高中生物选修一生物技术实践知识点总结

中学生物选修一生物技术实践学问点总结

专题一传统发酵技术的应用课题1果酒和果醋的制作

1、发酵：通过微生物技术的培育来生产大量代谢产物的过程。

2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵无氧发酵：酒精发酵乳酸

发酵

3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式：出芽生

殖（主要）抱子生殖

4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H1206+602->62+6H20

5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。C此206-2C2H5+62

6、20℃左右最相宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度限制在18℃-25℃

7、在葡萄酒自然发酵的过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵

母菌.在发酵过程中，随着酒精浓度的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液,使

葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大

多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。

8、醋酸菌是单细胞细菌（原核生物），代谢类型是异养需氧型，生殖方式为二分

裂

9、当氧气、糖源都足够时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源

时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。C2H5+02-3+20

10、限制发酵条件的作用①醋酸菌对氧含量特殊敏感，当进行深层发酵时，即

使短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最适生长温度为30〜

35℃,限制好发酵温度，使发酵时间缩短，又削减杂菌污染的机会。③有两条

途径生成醋酸：干脆氧化和以酒精为底物的氧化。

11、试验流程：选择葡萄一冲洗一榨汁一酒精发酵一果酒（一醋酸发酵一果醋）

12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铭酸钾来检验。在酸性

条件下，重铭酸钾与酒精反应呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液2mL,再

滴入物质的量浓度为3的比。滴，振荡混匀，最终滴加常温下饱和的重铭酸钾

溶液3滴，振荡试管，视察颜色

充,口13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；

推M排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是

用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身

出料口J相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。开口向下

的目的是有利于二氧化碳的排出。运用该装置制酒时，

应关闭充气口；制醋时，应当充气口连接气泵，输入氧气。

13、应先冲洗，再除去枝梗，以避开除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污

染的机会。

14、你认为应当从哪些方面防止发酵液被污染？

如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精

消毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。

课题2腐乳的制作

1、多种微生物参加了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主

要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌。代谢类型是异养需氧型。生殖方式是

抱子生殖。营腐生生活。

2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽

和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

3、试验流程：让豆腐上长出毛霉一加盐腌制一加卤汤装瓶一密封腌制

4、酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。

前期发酵的主要作用：1.创建条件让毛霉生长。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使

腐乳成型。后期发

酵主要是酶与微生物协同参加生化反应的过程。通过各种辅料与酶的缓解作

用，生成腐乳的香气。

5、将豆腐切成3义3义1的若干块。豆腐的含水量为70%左右，水分过多则腐

乳不易成形。

毛霉的生长：条件：将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的限制在15~18℃,

并保持肯定的温度。

来源：1.来自空气中的毛霉抱子，2.干脆接种优良毛霉菌种时间：5天

加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着

层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐腌制的时间约为

8天左右。

•用盐腌制时，留意限制盐的用量：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长,

可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味

•食盐的作用：1.抑制微生物的生长，避开腐败变质2.析出水分，是豆腐变

硬，在后期制作过程中不易酥烂3.调味作用，给腐乳以必要的咸味4.浸提毛

酶菌丝上的蛋白酶。

•配制卤汤：卤汤干脆关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒与各种香辛料配

制而成的。卤汤中酒的含量一般限制在12%左右。

•酒的作用：1.防止杂菌污染2.与有机酸结合形成酯，给予腐乳风味3.酒精

含量的凹凸与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系，酒精含量越高，对蛋白酶

的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加

快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。

•香辛料的作用：1.调味作用2.杀菌防腐作用3.参加并促进发酵过程

•防止杂菌污染：①用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。②装

瓶时，操作要快速当心。整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密

封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。

6、豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有

匍匐菌丝。

7、腐乳外部有一层致密的“皮二“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的

菌丝（匍匐菌丝），

对人体无害。它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形。

酶

课题3制作泡菜反应式为：C6H1206------>2C3H6。3+能量

•制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型。分裂方式是二

分裂。含抗生素牛奶不能生产酸奶的缘由是抗生素杀死乳酸菌。常见的乳酸

菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。乳酸杆菌常用于生产酸奶。

•亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食品生产中用作食品添加剂。膳食中的

亚硝酸盐一般不会

危害人体健康，国家规定肉制品中不超过30,酱腌菜中不超过20,婴儿奶粉中

不超过

2O亚硝酸盐被汲取后随尿液排出体外，但在相宜、温度和肯定微生物作用下

对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与「蔡基乙二胺盐

酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目

测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。

专题二微生物的培育与应用课题1微生物的试验室培育

培育基：人们依据微生物对养分物质的不同需求，配制出供其生长

繁殖的养分基质，

是进行微生物培育的物质基础。

依据物理形态可分为液体培育基半固体培育基和固体培育基。在液体培育

基中加入凝固剂琼脂后，制成琼脂固体培育基。微生物在固体培育基表面生长,

可以形成肉眼可见的菌落。依据菌落的特征可以推断是哪一种菌。液体培育基

应用于工业或生活生产，固体培育基应用于微生物的分别和鉴定，半固体培育

基则常用于视察微生物的运动与菌种保藏等。

