MR-VP培养基，35℃培养24-48小时。取lml培养物，移至另一管中，加入V-P试剂甲液

0.6ml，摇匀，再加入V-P试剂乙液

0.2ml，摇匀。加入肌酸结晶3mg,

4小时后观察结果。液体颜色呈粉色是阳性的结果。ONPG试验：将若干纯培养菌落接种于0.25

mL

3%氯化钠溶液中，在通风柜中，往里加入1滴甲苯，摇匀后置于37℃水浴中静置5分钟。加入0.25

mL

ONPG溶液，35℃培养24小时。当溶液变成黄色，为阳性，当它不改变颜色，为阴性。神奈川试验：取纯培养单菌落在我葁血琼脂平板表面涂成直径为1cm大小的圆形，每个平板上可以涂几个待测菌，于35℃培养24小时，观察结果。神奈川试验阳性菌株培养结果为在细菌涂面周围出现透明的β溶血环。表2.1副溶血弧菌的生化特性实验项目结果兰氏染色阴性无芽孢氧化酶+动力+蔗糖-葡萄糖甘露醇++续表2.1实验项目结果分解葡萄糖产气乳糖硫化氢赖氨酸脱羧酶V-PONPG注：阳性+：阴性+--如果检测到的可疑菌落的生化特征与副溶血性弧菌的主要生化特征相一致，则可报告粪便标本中是否检出副溶血性弧菌。2.3数据处理建立Excel收集试验数据，利用统计学软件SPSS23.0进行实验数据处理，副溶血弧菌阳性检出情况、不同年龄组副溶血弧菌阳性的分布情况、不同年份、季度副溶血弧菌阳性和摄入不同食物导致副溶血性弧菌阳性的检出情况。统计分析采用x2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。3结果3.1不同年份副溶血弧菌阳性检出情况3.1湘西州某医院2017-2019年副溶血弧菌食源性疾病检出阳性年份检测数阳性数阳性率（%）ꭓ2P值20171542012.980.7090.0292018143149.79201910443.84总计401389.47401份标本检出副溶血弧菌菌阳性标本38份，阳性率9.47%。副溶血性弧菌阳性检出率2017年为12.98%，2018年为9.97%，2019年为3.50%，在2017-2019年间副溶血性弧菌阳性检出率逐年减少，差异具有统计学意义（ꭓ2=0.709,P<0.05）。不同季度副溶血性弧菌阳性检出差异表3.2湘西州某医院2017-2019年各季度副溶血弧菌食源性疾病检出阳性不同季度检测数阳性数阳性率（%）ꭓ2P值第一季度68710.29第二季度641015.62第三季度14075.00第四季度1291410.85比较不同季节副溶血性弧菌检出情况，各季度副溶血弧菌阳性率其差异具有统计学意义（ꭓ2=0.709，P<0.05），第一季度到第四季度副溶血性弧菌检出率分别为10.29%，15.62%，5.00%，10.85%。其中第二季度副溶血弧菌阳性率最高（15.62%），3.3不同性别及年龄检出差异表3.3湘西州某医院2017-2019年副溶血弧菌食源性疾病检出阳性人群分布情况性别年龄检测数阳性数阳性率（%）ꭓ2P值<5600.005-103026.67男11-20941010.6421-304548.8931-4050714.00总计243239.46<5700.005-102015.00女11-20701014.2821-305024.0031-402926.89总计158159.49比较不同年龄组副溶血性弧菌检出情况，各年龄组副溶血弧菌阳性率其差异具有统计学意义(ꭓ2=10.058，P<0.05)，男性31-40岁年龄组的副溶血性弧菌检出率最高(14.00%)，女性11-20岁年龄组的副溶血性弧菌检出率最高(14.28%)。比较不同性别副溶血性弧菌检出情况，其检出率无统计学意义（ꭓ2=，P>0.05），男性副溶血性弧菌检出率（9.46%）略小于女性副溶血性弧菌检出率（9.49%）。3.4摄入可疑食物检出差异表3.4湘西州某医院2017-2019年副溶血弧菌食源性疾病摄入可疑食物检出阳性不同种类食物检测数阳性数阳性率（%）ꭓ2P值海产品基围虾76810.52带鱼49714.28总计1251512.000.3990.528田螺30723.33草鱼22313.63淡水产品花蛤24520.831.9460.746白贝19315.78蛙20220.00总计1152017.39鱿鱼干2229.09鱿鱼丝2214.54干制海/水产品带鱼干2200.00鲫鱼干2000.00总计8633.48凉拌海带3013.33食藻类食物凉拌海白菜2414.16凉拌海花2100总计7522.67四类产品的副溶血性弧菌阳性检出率有显著差异性（ꭓ2=16.105，P<0.001），四类产品的副溶血性弧菌阳性检出率分别为12.00%，17.39%，3.48%，2.67%。其中淡水产品副溶血性弧菌阳性检出率最高（17.39%），其次为海产品中的副溶血性弧菌阳性检出率（12.00%）。海产品包括基围虾和带鱼，其中海产品当中带鱼的副溶血性弧菌阳性检出率较高（14.28%）。淡水产品包括田螺，草鱼，花蛤，白贝，蛙,淡水产品中田螺副溶血性弧菌阳性检出率最高（23.33%），其次为花蛤（20.83%）。干制海/水产品包括鱿鱼丝，鱿鱼干，鲫鱼干，干海带，当中鱿鱼干副溶血性弧菌阳性检出率最高（13.63%），食藻类食品包括凉拌海带，凉拌海白菜，凉拌海花，当中凉拌海白菜副溶血性弧菌阳性检出率最高（4.16%）。分析与讨论对湘西州某医院2017-2019年食源性疾病病例信息进行分析，结果显示，疑似副溶血弧菌的患者共401例，检出副溶血弧菌阳性标本38份，阳性率9.4%。副溶血性弧菌阳性检出率2017年为12.98%，2018年为9.97%，2019年为3.50%。检出率逐渐下降，这说明随着相关部门的质量措施的落实，湘西州食源性疾病副溶血弧菌病发率下降。据研究显示，一般副溶血性弧菌导致的食源性疾病呈季节性，多发在夏秋季节[14]。本研究副溶血性弧菌检出率在第二季度最高，这与湘西夏季季闷热常年下雨，湿度大，适宜细菌繁殖，食物容易变质有关。据报道[15]女性和男性副溶血性弧菌阳性检出率无明显差异，而这与本实验结果一致。从不同年龄不同性别相比较，男性31-40岁年龄组的副溶血性弧菌检出率最高(14.00%)，女性11-20岁年龄组的副溶血性弧菌检出率最高(14.28%)。由此断人群男性青壮年人群往往喜好生食或半生食水产品，而女性青少年有更多的机会在野外聚餐。在夏季，烧烤等常见烹调方法可能不能充分加热食物，或直接生吃的食物可能受到副溶血性弧菌的污染，而低年龄段人群则较少食用[16]。食用水产品或海产品的时候，必须要充分的进行加热，只有这样才能够更加全面彻底的将食物里面所带有的细菌所杀死，减少副溶血性弧菌中毒的可能性。在处理熟食、生菜的时候一定要分开，避免在操作的时候出现交叉感染问题。副溶血性弧菌阳性病例中疑似食物阳性率占比最高的是淡水产品，高达17.39%。活产品阳性率高于干制水/海产品和