•依据成分培育基可分为人工合成培育基和自然培育基。合成培育基是用成分

已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分别鉴

定。自然培育基是用化学成分不明的自然物质配制而成，常用于实际工业生产。

•依据培育基的用途，可将培育基分为选择培育基和鉴定培育基。选择培育基

是指在培育基中加入某种化学物质，以抑制不须要的微生物生长，促进所须要

的微生物的生长。鉴别培育基是依据微生物的特点，在培育基中加入某种指示

剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。

•培育基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。

•碳源：能为微生物的代谢供应碳元素的物质。如2、3等无机碳源；糖类、石

油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳

源。

•氮源：能为微生物的代谢供应氮元素的物质。如M、3、；（无机氮源）

蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白陈（有机氮源）等。只有固氮微生物才

能利用N2O

•培育基还要满意微生物生长对、特殊养分物质以与氧气的要求。例如，培育

乳酸杆菌时须要在培育基中添加维生素，培育霉菌时须将培育基的调至酸性，

培育细菌是须要将调至中性或微碱性，培育厌氧型微生物是则须要供应无氧的

条件

・无菌技术•获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌的入侵，要留意以下几个

方面：

①对试验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

②将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌。

③为避开四周环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰旁边进行。

④试验操作时应避开已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触。

无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外，还能有效避

开操作者自身被微

生物感染。

消毒指运用较为温柔的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人

体有害的微生物（不包括芽抱和抱子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒

法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消

毒、紫外线消毒。

灭菌则是指运用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物，包括芽抱和

抱子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等运用灼烧灭菌法；

②玻璃器皿、金属用具等运用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌

箱；

③培育基、无菌水等运用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽

灭菌锅。

④表面灭菌和空气灭菌等运用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。

制作牛肉膏蛋白豚固体培育基

（1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

（2）倒平板操作的步骤：

①将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培育基的锥形瓶，左手

拔出棉塞。

②右手拿锥形瓶，将瓶口快速通过火焰。（通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生

物污染培育基。）

③用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中

的培育基（约10-20）倒入培育皿，左手马上盖上培育皿的皿盖。

④等待平板冷却凝固，大约需5〜10。然后，将平板倒过来放置，使培育皿盖

在下、皿底在上。

・倒平板操作的探讨

1.培育基灭菌后，须要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么方法

来估计培育基的温度？

可用手触摸盛有培育基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就

可以进行倒平板了。

2.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？

答：平板冷凝后，皿盖上会凝聚水珠，凝固后的培育基表面的湿度也比较高，

将平板倒置，既可以使培育基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水

珠落入培育基，造成污染。

4.在倒平板的过程中，假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个

平板还能用来培育微生物吗？为什么？

答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底间的培育基上滋生，因此最好不要用这

个平板培育微生物。

纯化大肠杆菌

(1)微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。

(2)平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作。将聚

集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。在数次划线后培育，可以分别到由一

个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。

(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的

菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面，进行培育。分为系列稀释操作和涂布

平板操作两步。

(4)用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物

分散成单个细胞，从而能在培育基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。

(5)平板划线法操作步骤：

①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。②在火焰旁冷却接种环,

并打开棉塞。

③将试管口通过火焰。④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。

⑤将试管通过火焰，并塞上棉塞。⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾

有菌种的接种环快速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。留意不要划

破培育皿。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端起先往其次区

域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。留意不要将最终一区的

划线与第一区相连。⑧将平板倒置放入培育箱中培育。

・平板划线操作的探讨

1.为什么在操作的第一步以与每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作

结束时，仍旧须要灼烧接种环吗？为什么？

答：操作的第一步灼烧接种环是为了避开接种环上可能存在的微生物污染

培育物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的

菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种干脆来源于上次划线的末端，从而通

过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目渐渐削减，以便得到菌落。划线

结束后灼烧接种环，能与时杀死接种环上残留的菌种，避开细菌污染环境和感

染操作者。

2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？

答：以免接种环温度太高，杀死菌种。

3.在作其次次以与其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端起

先划线？

答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线

的末端起先，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减，最终能得到由

单个细菌繁殖而来的菌落。

(6)涂布平板操作的步骤：

①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。②取少量菌液，滴加到培育基表面。③将

沾有少量酒精的涂

布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8〜10s。④用涂布器将菌液匀称地

涂布在培育基表面。

菌种的保存

(1)对于频繁运用的菌种，可以采纳临时保藏的方法。

①临时保藏方法

(2)对于须要长期保存的菌种，可以采纳甘油管藏的方法。放在一20℃的冷

冻箱中保存。

(2)确定培育基制作是否合格的方法

将未接种的培育基在恒温箱中保温1〜2天，无菌落生长，说明培育基的制

备是胜利的，否则须要重新制备。

课题2土壤中分解尿素的细菌的分别与计数

(1)选择性培育基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同

时抑制或阻挡其他种

类微生物生长的培育基，称作选择培育基。

(2)配制选择培育基的依据依据选择培育的菌种的生理代谢特点

加入某种物质以达到

选择的目的。例如，培育基中不加入有机物可以选择培育自养微生物；培育基

中不加入氮元素，

可以选择培育能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可选择培育金黄色葡萄球菌

统计菌落数目

(1)测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜干脆计数。

(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理

当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释

液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少

活细菌。为了保证结果精确，一般设置3〜5个平板，选择菌落数在30〜300

的平板进行计数，并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此,

统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。

采纳此方法的留意事项：1.一般选取菌落数在30^300之间的平板进行计数设

置比照

设置比照的主要目的是解除试验组中非测试因素对试验结果的影响，提高试验

结果的可信度。比照试验是指除了被测试的条件以外，其他条件都相同的试验,

其作用是比照试验组，解除任何其他可能缘由的干扰，证明的确是所测试的条

件引起相应的结果。

试验设计

试验设计包括试验方案，所需仪器、材料、用具和药品，详细的实施步骤

以与时间支配等的综合考虑和支配。

(1)土壤取样铲去表层土，在距地表约3〜8的土壤层取样。

(2)样品的稀释：样品的稀释程度将干脆影响平板上生长的菌落数目。在实

际操作中，通常选用肯定稀释范围的样品液进行培育，以保证获得菌落数在

30~300之间、适于计数的平板。

测定土壤中细菌的数量，一般选用10"105106测定放线菌的数量，一般

选用103104105

34

测定真菌的数量，一般选用1。21010

(3)微生物的培育与视察不同种类的微生物，往往须要不同的培育

温度和培育时间。

细菌30~37℃「2天放线菌25~28℃5~7天霉菌25~28℃3~4天

课题3分解纤维素的微生物的分别

纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即。酶、酶和葡萄糖

昔酶，前两种酶

使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

纤维素分解菌的筛选

(1)筛选方法：刚果红染色法。

(2)原理刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红

色复合物，但并不和

水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培育基中加

入刚果红时，刚果

红能与培育基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果

红一纤维素的复合

物就无法形成，培育基中会出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈。这样，我们

就可以通过是否产

生透亮圈来筛选纤维素分解菌。

分别分解纤维素的微生物的试验流程

土壤取样一选择培育(此步是否须要，应依据样品中目的菌株数量的多少来确

定)一梯度稀释一将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上一选择产生透亮

圈的菌落

(1)土壤采集选择富含纤维素的环境。

(2)刚果红染色法分别纤维素分解菌的步骤倒平板操作、制备菌悬液、涂

布平板

(3)刚果红染色法种类

一种是先培育微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时

就加入刚果红。

课题延长

对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选后，只是分别纯化的第一步，为

确定得到的是纤维素分解菌，还须要进行发酵产纤维素酶的试验，纤维素酶的

发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素

酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

专题三植物的组织培育技术课题1菊花的组织培育

植物组织培育的基本过程基因的选择性表达细胞全能性

细胞分化：在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定

性差异的过程。

离体的植物组织或细胞，在培育了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤

组织，愈伤组织的

细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形态态的薄壁细胞。由高

度分化的植物组织

运用依次试验结果

先生长素，后细胞分有利于分裂但不

裂素分化

先细胞分裂素，后生细胞既分裂也分或细胞产生愈伤组织的过程，称为植

长素化

生长素/细胞分裂素比值与

同时运用分化频率提高

结果

物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分

促根分化，抑芽形

化产生的愈伤组织比值高时

成

接着进行培育，又可以重新分化成根或芽

促芽分化，抑根形

等器官，这个过程叫做再分化。再分化形比值低时

成

成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完

促进愈伤组织生

整的植物体。比值适中

长

植物细胞工程

具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞,都具有发育成完整个体的实

力，即每个生物细胞都具有全能性。但在生物体的生长发育过程中并不表现出

来，这是因为在特定的时间和空间条件下,通过基因的选择性表达,构成不同

组织和器官。

植物组织培育技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作

人工种子;培育作物新品种以与细胞产物的工厂化生产等。

影响植物组织培育的条件

材料：菊花组织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。一般

来说，简洁进行无性繁殖的植物简洁进行组织培育。选取生长旺盛嫩枝进行组

培的是嫩枝生理状态好，简洁诱导脱分化和再分化。

养分：离体的植物组织和细胞，对养分、环境等条件的要求相对特殊，须要配

制相宜的培育基。常用的培育基是培育基，其中含有的大量元素是N、P、S、

K、、，微量元素是、、B、、、、I、，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖

激素：植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关

键性激素。在生长素存在的状况下，细胞分裂素的作用呈现加强趋势。在培育

基中须要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、运用的先后依次、用

量的比例等都影响结果。

环境条件:、温度、光等环境条件。不同的植物对各种条件的要求往往不同。

进行菊花的组织培育，一般将限制在5.8左右，温度限制在18~22℃,并且每

日用日光灯照耀12h.

•固体培育基中各种养分物质的作用是什么？与肉汤培育基相比，培育基有哪

些特点？

大量元素和微量元素供应植物细胞所必需的无机盐；蔗糖供应碳源，维持细胞

渗透压；甘氨酸、维生素等主要是为了满意离体植物细胞在正常代谢途径受到

肯定影响后所产生的特殊养分需求。

微生物培育基以有机养分为主，固体培育基则需供应大量无机养分。

外植体的消毒

外植体：用于离体培育的植物器官或组织片段。选取菊花茎段时，要取生长旺

盛的嫩枝。菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后

在流水下冲洗20左右。用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数

为70%的酒精中摇动2~3次，持续6~7s,马上将外植体取出，在无菌水中清洗。

取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分，放入质量分数为0.K的氯化汞

溶液中广2。取出后，在无菌水中至少清洗3次，漂洗消毒液。

接种：接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种7〜8个外

植体。外植体接种与细菌接种相像，操作步骤相同，而且都要求无菌操作。

培育：应当放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持相宜的温度(18~22℃)

和光照(12h)

移栽：栽前应先打开培育瓶的封口膜，让其在培育间生长几日，然后用流水清

洗根部培育基。然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍宝岩等环境中生活一段时

间，进行壮苗。最终进行露天栽培。

专题2月季的花药培育

被子植物的花粉发育

被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。花药为囊状结构，内部含有

很多花粉。花粉是

由花粉母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。被子

植物花粉的发育要经验小池子四分体时期、单核期和双核期等阶段。在小抱子

四分体时期，4个单倍体细胞连在一起，进入单核期时，四分体的4个单倍体

细胞彼此分别，形成4个具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含深厚的原生质，

核位于细胞的中心（单核居中期）。随着细胞不断长大，细胞核由中心移向细

胞一侧（单核靠边期），并分裂成1个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而

形成两个细胞，一个是生殖细胞，一个是养分细胞。生殖细胞将在分裂一次，

形成两个精子。

产生花粉植株的两种途径

通过花药培育产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种途径，一种是花

粉通过胚状体阶段

发育为植物，另一种是花粉在诱导培育基上先形成愈伤组织，再将其诱导分

化成植株。这两种途径之间并没有肯定的界限，主要取决于培育基中激素的

种类与其浓度配比。

影响花药培育的因素

诱导花粉能否胜利与诱导胜利率的凹凸，受多种因素影响，其中材料的选择与

培育基的组成是主要的影响因素

•亲本的生理状况：花粉早期是的花药比后期的更简洁产生花粉植株，选择月

季的初花期。

•合适的花粉发育时期：一般来说，在单核靠边期期，花药培育胜利率最高

•花蕾：选择完全未开放的花蕾

•亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以与接种密度等对诱导胜利率都有

肯定影响

•材料的选取：选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于相宜

的发育期。确定花粉发育时期的最常用的方法是醋酸洋红法。但是，某些植物

的花粉细胞核不易着色，需采纳焙花青-铭矶法，这种方法能将花粉细胞核染

成蓝黑色

•材料的消毒

•接种和培育：灭菌后的花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并马上将花

药接种到培育基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后简洁从受

伤部位长生愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利

于愈伤组织或胚状体的形成，通常每瓶接种花药7〜10个，培育温度限制在

25℃左右，不须要光照.幼小植株形成后才须要光照.一般经过20〜30天培育

后,会发觉花药开裂,长出愈伤组织或形成胚状体。将愈伤组织与时转移到分化

培育基上，以便进一步分化出再生植株。假如花药开裂释放出胚状体，则一个

花药内就会产生大量幼小植株，必需在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别

移植到新的培育基上，否则这些植株将很难分开。还须要对培育出来的植株做

进一步的鉴定和筛选。

植物组织培育技术与花药培育技术的相同之处是：培育基配制方法、无菌技术

与接种操作等基本相同。两者的不同之处在于：花药培育的选材特别重要，需

0.14

NaCl浓度（mol/L）

C

事先摸索时期相宜的花蕾；花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要与时更

换培育基；花药培育对培育基配方的要求更为严格。这些都使花药培育的难度

大为增加。

专题五DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定

在0.14时溶解度最小；却不能溶于酒精（特殊是95%冷却酒精），但细胞

中蛋白质可溶于酒精。

本试验用鸡血细胞做试验材料有两个缘由。一是因为鸡血细胞核的含量丰

富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作试验材料经

常须要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。

鸡血细胞裂开以后释放出的，简洁被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为

了削减的损失，最好运用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液。

试验操作

制备鸡血细胞液.......加柠檬酸钠，静置或离心

I

裂开细胞，释放…加蒸储水，同一方向快速通方向搅拌

I一过滤，除去细胞壁、细胞膜等。

溶解核内.......加入至2,同一方向缓慢搅拌

I

析出...........加蒸储水至0.14,过滤，在溶解到2溶液中

I—除去细胞质中的大部分物质。

初步纯化.......与等体积95%冷却酒精混合，析出白色丝状物

If除去核蛋白、、多糖等。

AB

鉴定...........二苯胺，沸水浴，呈现蓝色

留意事项：在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固；鸡血静置或离心以提高细胞悬液

浓度；运用塑料烧杯；运用尼龙布过滤；玻棒沿同一方向搅拌；玻棒搅拌要缓

慢（细胞裂开快速搅拌）；玻棒不要遇到烧杯壁；二苯胺试剂要现用现配等。

专题六植物有效成分的提取课题1植物芳香油的提取

自然香料的来源：植物、动物

不同植物的根、茎、叶、花、果实、种子都可以提取芳香油。

芳香油的提取方法：蒸储、压榨、萃取等。

芳香油的性质：挥发性强，成分困难，以菇类化合物与其衍生物为主。

水蒸气蒸储法：

原理：水蒸汽可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物，冷却后水油

分层。

方法：水中蒸镭：原料放在沸水中加热蒸储。

水上蒸僧：原料隔放在沸水上加热蒸镭。

水汽蒸储：利用外来高温水蒸气加热蒸储。

不足：有些原料不相宜于水中蒸僧，如柑橘、柠檬等易焦糊，有效成分简

洁水解。通常用压榨法（通过机械压缩力将液相物从液固两相混合物中分别出

来的一种简洁操作）

萃取法：

原理：芳香油易溶于有机溶剂，溶剂挥发后得到芳香油。如石油酸、酒精、

乙醛等。

方法：原料浸泡在溶剂中一得到浸泡液f有机溶剂挥发一芳香油。

不足：有机溶剂中的杂质影响芳香油的品,温度计

蒸播装置包括：铁架台两个、酒精灯、石棉

网、蒸储瓶、橡胶塞、蒸储头、温度计、直出水”进LA

型冷凝管、接液管、锥形瓶，以与连接进水水蒸气蒸墙装置

口和出水口的橡皮管。

玫瑰精油的提取

•0.1氯化钠溶液：促使油水混合物（乳浊液）中油和水的分别。无水硫酸钠:

汲取油层中的水分。

试验步骤：①采集玫瑰花：采集盛花期（5月中上旬）的玫瑰花，清水清洗沥

干。

②装入蒸储原料：称取50g玫瑰花放入蒸僧瓶，添加200蒸储水。

③安装蒸储装置：依据从左向右、自下到上次序安装水蒸气蒸储装置。

④加热蒸僧：限制蒸僧时间和速度（1〜2滴/秒），获得乳白色乳浊

液；拆卸装置。

⑤分别油层：向乳浊液加入溶液后，利用分液漏斗分别出上面的油层。

⑥除去水分：向油层中加入无水硫酸钠，24h后过滤，得到玫瑰油。

火留意事项：蒸僧时间不能过短，温度不能过高。

橘皮精油的提取

橘皮精油的主要成分：柠檬烯，主要分布在橘皮中。

石灰水：防止压榨时滑脱，提高出油率，降低压榨液黏稠度，过滤不堵塞筛眼。

小苏打、硫酸钠：促进油